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花烟草NaERF1基因的克隆及在非生物胁迫下的表达模式分析

作者：鲁琳; 赵希胜; 刘桂雲; 刘维东; 王艳婷; 吴玲莉; 任学良; 鲁黎明 刊期：2020年第01期

AP2/ERF类转录因子,是植物所特有的最大的一类转录因子家族,在植物的生长发育过程中,扮演着重要的角色。探究花烟草ERF转录因子的生理功能,为花烟草抵御逆境的分子机制研究提供借鉴。采用同源克隆的方法进行基因克隆。通过对花烟草进行非生物胁迫,运用qPCR的方法进行基因表达模式分析。从花烟草(Nicotiana alata)中克隆了一个属于ERF家族的基因N...

橡胶草SRPP2基因克隆及表达分析

作者：张睿珠; 江羽宸; 黄俊; 闫洁 刊期：2020年第01期

TkSRPP2是橡胶草SRPP基因家族的成员,在天然橡胶生物合成和橡胶粒子稳定方面起重要作用。采用PCR技术从橡胶草中克隆得到TkSRPP2基因全长序列,对其进行生物信息学分析、烟草亚细胞定位及定量表达分析。结果显示,TkSRPP2基因全长633 bp,编码210个氨基酸,蛋白质相对分子质量为23.15 kD,理论等电点(pI)8.51。系统进化分析表明TkSRPP2蛋白与莴苣SRPP...

稻瘟病菌分泌蛋白MoCDIE2诱导植物细胞死亡的功能分析

作者：吴航; 李智强; 刘文德 刊期：2020年第01期

由稻瘟病菌(Magnaporthe oryzae)引起的稻瘟病是全球最严重的植物真菌病害之一。稻瘟病菌通过分泌效应蛋白进入与植物相互作用界面或转运到植物细胞内,抑制寄主植物的免疫防卫反应,使病原菌成功侵染。通过农杆菌介导的异源表达策略,筛选到能引起非寄主植物烟草细胞死亡的候选效应蛋白MoCDIE2(Cell Death-Inducing Effector)。序列分析表明:MoCDI...

氨基酸定点突变提高灵芝蛋白LZ-8热稳定性的研究

作者：孙熙麟; 蒋振彦; 刘志屹; 戴璐; 孙非; 黄伟 刊期：2020年第01期

通过氨基酸定点突变技术提高灵芝免疫调节蛋白LZ-8的热稳定性。通过分子动力学模拟结合温度因子预测对LZ-8氨基酸突变位点进行理性设计,在毕赤酵母X33菌株内构建并表达LZ-8突变体蛋白,采用HeLa细胞生长抑制实验和差示量热扫描分析检测并比较了LZ-8突变前后生物学活性及热力学参数。结果显示,LZ-8 N-端α螺旋为理论预测的温度敏感区域,在该区域进...

橡胶树白粉菌(HO-73)启动子WY172不同长度片段的克隆及表达活性分析

作者：殷金瑶; 王义; 徐良向; 朱利; 王晨; 刘文波; 缪卫国 刊期：2020年第01期

旨在克隆橡胶树白粉菌启动子WY172及其上游2K序列上4个不同长度缺失片段,以分析启动子各片段的表达活性。基于实验室前期研究基础,以WY172上游2K序列作为研究对象进行渐变缺失突变,得到4个不同长度的可能具有启动子活性的片段,结合WY172,选用pBI121载体作为骨架,分别替换GUS基因前的CaMV35S启动子,并分别构建重组表达载体,通过ATMT法转化农杆菌;...

一株地黄根腐病病原菌的分离鉴定及生物学特性研究

作者：王亚利; 康春晓; 杨传臻; 魏艺璇; 王瑞飞; 李明军; 杨清香 刊期：2020年第01期

分离鉴定地黄根腐病的病原菌,对其致病性和生物学特性进行研究。利用平板分离法对地黄根腐病的病原菌进行分离纯化;利用测序技术和遗传进化分析对所得菌株进行鉴定;利用回接试验对所得菌株进行致病性检测;利用生长监测,确定所得菌株的各项生理学特性。获得一株菌落橙黄色,边缘整齐,表面光滑、湿润菌体椭圆形,有疑似出芽现象的真菌;该菌与帕鲁迪...

白腐真菌落叶松锈迷孔菌产漆酶液体培养基的优化及其对染料的脱色作用

作者：吴怡; 马鸿飞; 曹永佳; 司静; 崔宝凯 刊期：2020年第01期

以白腐真菌落叶松锈迷孔菌(Porodaedalea laricis)胞外漆酶为响应值,通过将Plackett-Burman设计、最陡爬坡设计和Box-Behnken设计相结合,获得了P.laricis产胞外漆酶的最适培养基为:去皮马铃薯365.61 g/L、蛋白胨5.0 g/L、葡萄糖20.0 g/L、KH2PO41.0 g/L、MgSO47H2O 0.5 g/L、MnSO4 H2O 0.15 g/L、CaCl22H2O 0.03 g/L、酒石酸铵6.68 g/L、琥珀酸...

