生物工程学报杂志 北大期刊 CSCD期刊 统计源期刊

植物萜类代谢工程

作者：韩军丽; 李振秋; 刘本叶; 王红; 李国凤; 叶和春 刊期：2007年第04期

植物萜类化合物不仅在植物生命活动中起重要作用，而且具有重要商业价值。随着近年来萜类代谢途径和调控机理研究的深入，代谢工程已成为提高萜类产量最有潜力的途径之一。对萜类代谢工程领域具代表性的研究结果进行了全面回顾，然后讨论了萜类代谢工程的研究方法和策略，其中重点探讨了功能基因组学方法在萜类代谢途径及调控机理研究方面的应用...

中国科学院微生物研究所期刊广告部成立

刊期：2007年第04期

琥珀酸发酵菌种研究进展

作者：王庆昭; 赵学明 刊期：2007年第04期

琥珀酸作为一种重要的化学中间体的潜力已经为人们所认识，而发酵法生产琥珀酸是使这一潜力变为经济上可行的最好方法之一。菌种在发酵法中占有非常重要的地位，是决定整个过程的关键。系统介绍了关于发酵法生产琥珀酸的菌种研究进展，并对各种菌株的发酵特点和问题做了分析，最后展望了菌种的发展方向。

抗人CD28单链抗体基因的构建及在BmN细胞和家蚕中的表达

作者：朱艳; 郑峰丰; 陈永井; 邱玉华; 朱江 刊期：2007年第04期

采用TP-PCR法，将抗人CD28单链抗体的重、轻链可变区基因和人工设计的昆虫杆状病毒多角体蛋白基因（曲）偏好的连接肽序列，拼接成抗人CD28单链抗体（抗CD28-ScFv）基因，并将其插入昆虫杆状病毒转移载体pBacPAK8的曲启动子，构建成重组转移载体pBacPAK8／CD28-ScFv。为便于表达产物的纯化，在CD28-ScFv的C端增加了6×His tag序列。通过脂质体介...

本期广告索引

刊期：2007年第04期

重组人TACE的解整合素域对人肺腺癌A549体外增殖、粘附和侵袭的抑制作用

作者：闫媛; 李小欧; 章杰; 黄巍; 李凌波; 杨渝珍 刊期：2007年第04期

为了解人TACE的解整合素域对肿瘤细胞粘附和侵袭的影响以及其独立于其他结构域发挥作用的能力，从单核细胞系THPI中提取RNA，RT-PCR扩增出TACE全长基因，构建了pMD18％TACE载体。对pMD18％TACE质粒进行PCR，分别扩增1300（300bp，编码解整合素域）、T800（800bp，编码酶催化域）及T1300（1300bp，编码胞外域）三个片段，将其分剐亚克隆至表达载...

PTD-hEGF融合蛋白在大肠杆菌中的表达及活性分析

作者：智庆文; 王淑豪; 张凤英; 李仕贵; 孙曼霁 刊期：2007年第04期

为获得hEGF在大肠杆菌中的高效表达，构建了pPTD—hEGF原核表达载体。将其转化大肠杆菌B121（DE3），经0．3mmol/LIPTG诱导，PTD—hEGF融合蛋白进行了有效表达，表达产物主要形成了包涵体。经Ni^2＋-NTA亲和层析纯化，融合蛋白的纯度达99．5％。MALDI—TOF—MS分析证明表达的融合蛋白氨基酸序列完全正确。PTD—hEGF融合蛋白能明显促进HEK-293细...

恶性疟原虫乳酸脱氢酶基因克隆、可溶性表达及突变体活性分析

作者：徐小玲; 杨瑞仪; 杨雪芹; 冯丽玲; 曾庆平 刊期：2007年第04期

为了建立以代谢酶类为靶点的新型抑制剂乃至抗疟药高通量筛选和体外评价平台，从恶性疟原虫海南株FCC1中扩增出乳酸脱氢酶基因（PJLDH）。利用融合表达载体pGEX．2TK和pET-29a（＋）将eft．on基因导入大肠杆菌BL21和BL21（DE3）中高效表达，结果成功地在菌体裂解上清液中检测到高酶促活性的PiLDH。以pGEX．2TK为载体的PfLDH基因主要以包涵体形式...

