生物技术通讯杂志 省级期刊

GGNBP1抗体制备及小鼠组织表达谱分析

作者：赵庆国; 周煜; 张进; 朱恒奇; 曹志国; 卢柏松; 黄培堂 刊期：2005年第02期

体外实验研究表明配子生成素结合蛋白1(GGNBP1)可能与GGN1相互作用形成睾丸特异性复合物,在精子生成过程中发挥作用.从小鼠睾丸总RNA中反转录扩增Ggnbpl全长cDNA,构建表达质粒,在大肠杆菌中表达GGNBP1,经聚丙烯酰胺凝胶纯化后免疫新西兰白兔,制备兔多抗血清.镍离子金属螯合柱纯化表达的GGNBP1蛋白,与NHS活化基团交联,制备GGNBP1抗体亲和层析柱,...

嵌合型HCV全长cDNA的构建及体外转录制备感染性RNA的研究

作者：吕欣; 徐志凯; 薛小平; 尹文; 雷迎峰; 杨敬; 孙梦宁 刊期：2005年第02期

构建HCV la/1b嵌合型全长cDNA克隆,进行体外转录,脂质体法转染HepG2细胞,以RT-PCR法检测HCV正、负链RNA,Western印迹检测HCV蛋白表达.结果表明,细胞在转染后8代(约35d)内,能间断检测到HCV正、负链RNA以及相对分子质量约70000的HCV NS3蛋白,证明该HCV嵌合体可以在细胞中复制和表达.本研究表明含有该嵌合型全长cDNA的质粒可以为后续HCV的研究提供...

逆转录病毒载体介导的LacZ基因在NIH-3T3细胞中的稳定表达

作者：张学明; 岳占碰; 杜崇涛; 安铁洙; 高丰; 邓旭明; 柳巨雄; 成军; 李德雪 刊期：2005年第02期

精原干细胞(SSCs)介导的转基因技术很可能成为制作转基因动物及治疗雄性不育的一条新途径.为了研究逆转录病毒载体介导法转染体外培养SSCs的可行性,用脂质体介导法将携带LacZ基因的重组逆转录病毒载体pLNCL导入包装细胞PA317,用含G418的培养液筛选得到5株稳定转染的产毒细胞.收集这些克隆的产毒上清,过滤后进行倍比稀释,用NIH-3T3细胞通过X-gal...

上海天士力药业有限公司与军事医学科学院生物工程研究所通力合作——注射用重组人尿激酶原冻干粉针剂进入Ⅲ期临床研究

刊期：2005年第02期

上海天士力药业有限公司地处中国药谷——上海市张江高科技园区，是一家蓬勃兴起的生物制药企业。上海市张江高科技园区是中央政府批准设立的部级高新技术产业开发区，是浦东重点功能开发区，园区特设的张江生物医药产业园区是我国部级生物医药产业园区，迄今为止，已有9个部级医药科研机构和多家跨国制药公司入驻张江。

Smad7对Smad2、Smad3、Smad4核转位的抑制作用

作者：王莉; 霍艳英; 张开泰; 王莹; 项晓琼; 胡迎春; 余刚; 李刚; 米粲; 吴德昌 刊期：2005年第02期

研究人永生化支气管上皮BEP2D细胞中,作为Smad蛋白家族的抑制分子,Smad7对TGF-β信号通路中Smad2、Smad3、Smad4核转位的抑制作用.培养BEP2D细胞,瞬时转染Smad7真核表达载体pCISmad7.neo,TGF-β刺激,提取细胞核蛋白及总蛋白,用Western blot方法比较瞬时转染Smad7基因前后细胞核中Smad2、Smad3、Smad4蛋白表达的差异.结果,Smad3在TGF-b作用下有明显...

本刊编辑部办理以下图书和过刊、现刊邮购

刊期：2005年第02期

RNA干扰对Smad7基因的抑制作用

作者：王莹; 霍艳英; 张开泰; 王莉; 项晓琼; 胡迎春; 李刚; 米粲; 吴德昌 刊期：2005年第02期

小分子干扰RNA(siRNAs)可以高效、特异地阻断体内同源基因的表达,促进同源mRNA降解,称为RNA干扰(RNAi).本研究旨在探讨Smad7基因的siRNAs是否能抑制基因的表达.利用RNA干扰技术,设计并合成了针对Smad7基因的siRNAs,用脂质体转染法瞬时转染BEP2D和BERP35T2细胞,用Northern blot法检测RNAi效应;同时设计并合成了绿色荧光蛋白(GFP)的siRNAs,瞬时转...

