作者:王剑青; 娄方方; 汪冶; 王国川; 沙启明; 张亚莉 期刊:《转化医学电子》 2014年第06期
目的:探讨去甲斑蝥素(NCTD)及其五种衍生物抗白血病细胞K562的作用.方法:常规方法复苏、传代培养人慢性粒细胞性白血病K562细胞,待细胞进入对数生长期后用于实验.空白对照组行常规培养,药物处理包括去甲斑蝥素(NCTD)处理组和NCTD衍生物(QJ-2、QJ-3、QJ-13、BH052及BH091)处理组,分别设置各组药物终浓度0.001 mmol/L、0.005 mmol/L、0.05 mmol/L、0.1 mmol/L、0.5 mmol/L、1 mmol/L、5 mmol/L、10 mmol/L...
作者:冯君; 于洪儒; 王洪新 期刊:《锦州医科大学学报》 2006年第03期
目的 评价小牛血去蛋白提取物(DECB)取代小牛血清培养K562的生长情况,从而分析DECB对白血病细胞生长方面的意义及其可能的作用机制.方法应用形态学、MTT分析法、流式细胞术对在低血清以及无血清条件下的白血病细胞进行检测和观察.结果人白血病K562细胞在DECB取代小牛血清的培养基中,细胞发生一系列形态学改变,DECB在一定范围内(0.2%~1%)对K562的增殖率有剂量和时间的依赖关系.结论DECB在一定范围内能够代替小牛血清在细胞培养...
作者:杜芬; 黄剑雄; 黄睿; 周茵; 熊远珍 期刊:《中国现代应用药学》 2019年第15期
目的合成并评价磷酰胺类化合物体外对白血病细胞株 K562 生物活性的抑制作用。方法以芳氨基为药效基团,羟脯氨酸为载体设计目标物,通过几步亲核取代反应合成一系列新化合物,并表征其结构。MTT 法测定它们对人慢性髓性白血病细胞株 K562 细胞的抑制作用。结果发现了 10 个新化合物有一定的生物活性。结论发现了一类新的具有一定抗肿瘤活性的磷酰胺类先导化合物。
作者:王红兵; 王绪; 刘永彪; 郝兴芝 期刊:《徐州医科大学学报》 2006年第02期
目的研究白细胞介素6(IL-6)对照射小鼠脾淋巴细胞亚群自然杀伤活性的影响。方法BALB/C小鼠分为照射组、对照组和照射+IL-6组,采用Panning法从小鼠脾淋巴细胞中分离L3T4、Lyt2和B细胞,用^3H-TdR释放实验检测脾淋巴细胞亚群自然杀伤活性。结果照射+IL-6组与对照组比较,^3H-TdR释放量有显著性差异(P〈0.01)。结论IL-6具有促进照射小鼠脾淋巴细胞亚群活性作用。
细胞周期的循环过程是由许多基因共同协作而成的,这是一个细胞物质积累与细胞分裂的循环过程。癌变的细胞以及特定阶段的胚胎细胞常常有异常的分裂周期。外源性基因,例如p16、p21、p53、Cyclins等,使白血病K562细胞周期停滞在G1期;CDKS因子会使细胞阻滞在G2/M期;UP介导通路可能使白血病细胞细胞阻滞在G2/M期,也可能在G1期发生阻滞。不同的影响因子会使白血病细胞周期阻滞在不同时期,能为治疗白血病提供更广阔的研究前景。多路径与...
作者:范瑞华; 李惠民; 李晓进; 喻镁佳; 金从国 期刊:《中华血液学》 2010年第06期
近年来对干细胞和肿瘤研究的深入,已表明干细胞自我更新和肿瘤的生成有惊人的相似之处,而且肿瘤中某些数量极少的细胞具有干细胞特性,提出了肿瘤干细胞学说,认为肿瘤干细胞是肿瘤的转移、复发和耐药的根源.
作者:郁心; 张海峰; 王金志; 谢宇锋; 杨吉成; 缪竞诚 期刊:《中华血液学》 2007年第06期
目的 研究生长抑制因子4(ING4)基因表达对K562细胞增殖的影响。方法 将经过定点突变技术人源化改造的ING4(鼠→人)生长抑制因子4基因酶切并连接到pAdTrack-CMV转移质粒上,然后与腺病毒质粒pAdEasy-1共转化BJ5183细菌,获得重组腺病毒质粒pAdEasy-1-pAdTrack—CMV—hING4,将它转染QBI-293A细胞后收获重组腺病毒Ad—hING4(以下简称为Ad-ING4)。将Ad-ING4感染K562细胞,光学显微镜下观察病毒感染前后细胞形态的变化,免疫细胞...
作者:邓琦; 白雪; 肖霞; 江雁; 李玉明 期刊:《中华血液学》 2011年第01期
目的 研究细胞因子诱导的杀伤细胞(CIK)体外逆转阿霉素(ADR)耐药细胞株K562/ADR细胞多药耐药(MDR)的作用,并探讨其机制.方法 健康人外周血单个核细胞经细胞因子体外诱导获得CIK,检测其表型和培养上清液细胞因子含量.实验组为CIK作用于K562/ADR细胞48 h后加入ADR;对照1组为CIK作用于K562/ADR细胞48 h,对照2组为ADR作用K562/ADR细胞48 h.采用MTT法检测各组细胞杀伤活性,用流式细胞术检测细胞膜P-糖蛋白(P-gp)含量、细胞内ADR...