Red体内同源重组介导的egfp、kan基因融合和重组质粒构建

作者：吴洋; 李山虎; 施庆国; 刘党生; 周建光 刊期：2007年第04期

重组工程是近年来建立的一种基于高效率体内同源重组的新型遗传工程技术，可应用于靶DNA序列的敲入、敲除和基因克隆等。在应用重组工程技术进行基因亚克隆时发现，体外重叠PCR法难以获得高质量的目的DNA打靶片段，严重影响重组效率。为了解决上述问题，根据Red重组酶介导的体内同源重组工作原理进行了技术改进。先用PCR方法合成egfp和kan两条末...

人67kD层粘连蛋白受体在毕赤酵母中的表达及活性分析

作者：连继勤; 戴旭芳; 甘立霞; 何凤田 刊期：2007年第04期

为实现人67kD层粘连蛋白受体（Human 67kD Laminin Receptor，67LR）蛋白的分泌表达，采用DNA重组技术将67LRcDN段插入分泌型酵母表达载体pPIC9K中，构建了相应的重组表达质粒pPIC9K-67LR并在GS115毕赤酵母菌株中表达，每升培养基经亲和层析可纯化目的蛋白12．56mg。纯化的目标蛋白能够与肺癌A549细胞竞争性结合其配体分子LN-1，具有相应的生物...

玉米细菌性条斑病非寄主抗性基因Rxo1转化水稻的研究

作者：谢学文; 于晶; 徐建龙; 周永力; 黎志康 刊期：2007年第04期

水稻细菌性条斑病是我国重要的水稻病害之一，但是在水稻种质资源中尚未发现抗细菌性条斑病单个主效基因。利用农杆菌介导的转化系统将从玉米中克隆的细菌性条斑病非寄主抗性基因Rxo1转入我国2个杂交稻恢复系和2个常规水稻品种。转基因植株的PCR和Southem分析结果表明Rxo1基因已整合到受体基因组中，Rxo1基因单拷贝整合的转化体在自交T1代呈现抗...

螺旋霉素3-O-酰基转移酶基因的删除和主要产生螺旋霉素组分Ⅰ菌株的获得

作者：武临专; 马春燕; 王以光; 戴剑漉; 李京艳; 夏焕章 刊期：2007年第04期

螺旋霉素（SP）为16元环大环内酯类抗生素，含有螺旋霉素Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ个组分，其结构的差异为16元内酯环的C、上分别连接羟基（SPⅠ）、乙酰基（SPⅡ）和丙酰基（SPⅢ）；SPⅡ和SPⅢ是在相同的3-O-酰基转移酶催化下SPⅠ进一步酰化的产物。SPI、SPⅡ和SPⅢ在生物学活性方面无大差异。为简化螺旋霉素组分，便于今后对其结构进行进一步改造，根据碳霉...

征稿简则

刊期：2007年第04期

一个新的产黄青霉谷胱甘肽转移酶基因的克隆和鉴定

作者：张媛; 王富强; 郑桂珍; 戴梦; 刘静; 赵颖; 任志红; 赵宝华; 贾茜 刊期：2007年第04期

以产黄青霉（Penicillium chrysogenum Thom）cDNA为模板，克隆得到一个新的谷胱甘肽转移酶基因PcgstB，其开放阅读框长651bp，编码216个氨基酸的蛋白质。与已知序列进行BLASTp比较显示，该蛋白具有保守的GST结构域，与烟曲霉GstB的序列一致性最高，达65％。将PcgstB与原核表达载体pTrc99A连接得到表达质粒pTrc-gstB，转化大肠杆菌DH5α，经IPTG...

酿酒酵母ATP-硫酸化酶在大肠杆菌中的表达纯化及其在焦测序中的应用

作者：罗娟; 吴文娟; 邹秉杰; 周国华 刊期：2007年第04期

ATP-硫酸化酶（ATPS，EC2．7．7．4）是一种可逆催化ATP和SO4^2-反应生成腺嘌呤-5’-磷酸硫酸（APS）和焦磷酸盐（PPi）的酶，已经用于焦测序反应。以酿酒酵母（Saccharomyces cerevisias，CICC 1202）基因组DNA为模板，用PCR扩增得到ATPS基因，并克隆到原核表达质粒pET28a（＋），得到重组表达质粒pET28a（＋）-ATPS，在IPTG诱导下，携带pET28a...