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融合标签技术及其应用

作者：李永进; 陈媛媛; 毕利军 刊期：2006年第04期

融合标签最初是作为一种有效的工具用于纯化重组蛋白质,近几年的研究表明,融合标签的作用并不局限于此.本文综述了融合标签技术的发展及在生命科学研究中的各种应用,包括重组蛋白质的纯化;目的蛋白质的检测、定向固定;体内生物事件的可视化;提高重组蛋白质的产量;增强重组蛋白质的可溶性及稳定性.

增加植酸酶基因appA-m的拷贝提高其在巴斯德毕赤酵母的表达量

作者：罗会颖; 黄火清; 柏映国; 王亚茹; 杨培龙; 孟昆; 袁铁铮; 姚斌 刊期：2006年第04期

为了进一步提高植酸酶的发酵效价,降低植酸酶生产成本,对毕赤酵母表达载体pGAPZα-A进行了改造.将表达载体pPIC9的AOX1启动子序列引入pGAPZα-A,使之成为甲醇可诱导型表达载体pAOXZα,插入植酸酶基因appA-m后得到重组载体pAOXZα-appA-m.以染色体上带有一个拷贝的appA-m基因、发酵效价可达到7.5×106IU/mL发酵液的重组酵母菌株74#为受体菌进行转化,在...

沃特斯公司（Waters Corporation）联手中国三大科研机构推动中国食品安全研究发展

刊期：2006年第04期

沃特斯公司（Waters Corporation）2006年6月21日在北京宣布，该公司与中国疾病预防控制中心（China CDC）营养与食品安全所，北京市疾病预防控制中心（BJCDC），以及中国科学院生态环境研究中心（RCEES）签署合作协议，将为这些机构在食品安全分析和遵循国际法规方面提供专业技术支持。

hprK基因敲除及对其枯草芽孢杆菌核黄素发酵的影响

作者：张帆; 宋辉; 班睿 刊期：2006年第04期

枯草芽孢杆菌在葡萄糖丰富的环境中,胞内糖分解代谢物浓度的提高将引起碳分解代谢物阻遏效应（CCR）及糖吸收的抑制,对核黄素等发酵过程产生不利影响.通过缺陷细胞的分解代谢物控制蛋白A（CcpA）可以解除CCR效应,但不能解除糖吸收的抑制.磷酸烯醇式丙酮酸-糖磷酸转移酶系统（PTS）是枯草芽孢杆菌主要的糖吸收方式,HPr蛋白和双功能的HPr激酶/HPr-...

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刊期：2006年第04期

SCT-OGP的融合表达与活性的初步研究

作者：刘煜; 杨小莉; 何湘; 彭英方; 李平; 张艳红; 马清钧; 钟辉 刊期：2006年第04期

根据天然鲑鱼降钙素（Salmon calcitonin,SCT）和骨生长肽（Osteogenic Growth Peptide,OGP）的序列,人工合成了6个DN段,进行退火、连接和转化后,获得含有SCT与OGP融合基因的pPIC9-SCT-OGP表达载体,经测序后将此重组质粒电击转化毕赤酵母GS115,通过培养、筛选以及SDS-PAGE鉴定,在毕赤酵母中获得了SCT-OGP融合蛋白的可溶性表达,经分子筛纯化后在5...

征稿简则

刊期：2006年第04期

来源于Pyrococcus furiosus的耐高温α-淀粉酶基因在衣藻叶绿体中的表达

作者：杨宗岐; 李轶女; 张志芳; 王勇; 沈桂芳 刊期：2006年第04期

来源于Pyrococcus furiosus的耐高温α-淀粉酶是一种重要的酒精工业用酶,在植物中表达耐高温α-淀粉酶可以大大降低用植物秸秆生产酒精的成本.选择衣藻叶绿体基因组同源片段clpP-trnL-petB-chlL-rpl23-rpl2和壮观霉素抗性基因,构建了来源于Pyrococcus furiosus的耐高温α-淀粉酶基因的衣藻叶绿体表达载体p64A.通过基因枪将其导入衣藻叶绿体中,经壮...

转基因植物高效删除标记基因的实用型双元转化载体

作者：李霞; 翁海波; 韩绍印; 席宇; 雍克兰 刊期：2006年第04期

利用雌激素诱导的Cre/loxP DNA重组系统,构建用于转基因植物删除标记基因的实用新型载体,将所有非目的基因放于两同向loxP位点间,多克隆位点位于两loxP位点外,可插入目的基因,载体设计非常实用.在插入目的基因GUS后转化烟草,雌激素诱导,分析诱导前后DNA的重组情况、不同时间基因转录水平,以及目的基因在诱导前后的表达.结果显示,诱导后染色体DNA...

串联表达PRRSV M与GP5蛋白重组腺病毒的构建及其免疫特性研究

作者：蒋文明; 姜平; 李玉峰; 汤景元; 王先炜; 杜以军 刊期：2006年第04期

利用PCR扩增出猪繁殖与呼吸综合征病毒的M基因,按正确的读码框与GP5基因串联,成功构建穿梭载体pShuttle-CMV-M-GP5,经PCR、测序鉴定正确.Pme Ⅰ线性化后在BJ5183大肠杆菌内与腺病毒骨架载体pAdEasy-1同源重组,产生重组腺病毒DNA.重组腺病毒DNA经Pac Ⅰ线性化后用脂质体转染HEK-293A细胞,在细胞内包装成完整的腺病毒,通过IFA可以检测到M与GP5串联...

科学出版社生命科学编辑部新书推介

刊期：2006年第04期

奥利亚罗非鱼促性腺激素释放激素cDNA的原核表达及其免疫原性研究

作者：丁炜东; 曹丽萍; 吴婷婷 刊期：2006年第04期

促性腺激素释放激素（gonadotropin-releasing hormone,GnRH）是下丘脑分泌产生的神经激素,对脊椎动物生殖的调控起重要作用.为研究GnRH对奥利亚罗非鱼性腺发育的作用,构建了GnRH cDNA的原核表达载体并进行融合表达.利用RT-PCR方法从丘脑中扩增出长约400bp的目的序列GnRH基因,克隆至T载体中,经酶切鉴定和序列测定分析确认序列的正确性后将此片段...

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刊期：2006年第04期

携多拷贝glaA的重组黑曲霉过量合成糖化酶的研究

作者：姚婷婷; 王衍敏; 顾建龙; 王正祥 刊期：2006年第04期

以工业生产菌株黑曲霉CICIM F0410基因组DNA为模板,扩增出糖化酶glaA基因,测序并进行表达研究.GlaA基因的核苷酸序列长为2167 bp,包含4个内含子.氨基酸序列比对表明此黑曲霉糖化酶与其他曲霉属来源的糖化酶有很高的同源性.将glaA基因克隆到pBC-Hygro载体中,构建重组质粒pBC-Hygro-glaA并转化A.niger F0410.携多拷贝glaA的转化子用150μg/mL潮霉素...

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刊期：2006年第04期