生物技术通讯杂志 省级期刊

双组分核定位信号介导Apoptin定位于肿瘤细胞核

作者：王清明; 范国才; 陈吉中; 陈惠鹏; 贺福初 刊期：2004年第06期

Apoptin是一种来源于鸡贫血病毒的小蛋白,在肿瘤细胞中定位于细胞核,而在正常细胞中主要分布于细胞质.根据预测,Apoptin分子中有2段序列(NLS1和NLS2)可能是单组分核定位信号.通过基因突变和缺失构建了Apoptin各种不同的核定位信号突变体和磷酸化突变体,利用增强型绿色荧光蛋白(EGFP)作标签,观察了其在肿瘤细胞中亚细胞定位的变化.结果表明,NLS1...

BALB／c小鼠I—A^d αβ链RFP融合双顺反子表达载体的构建及其在COS-7中的表达

作者：高明; 王海平; 王燕宁; 周勇; 王全立 刊期：2004年第06期

构建了在β链C端融合红色荧光蛋白(RFP)标签的BALB/c小鼠I-Adαβ链真核双顺反子表达载体pRed-IRES-I-Ad,使用LipofectAMINE2000转染COS-7细胞,用激光共聚焦显微镜观察外源蛋白在细胞中的表达与定位.I-Adαβ分子在COS-7细胞中能够以较高的效率表达,并且在COS细胞中能形成聚集状态.与通常的真核翻译帽子结构起始相比,IRES启动真核翻译系统的效率低于...

鼻咽癌患者的Smad2／4基因突变分析

作者：姚俊岩; 安靓; 谢敏德; 蔡林儿; 孔怡琳; 姚开泰; 杨晓 刊期：2004年第06期

利用PCR-SSCP银染技术对30例鼻咽癌患者的Smad2/4基因的所有外显子进行突变分析,以探讨Smad2/4基因与鼻咽癌发病的可能相互关系.结果在所有病例的所有外显子上没有发现任何类型的突变.Smad2/4基因可能不是鼻咽癌的易感基因,TGF-β/Smad2/4信号通路可能不参与鼻咽癌的发病.

抗整合素β3胞外区噬菌体抗体库的构建及筛选

作者：杨俊涛; 李正强; 王清明; 陈吉中; 范国才; 陈惠鹏 刊期：2004年第06期

用RT-PCR的方法从人胶质瘤BT-325细胞中扩增人整合素β3胞外区,并克隆到载体pET-24a中构建表达载体.表达的人整合素β3胞外区经变性、复性和纯化后免疫BALB/c小鼠,提取脾脏总RNA,用RT-PCR技术扩增小鼠抗体重链(VH)和轻链(VL)可变区基因,经重叠PCR(SOE-PCR)将VH和VL连接成单链抗体(scFv)基因,并克隆到噬菌粒载体pCANTAB5E中,电转化至大肠杆菌TGl,经...

重组腺病毒介导hMYH cDNA在原代培养大鼠心肌细胞中的表达及活性测定

作者：林汝仙; 高大庆; 王升启; 魏启明 刊期：2004年第06期

构建携带hMYH cDNA的重组腺病毒表达载体,制备重组腺病毒,并在原代培养的大鼠心肌细胞中得到了表达,表达的hMYH蛋白具有结合并切割A:8-OXO-G碱基错配的糖苷酶活性,对A:G和A:C错配具有较弱的结合活性和切割活性.该研究为进一步进行hMYH的基因治疗奠定了基础.

基质金属蛋白酶2、9和血管内皮生长因子在碱烧伤小鼠角膜组织中的表达

作者：冯玉梅; 冯怡; 朱旭东; 党颖; 马清钧; 周岐新; 曾昭淳 刊期：2004年第06期

采取滤纸片放置法,用1 mol/L的NaOH在小鼠角膜中央进行碱烧伤,建立动物模型.取烧伤前和烧伤后的小鼠角膜制备组织切片,用抗MMP2、抗MMP9和抗VEGF的抗体分别进行免疫组化染色,检测它们在碱烧伤前后的小鼠角膜组织中的蛋白表达情况;提取碱烧伤前和碱烧伤后不同时间点的小鼠角膜组织的总RNA并进行逆转录,以获得的逆转录产物作为模板,用特异的引物和...