一株异养硝化-好氧反硝化皱褶念珠菌(Diutinarugosa)的分离及脱氮特性

作者：杜全能; 朱文娟; 兰时乐 刊期：2020年第01期

为了获得异养硝化-好氧反硝化菌株,从养殖池塘污泥中分离筛选到一株具有异养硝化-好氧反硝化能力的酵母菌,命名为DW-1。经形态学观察和26S rDNA序列分析后鉴定为皱褶念珠菌DW-1(Diutina rugosa DW-1)。以氨氮为唯一氮源,初步探讨了碳源、C/N、初始pH值、培养温度、摇床转速对菌株DW-1除氮性能的影响。结果表明,在以乙酸钠为唯一碳源,C/N为25,pH...

丙氨酸转氨酶修饰对大肠杆菌L-色氨酸合成的影响

作者：孟帅帅; 黄钦耿; 吴松刚; 刘峰 刊期：2020年第01期

探究大肠杆菌细胞内负责L-丙氨酸合成的转氨酶对菌株代谢及L-色氨酸合成的影响。运用Red重组技术分别对编码L-丙氨酸转氨酶的基因alaA、alaC和avtA进行敲除。通过摇瓶和50 L罐中探究其对L-色氨酸积累、L-丙氨酸代谢及菌体生长变化情况。结果显示,除3种L-丙氨酸转氨酶全部缺失的工程菌L-丙氨酸合成受阻、菌体生长受到较强抑制外,其它各任意一种或...

菜豆环氧水解酶归一性水解间硝基环氧苯乙烷的研究

作者：李闯; 文正; 刘畅; 邬敏辰 刊期：2020年第01期

旨在研究菜豆环氧水解酶PvEH2对映归一性水解外消旋(rac-)间硝基环氧苯乙烷(mNSO)的特性,为制备光学纯(R)-间硝基苯乙二醇(mNPED)提供优良的生物催化剂。构建表达有重组PvEH2的工程菌E.coli/pveh2。以rac-mNSO为底物,借助手性色谱法分析E.coli/pveh2全细胞的EH活性和区域选择性。基于有机助溶剂种类和剂量对酶活性的影响,筛选并优化缓冲液/助溶...

磷脂酰肌醇特异性磷脂酶C的异源表达和应用

作者：林美璇; 周小满; 关锋; 崔文璟 刊期：2020年第01期

旨在研究大肠杆菌产磷脂酰肌醇特异性磷脂酶C(PI-PLC)的发酵表达和分离纯化,探究PI-PLC酶切GPI锚定蛋白的效果。依据NCBI数据库中蜡样芽孢杆菌的PI-PLC的基因序列,按照大肠杆菌的密码子偏好性进行密码子优化,合成相应基因序列并构建基因表达载体pGEX-6P-1-PI-PLC。将重组质粒转入受体菌E.coli BL21(DE3)中,通过加入异丙基硫代-β-D-半乳糖苷(IPTG...

Fsp27基因沉默载体的构建及其对细胞脂解的影响研究

作者：许祥; 董维鹏; 张少华; 冯晨毅; 刘田福; 燕炯 刊期：2020年第01期

适宜河北省旱寒区的冬油菜品种的筛选

作者：李爱国; 李积铭; 李和平; 刘桂华; 宋聪敏; 武军艳 刊期：2020年第01期

CRISPR-Cas核酸酶及其人工改造变体和单碱基编辑器在植物中的应用

作者：戚益平 刊期：2020年第01期

规律间隔成簇短回文重复序列(CRISPR)-CRISPR相关蛋白(Cas)和单碱基编辑器是植物基因编辑的基本工具。来自酿脓链球菌的Cas9(SpCas9)可以识别NGG前间区序列邻近基序(PAM),是一种广泛应用于活细胞基因组编辑的核酸酶。Cas12a核酸酶最近也在多种植物中实现了靶向识别富含T的PAM序列。

miRNA在植物病原调控方面的研究进展

作者：杨丽娟; 李世访; 卢美光 刊期：2020年第01期

miRNA是一类在真核生物体内普遍存在的,长度在22 nt左右的单链小RNA分子。大量研究发现,miRNA可广泛参与植物的生长发育、新陈代谢、物质运输、逆境响应及病原防御等多种生理生化过程。目前已经从植物中鉴定到大量的miRNA,但其中参与植物病原调控相关miRNA的研究较少。miRNA作为一种重要的转录调控因子,可参与调控病原相关分子模式触发的免疫反...