生物工程学报杂志 北大期刊 CSCD期刊 统计源期刊

东亚钳蝎毒素BmαTX14的基因组克隆、真核表达纯化及功能的初步研究

作者：吕猛; 王昆; 曹志贱; 蒋达和; 毛歆; 李文鑫 刊期：2005年第06期

以东亚钳蝎(Buthus martensii Karsch,BmK)BmαTX14全长cDNA序列设计引物,克隆BmαTX14成熟肽,插入毕赤酵母表达载体pPIC9K中,转化酵母,诱导表达.Tricine-SDS-PAGE和Western blot分析显示,表达产物以可溶性分子形式存在于培养上清中,诱导84h时的表达量达到高峰,约为120mg/L.通过Ni金属螯合层析柱亲和层析、聚乙二醇沉淀、凝胶分子筛层析获得纯化的...

表达猪繁殖与呼吸综合征病毒修饰型GP5m蛋白的重组伪狂犬病毒的构建及其在小鼠的免疫反应

作者：江云波; 方六荣; 肖少波; 张辉; 陈焕春 刊期：2005年第06期

猪伪狂犬病毒(PRV)是一种良好的兽用活病毒疫苗载体.但以PRV基因缺失疫苗株TK-/gE-/LacZ+为载体表达PRRSV GP5的重组病毒TK-/gE-/GP5+免疫实验动物后难以激发抗PRRSV的中和抗体.为了进一步增强这种重组病毒的免疫效力,用具有更好免疫原性的修饰的ORF5基因(ORF5m)代替天然ORF5基因,构建了表达PRRSV的修饰型GP5m蛋白的重组伪狂犬病毒TK-/gE-/GP5m+...

征稿简则

刊期：2005年第06期

猪霍乱沙门菌载体介导猪瘟病毒DNA免疫研究

作者：乔红伟; 孙金福; 韩文瑜; 李作生; 余兴龙; 涂长春 刊期：2005年第06期

构建了猪瘟病毒(CSFV)主要保护性抗原E2基因的真核表达质粒pVAXE2.将其电转化猪霍乱沙门氏菌C500疫苗株,得到了携带pVAXE2质粒的猪霍乱沙门氏菌工程菌株S.C500/pVAXE2,对该菌株的特征、培养特性和生化特性进行了鉴定.分别用1×108CFU、2×109CFU S.C500/pVAXE2经口服或肌肉注射免疫小鼠和家兔,间接ELISA检测免疫动物的特异性抗体,在第三次免疫后2...

科学出版社生命科学编辑部新书推介

刊期：2005年第06期

少根根霉Δ^6-脂肪酸脱氢酶基因在毕赤酵母中的表达

作者：张琦; 李明春; 孙颖; 陈有为; 张飚; 邢来君 刊期：2005年第06期

△6-脂肪酸脱氢酶是一种膜整合蛋白,也是多不饱和脂肪酸合成途径中的限速酶.在前期工作中,通过RT-PCR和RACE技术,从少根根霉NK300037中克隆到一个潜在编码△6-脂肪酸脱氢酶的序列,序列和功能分析结果表明该序列具有一个长度为1377bp、编码由458个氨基酸组成、大小为52kD的新的△6-脂肪酸脱氢酶基因.把少根根霉△6-脂肪酸脱氢酶基因(RAD6)亚克隆...

里氏木霉内切-β-甘露聚糖酶基因在毕赤酵母中的表达

作者：韦跃华; 毛爱军; 何永志; 乔宇; 董志扬 刊期：2005年第06期

采用PCR方法从里氏木霉(Trichoderma reesei)基因组中获得含有两个内含子的内切-β-甘露聚糖酶全长基因,末端重叠延伸PCR去除内含子后,将其插入到巴斯德毕赤酵母(Picher pastoris)表达载体pPIC9K中,位于α-因子信号肽序列的下游,并与之同框,获得重组质粒pM242.重组质粒线性化后用电击法转化毕赤酵母菌株GS115.经大量筛选,获得高效分泌表达内切甘露...

