杂志简介：《生物工程学报》杂志经新闻出版总署批准，自1985年创刊，国内刊号为11-1998/Q，是一本综合性较强的生物期刊。该刊是一份月刊，致力于发表生物领域的高质量原创研究成果、综述及快报。主要栏目：序言、中欧合作项目介绍、综述、研究报告
杂志简介：《生物工程学报》杂志经新闻出版总署批准，自1985年创刊，国内刊号为11-1998/Q，是一本综合性较强的生物期刊。该刊是一份月刊，致力于发表生物领域的高质量原创研究成果、综述及快报。主要栏目：序言、中欧合作项目介绍、综述、研究报告
作者：靳彦文; 李平; 胥全彬; 刘萱; 黄维; 王云龙; 曹诚; 马清钧 刊期：2005年第05期
观察超抗原SEA(D227A)的真核表达载体(pmSEA),对HBV DNA疫苗诱导Balb/c小鼠(H-2d)免疫应答的调节作用.肌内注射空载体pcDNA3、HBV DNA疫苗加pmSEA佐剂(pHBVS2S+pmSEA)或不加佐剂(pHBVS2S);ELISA法测定血清抗HBs;ELISPOT检测分泌IFN-γ的脾淋巴细胞;4 h51Cr释放法检测小鼠脾细胞CTL活性.HBV DNA佐剂组免疫小鼠抗HBsAg抗体滴度明显高于不加佐剂组,...
作者：陈森; 饶青; 王建祥; 王敏 刊期：2005年第05期
采用RT-PCR方法从分泌抗人类白细胞表面分化抗原CD19单克隆抗体的杂交瘤细胞中克隆出VH和VL可变区基因,再通过重叠延伸拼接(splice-ovedap extension)PCR方法在VH和VL可变区基因之间引入连接肽(Gly4Ser)3,体外构建抗人CD19单链抗体(抗CD19-ScFv)基因.将其克隆至表达载体PET28a并在大肠杆菌中表达.SDS-PAGE和Westem-blot分析结果表明,抗CD19-ScFv...
刊期：2005年第05期
沙漠化的危害是人所共知的,沙尘暴的威力更是让越来琥多的人领教了.人类是沙漠的导致者,也是沙漠的受害者.
作者：段金柱; 齐财; 韩伟; 王战会; 靳刚; 阎锡蕴 刊期：2005年第05期
从SARS免疫抗体库获得的一株抗SARS-CoV人源单链抗体H12,亟待鉴定.为了快速制备大量具有生物活性的单链抗体H12,构建了pET28a-H12原核高表达载体,表达量占菌体总蛋白质30%以上.采用稀释复性和分子筛柱复性两种方法对包涵体蛋白进行复性与纯化,结果显示两种方法都能使得单链抗体复性.与稀释复性法相比,柱复性效果更好,其抗原结合活性是稀释复性法...
作者：魏玲; 刘萱; 易艳萍; 李楚芳; 王云龙; 曹诚 刊期：2005年第05期
c-Abl是非受体酪氨酸激酶,它在细胞内被一些基因毒性的、氧化的及其它形式的压力所激活.目前研究证明:应用标记的c-Abl发现其在细胞内可以相互形成同源二聚体,并且一分子c-Abl的N末端区域与相应的另一分子的C末端相互作用形成二聚体.实验进一步表明:c-Abl SH3结构域结合到另一c-Abl分子富含脯氨酸的C-末端约958-982氨基酸区域.如果去除c-Abl富含...
作者：姜文国; 熊冬生; 邵晓枫; 王金宏; 许元富; 刘芳; 郭红星; 朱祯平; 杨纯正 刊期：2005年第05期
用RT-PCR方法从人单核THP-1细胞系克隆人4-1BBL胞外区基因,将其重组到pAYZ表达载体中,构建成人4-1BBL胞外区基因表达载体.将该载体转化大肠杆菌16C9,获得稳定表达,表达产物主要以可溶性状态存在;SDS-PAGE和Western blot分析显示,其分子量约为22kD,与预期结果一致.这是首次在大肠杆菌中获得4-1BBL胞外区可溶性表达.生物学活性检测显示4-1BBL对于...
作者：韩雪; 叶林柏; 李宝宗; 佘应龙; 叶力; 郑竑; 高博; 郜金荣; 吴正辉 刊期：2005年第05期
巴斯德-毕赤酵母工程菌株GS115-PreS经发酵在甲醇诱导下可高效表达分泌型全长PreS蛋白.Western blot证明发酵液中存在着可溶性的分子量为48kD的PreS蛋白和蛋白质颗粒,蛋白质颗粒主要成分为48kD的全长Pres蛋白和28kD的S蛋白,电镜观察发现蛋白质颗粒直径为30nm.发酵液经过脱盐、浓缩处理后,上清液经DEAE-SFF阴离子交换柱得到纯化的PreS蛋白;超速离...