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刊期：2004年第06期

重组α-半乳糖苷酶的制备工艺研究

作者：高红伟; 高新; 鲍国强; 徐莉娟; 王颖丽; 田曙光; 李素波; 徐华; 李立立; 宫锋; 章扬培 刊期：2004年第06期

α-半乳糖苷酶是B→O血型改造研究中的关键工具酶.在获得了可分泌表达α-半乳糖苷酶的基因工程毕赤酵母菌株的基础上,进行了工程菌株在5 L发酵罐中的发酵.发酵液上清中α--半乳糖苷酶活性为80～150 U/mL,蛋白浓度为3～4.5 mg/mL,比活性约为20～30 U/mg.发酵液采用超滤、阳离子交换层析、疏水层析和阴离子交换层析等纯化方法,建立起了规模化生产重组...

马抗SARS—CoV免疫球蛋白制备的研究

作者：田光; 刘士山; 阳幼荣; 马丽娟; 赵光宇; 王希良 刊期：2004年第06期

用纯化灭活的SARS-CoV抗原免疫马匹,采集血浆加入S/D灭活/去除病毒,用硫酸铵盐析沉淀提取抗SARS-CαVIgG,再经胃酶切、柱超滤等工艺制备马抗SARS-CoV免疫球蛋白.研制的马抗SARS-CαV免疫球蛋白制品中和抗体效价达1:6 400以上、F(ab')2纯度在90%以上.建立了高效、稳定、效果好的马抗SARS-CoV免疫球蛋白生产工艺,为SARS的治疗和预防提供了可靠的保证...

驱虫斑鸠菊注射液治疗白癜风的作用机制研究

作者：邓瑞春; 周勇; 张文生; 徐建国; 尚靖; 王旭丹; 于鲁海 刊期：2004年第06期

探讨驱虫斑鸠菊(VW)注射液治疗白癜风的作用机制.进行以下实验探讨VW对小鼠免疫功能的影响:淋巴细胞转化试验测定小鼠脾T、B细胞增殖活性;脾细胞介导羊红细胞定量溶血分光光度法测定B细胞生成抗体活性,流式细胞法测定B细胞上CD19表达活性;迟发型超敏反应(DTH)试验测定T细胞活性、[3H]-TdR掺入法测定T细胞分泌IL-2活性等.用酶学方法研究VW对小鼠...

植物激素对棉花体细胞胚胎发生的诱导及调节作用

作者：王清连; 王敏; 师海荣 刊期：2004年第06期

选用11种激素研究了外源激素对棉花胚性愈伤组织增殖、胚胎发生和发育的调控作用.结果表明不同激素对棉花胚性愈伤组织增殖、胚胎发生与发育的影响不同.除2,4-D和BA对棉花胚性愈伤组织的增殖影响不大外,其他激素对棉花胚性愈伤组织的增殖均具有抑制作用,且具有一定的时间效应,同时还受基因型的影响.激素对棉花体细胞胚的形成和发育的影响极大,2,...

平菇种内原生质体分离与融合杂交育种技术的研究

作者：李省印; 李孟楼; 胡彩霞; 常杨生; 李鸣雷; 张勇 刊期：2004年第06期

将16个平菇资源品种的菌丝体,在25℃、pH 5.8～6.0环境下,分别用1.5%溶菌酶加0.6 mol/L KCl稳渗剂溶解其细胞壁2 h,原生质体数得量最高.将获得的原生质体两两配对成39个组合,在30℃、pH 9、0.6 mol/L KCl稳渗剂、不加融合促进剂CaCl2和PEG6000的融合条件下,得到种内杂交融合子5株.其中4株融合子再生出菌丝体和子实体;同皿接种实验显示,新菌株与...

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刊期：2004年第06期

大蒜有性胚培养首次成功

作者：徐培文; 崔德才; 杨崇良; 曲士松; 刘冰江; 王效睦 刊期：2004年第06期

大蒜(Alium sativum L.)为二年生草本植物,营养丰富,鲜食可做佐餐菜和调味品;配合现代栽培和保鲜贮存技术,可使蒜头、蒜薹、蒜苗周年供应;加工可作调味品、食品、饲料添加剂.

一种快速鉴定转基因植物纯合体的新方法

作者：杜春芳; 李朋波; 李润植 刊期：2004年第06期

植物转化中鉴定转基因植物的整合性是一个很重要的步骤,常规方法是对独立分离的转基因T1代植株产生的T2代进行转基因分离比率研究,以检测T1代的转基因整合状态,不仅费时费力,而且浪费了T1代资源.本文介绍一种应用双重定量实时PCR技术鉴定转基因植物纯合子的新方法:以T1代植物DNA为模板,根据转基因后代的Ct表型值鉴定其转基因整合状态,Ct值接近2...