同源重组法构建多功能农药降解基因工程菌研究

作者：蒋建东; 顾立锋; 孙纪全; 代先祝; 文阳; 李顺鹏 刊期：2005年第06期

构建遗传稳定的多功能农药降解基因工程菌可以为农药污染的生物修复提供良好的菌种资源,然而,构建遗传稳定且不带入外源抗性的基因工程菌是一个难点.通过以受体菌的16S rDNA为同源重组指导序列、sacB基因为双交换正筛选标记构建同源重组载体,二亲结合的方法将甲基对硫磷水解酶基因(mpd)整合到呋喃丹降解菌Sphingomonas sp.CDS-1染色体的16S rDNA...

嗜热毛壳菌纤维素酶（CBHⅡ）cDNA的克隆及在毕赤酵母中的表达

作者：刘守安; 李多川; 俄世瑾; 张燕 刊期：2005年第06期

嗜热毛壳菌Chaetomium thermophilum CT2是一种土壤腐生菌,可产生具有重要工业生产价值的纤维素酶类.RACE-PCR获得嗜热毛壳菌纤维二糖水解酶Ⅱ(CBHⅡ)的编码基因(cbh2).DNA序列分析表明cbh2的开放阅读框由1428个碱基组成,编码476个氨基酸.推断的氨基酸序列包含一个典型真菌纤维素酶的糖结合域(CBD)、催化域(CD)以及二者之间富含脯氨酸和羟基氨基...

抗松材线虫纤维素酶单链抗体库的构建及筛选

作者：田旺; 张奇; 杨文博; 白钢 刊期：2005年第06期

构建鼠源性松材线虫纤维素酶(Bursaphelenchus xylophilus cellulase,BXC)的噬菌体单链抗体库,从中筛选特异性BXC的单链抗体.以BXC为抗原免疫BALB/C小鼠,从脾脏提取总RNA,用RT-PCR技术扩增小鼠抗体重链(VH)和轻链(VL)可变区基因.经重叠PCR(SOE PCR)在体外将VH和VL连接成单链抗体(scFv)基因,并克隆到噬菌粒载体pCANTAB5E中,电转化至大肠杆菌TG1,...

积极开发研究人乳铁蛋白（1actoferrin，Lf）

作者：柯为 刊期：2005年第06期

在非洲，人们发现，约有85％的患有艾滋病的孕妇，在分娩后并没有将病毒传给婴儿，逃脱了最容易患病的母婴传播渠道。这是为什么呢？为什么有的人不易受艾滋病病毒（HIV）的感染呢？

银新杨中与DRE元件结合的转录因子的克隆及鉴定分析

作者：秦红霞; 贾志平; 张海超; 刘敬梅; 宋玉霞 刊期：2005年第06期

DREB类转录因子特异地与DRE元件结合,在植物感受非生物逆境(干旱、高盐和低温)胁迫时,激活一系列逆境应答基因的表达.我们选用银新杨(Populus alba×P.alba var.pyramidalis)为材料,通过PCR和同源EST搜索的方法克隆得到了一个类DREB的基因,命名为PaDREB2.酵母单杂交实验表明,该基因编码的蛋白能特异地与DRE元件结合并激活下游报告基因的表达.用RT...

《生物工程学报》加入“万方数据——数字化期刊群”的声明

刊期：2005年第06期

N-糖酰胺酶F在大肠杆菌中的高效表达及其脱糖基化作用研究

作者：苏移山; 王圣钧; 王鹏; 祁庆生 刊期：2005年第06期

从脑膜炎脓杆菌(Flavobacterium meningosepticum)基因组中通过PCR扩增了N-糖酰胺酶F(PNGase F)基因,经酶切后与表达载体pET28a连接,获得的重组质粒转入大肠杆菌BL21(DE3).重组大肠杆菌经诱导表达和纯化提取后,获取大量高纯度N-糖酰胺酶F,其纯度达90%以上.试验证明,经纯化的重组N-糖酰胺酶F可以切除核糖核酸酶B、转铁蛋白和人IgG等糖蛋白上的N-...

细菌探测技术研究进展

作者：柯为 刊期：2005年第06期

如何快捷地知晓某环境或某载体带有病菌呢?细菌探测器或细菌检测技术的研发有重要价值,特别是那些快速灵敏的"细菌探测器"或技术尤为重要.