β-地中海贫血基因检测膜条制备及其临床评价

作者：周枚芬; 陈立炎; 罗小珍; 尹忠华; 张文; 黄坚 刊期：2005年第02期

根据GenBank报道的人β-珠蛋白序列及中国人β-地中海贫血基因特点,设计并合成30条探针用于检测在中国人中发现的17个β-地中海贫血基因突变位点,然后将探针点至醋酸纤维膜上,制成反向杂交膜条,通过检测950份标本,对其临床检测效果进行评价.共制备了含30条寡核苷酸探针的反向杂交膜条,临床验证结果表明,以对照膜条为标准,制备膜条阳性符合率为99.76...

膜芯片检测A组轮状病毒的初步研究

作者：黄海燕; 韩金祥; 王健伟 刊期：2005年第02期

建立表面带正电荷的尼龙膜为基片的基因芯片,采用RT-semi-nested PCR方法,对A组轮状病毒RNA实现高度扩增,并通过5'端带地高辛标记的上游引物实现扩增产物的标记.通过同膜芯片上探针的杂交和免疫显色,实现对A组轮状病毒的检测.结果表明,膜芯片对探针的固定效果、杂交吸脱和检测结果可靠,空白对照和阴性对照均为阴性,探针均显示为阳性信号,并且信...

SARS冠状病毒S基因序列克隆的构建

作者：丁守怡; 宋旭霞; 牟文凤; 闫志勇; 钱冬萌; 王斌 刊期：2005年第02期

构建SARS冠状病毒S基因序列克隆p-SARS-S,作为自行设计、建立的RT-PCR检测方法的阳性对照,并为该基因的表达奠定基础.设计合成了位于病毒基因21 504～22 136位的长633 bp的序列片断作为模板进行PCR扩增;将PCR产物与T-Easy载体连接,经过转化提取重组质粒DNA.对构建的阳性克隆进行PCR、酶切、测序鉴定.对经EcoRⅠ酶切鉴定为阳性的重组表达质粒测序...

山梨糖脱氢酶和氨甲酰化酶的融合表达

作者：高书颖; 张惟材; 汪建华; 郭蔼光 刊期：2005年第02期

利用大肠杆菌-生黑醋杆菌穿梭载体pUG18构建了山梨糖脱氢酶基因sdh和氨甲酰化酶基因hyuC的融合表达质粒pUG18-SDH-HyuC.在JM109/pUG18-SDH-HyuC中检测到山梨糖脱氢酶(SDH)和氨甲酰化酶(HyuC)的酶活性,大量的SDH和HyuC不以融合蛋白形式存在.将质粒pUG18-SDH-HyuC电转化至生黑醋杆菌H24,检测到HyuC活性,但尚未检测到SDH酶活性.从生黑醋杆菌转化子...

B型肉毒毒素重链C端基因的表达与保护作用的初步研究

作者：杨秀清; 荫俊 刊期：2005年第02期

肉毒毒素是肉毒梭状杆菌产生的外毒素,有7种血清型(A～G),是目前已知的毒性最强的细菌蛋白质.人类肉毒中毒主要是由A、B和E型引起.本研究克隆了B型肉毒毒素重链C端片段(Hc),在大肠杆菌中进行了诱导表达,并用Ni离子亲和柱进行了纯化.Hc蛋白免疫后的BALB/c小鼠可以抵抗6×103LD50B型肉毒毒素攻击.

骨形成蛋白-2表达载体的构建及其转录活性测定

作者：邓少林; 郭强; 黄昭明 刊期：2005年第02期

将骨形成蛋白-2(BMP-2)基因克隆入带HA标签的BMP-2表达载体中,得到带HA标签的重组质粒pGBKT7/HA-BMP-2,将该重组质粒转染酵母AH109、Y187细胞,Western印迹检测表明表达了与预期相对分子质量大小一致的BMP-2.BMP-2表达载体的成功构建为深入研究骨形成蛋白-2在促进骨痂生成过程中的分子机制及其生物学功能打下了基础.

第四届海峡两岸肿瘤学术会议征文通知

刊期：2005年第02期

种子中Puroindoline蛋白的SDS—PAGE分析

作者：霍华蕾; 郭坚; 罗杰; 何光源 刊期：2005年第02期

Puroindolne蛋白是小麦中特殊的Triton X-114可溶性蛋白质,对小麦籽粒硬度有着决定性的影响.从二倍体、六倍体小麦材料及小麦近缘种粗山羊草成熟种子中提取Puroindoline蛋白,就对该蛋白的SDS-PAGE及染色条件进行了优化和讨论,建立了浓缩胶T(凝胶浓度)为4、C(交联度)为2.6、电泳电压为128 V;分离胶T为13.5、C为2.6、电泳电压240 V,分离胶电泳时间...