作者：余云舟; 孙志伟; 俞炜源 刊期：2005年第05期
以semliki森林病毒衍生的复制子载体pSFV1和辅助载体pSFV-helper2为骨架,用CMV IE和T7启动子替换SP6启动子并在3′UTR下游插入BGH转录终止子,构建了基于DNA和RNA的复制子表达载体pSMCTA和辅助载体pSHCTA..在DNA和RNA二种递送方式上证实该表达载体可高水平表达外源基因,与辅助载体共转染可制备具有感染能力并能表达外源基因的重组病毒颗粒.构建的...
作者：叶震敏; 朱晔涵; 盛伟华; 缪竞诚; 危少华; 吴康; 杨吉成 刊期：2005年第05期
将人白细胞介素24(hIL-24)的cDNA序列克隆至原核高效表达载体pET-21a(+)上,经IPTG诱导后,在大肠杆菌中获高效表达,经纯化、复性后的rhIL-24蛋白具有抑制HeLa细胞生长,诱导HeLa细胞凋亡,刺激外周血单核细胞分泌IL-6、TNF-α、IFN-r,抑制血管形成的功能.初探了rhIL-24蛋白能通过下调抗凋亡因子bcl-2表达,激活线粒体凋亡途径引起肿瘤细胞凋亡的机理.
作者：赵武; 肖少波; 方六荣; 江云波; 宋云峰; 严琳; 余晓岚; 陈焕春 刊期：2005年第05期
为了提高表达GP5的猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)DNA疫苗的免疫效应,将具有蛋白转导功能的牛疱疹病毒1型(BHV-1)VP22基因插入到经过修饰具有更好免疫原性的PRRSV修饰型ORF5基因(ORF5M)上游,构建VP22和ORF5M融合表达的真核表达质粒pCI-VP22-ORF5M.经间接免疫荧光试验(IFA)和Western-blot检测证实体外表达后,免疫BALB/c小鼠,检测小鼠免疫后的GP5...
作者：黄志清; 胡宏宇; 陈小玲; 任立明; 林爱星; 陈永福 刊期：2005年第05期
将去除信号肽的猪干扰素-γ(PoIFN-γ)基因置于酿酒酵母α因子分泌信号的DNA序列后,构建成pPIC9K-α-PoIFN-γ分泌型重组表达载体,电转化导入毕赤酵母GS15中,经G418筛选后获得2株多拷贝插入的重组子.SDS-PAGE和Westem blot分析结果表明,所获得的重组子能够分泌表达出17kD和23kD左右的PoIFN-γ特异蛋白,其表达量为108mg/L,占培养液总蛋白的60%.实验首次...
作者：王际睿; 颜泽洪; 魏育明; 郑有良 刊期：2005年第05期
对17份小麦和山羊草材料的小麦抗虫24kDα-淀粉酶抑制因子成熟蛋白编码基因进行了分离克隆和序列分析.结果发现,在二倍体材料中α-淀粉酶抑制因子由单个基因编码,而在普通小麦中是以多拷贝的形式存在.从中得到17个24kDα-淀粉酶抑制因子基因,其中2个来自普通小麦与1个来自粗山羊草的基因编码的抑制因子与WDAI 0.19的氨基酸序列完全相同,为同一蛋白....
作者：张晓梅; 唐雪明; 诸葛斌; 沈微; 饶志明; 方慧英; 诸葛健 刊期：2005年第05期
利用PCR技术从大肠杆菌(Escherichia coli)中扩增出1.16kb的编码1,3-丙二醇氧化还原酶同工酶的基因yqhD,将其连接到表达载体pEtac,得到重组载体pEtac-yqhD,重组载体在大肠杆菌JM109中得到高效表达.SDS-PAGE分析显示融合表达产物的分子量均为43 kD,同核酸序列测定所推导的值相符.对含有yqhD的基因工程菌进行表达研究表明:37℃,以1.0mmol/L IPTG诱...
作者：李冰; 熊宇泉; 涂洪斌; 刘启才; 邹东霆; 周问渠; 陈耀勇 刊期：2005年第05期
Ⅰ型内含子核酶经过设计特定的信号引导序列(IGS),可特异性地定点剪接目的基因RNA,从而在RNA水平达到修复病变基因的目的.以四膜虫材料,克隆了其26S rRNA内含子核酶基因,体外转录证实该Ⅰ型内含子核酶具有完全的自我剪接的功能.为检测该核酶的反式剪接功能,构建了缺失后半段564bp基因序列的绿色荧光蛋白(GFP)的截短突变体重组质粒XYQ5/XYQ10-pEG...
作者：于荣敏; 金钱星; 孙辉; 叶文才; 赵昱 刊期：2005年第05期
对西洋参冠瘿组织悬浮培养生长特征进行了考察,并对其悬浮培养物中的人参皂苷类成分进行了提取、分离和鉴定.研究得到了培养物最大生物量收获时间[18.62 g/L(dry weight)]及其中最高人参皂苷累积时间(620.4 mg/L on the 27th day).培养基中碳源、磷、氨基氮、硝基氮的利用率分别为91.8%,100%,81%和97%.利用现代分离纯化方法从培养物中分离得到了...
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