作者:康睿; 曹励之; 俞燕; 胡婷; 王卓; 许望琼; 谢岷 期刊:《中华血液学》 2007年第06期
目的 探讨WASP家族Verprolin同源蛋白1(WAVE1)基因在K562/A02白血病细胞多药耐药机制中的作用。方法 将pEFBOS—WAVE1真核表达质粒转染K562细胞构建WAVE1高表达的K562细胞,将WAVE1基因的特异性小片段干扰RNA(WAVE1siRNA)转染K562/A02细胞构建WAVE1低表达的K562/A02细胞。Western blot和RT-PCR法检测基因转染前后K562/A02细胞及K562细胞WAVE1基因及蛋白的表达;可溶性噻唑盐WST-8染色法检测阿霉素对转染前后细胞的半数抑制...
作者:顾静文; 张弢; 陈波斌; 吕元; 林果为 期刊:《中华血液学》 2005年第12期
目的研究短发夹状小分子干扰RNA(short hairpin RNA,shRNA)对白血病多药耐药细胞株K562/A02 mdr1和谷胱甘肽S-转移酶(GST)π基因的表达和功能的影响.方法根据mdr1mRNA第79~99位和GSTπ mRNA第308~327位核苷酸为作用靶点,合成针对靶区域序列的shRNA,克隆入pSilencer2.1-U6 neo,克隆产物为pSilence-mdrl和pSilence-GSTπ,转染K562/A02细胞株.用实时荧光定量PCR检测K562/A02细胞mdr1和GSTπ mRNA的表达;MTT法检测阿霉素对K562/A02细胞半...
作者:张敏; 陈智超; 刘芳; 游泳; 刘仲萍; 邹萍 期刊:《中华血液学》 2005年第12期
目的观察缄默PLK1基因的短发夹状RNA(short hairpin RNA,shRNA)对K562细胞内PLK1表达和细胞凋亡的影响,探讨PLK1在白血病发病中的作用,寻找更为有效的白血病治疗途径.方法设计合成针对PLK1基因1416~1436位点的shRN段,并将其克隆于绿色荧光蛋白的表达载体pEGFP-H1中,命名为pEGFP-H1/PLK1.通过电穿孔转染法将其导入K562细胞中,分为对照组、pEGFP-H1空载体转染组和pEGFP-H1/PLK1 shRNA重组质粒转染组,转染后24,48 h,分别通过RT-PCR和...
作者:谢平; 白小明; 穆会君; 乔伟振; 张滨; 沈云峰; 谢可鸣; 刘艳 期刊:《中华血液学》 2008年第12期
克服肿瘤细胞的多药耐药(MDR),以提高疾病的缓解率及患者长期生存率一直是迫切需要我们去解决的研究课题。葡萄糖神经酰胺合成酶(GCS)通过催化神经酰胺生成葡萄糖神经酰胺,从而阻断神经酰胺的促凋亡作用,并促进细胞的分裂、增殖与生长,因而可能具有导致肿瘤细胞耐药的重要作用。
作者:王季石; 柴柏胜; 方琴; 何颖颖; 陈珵; 杨畅 期刊:《中华血液学》 2011年第06期
目的通过氯高血红素(Heroin)诱导伊马替尼耐药慢性髓系白血病(CML)细胞株K562/A02.IM中血红素加氧酶-1(HO-1)基因表达,探讨HO-1基因对伊马替尼耐药CML细胞增殖的影响,为治疗CML多药耐药及新药的开发提供思路和实验依据。方法采用RT—PCR法检测20例CML伊马替尼耐药患者骨髓细胞中HO-1基因的表达,半定量RT—PCR法和Westernblot法分别检测不同剂量Hemin处理K562/A02-IM细胞不同时间后HO-1的表达,通过AnnexinV/H双染色法...
作者:高峰; 张敬东; 刘云鹏; 卢香兰 期刊:《中华血液学》 2004年第05期
目的 分析K562和K562/DNR细胞中mdrl基因启动子甲基化模式及其与P-gP表达的关系。方法 用流式细胞术和RT-PCR方法检测两个细胞系中mdrl基因的表达,用亚硫酸氢钠脱氨基-DNA测序的方法分析mdrl基因启动子甲基化模式。结果 K562细胞不表达P-gP,mdrl基因启动子甲基化;K562/DNR细胞P-gP表达阳性,mdrl基因启动子非甲基化。结论 K562和K562/DNR细胞mdrl基因启动子甲基化模式不同,前者有甲基化修饰,后者无甲基化修饰,mdrl基因沉...
作者:余海青; 纪春岩; 马道新; 臧绍蕾 期刊:《中华血液学》 2006年第07期
目的构建针对mdr1和mcl1基因的短发夹RNA(shRNA)干扰表达质粒,并探讨联合转染对K562/A02细胞耐药的逆转作用。方法根据mdr1和mcl1基因表达序列设计有效的RNA干扰片段,分别将其构建入质粒表达空载体中,以获得两种基因特异性shRNA干扰表达质粒;然后在脂质体介导下分别和联合转染K562/A02细胞,用G418和(或)HygroB筛选出稳定表达的细胞克隆。用RT—PCR分析mdr1和mcl1mRNA的表达;MTT法检测阿霉素对K562/A02细胞的半数抑制...
作者:许文林; 沈慧玲; 袁伟; 王法春; 江云伟 期刊:《中华血液学》 2006年第07期
目的探讨抗血管内皮生长因子(VEGF)发夹状核酶基因对白血病细胞裸鼠体内生长和肿瘤内血管生成的影响。方法采用脂质体介导的方法将抗VEGF发夹状核酶基因真核表达载体pcDNA—RZ转染白血病细胞系K562,G418抗性筛选获得阳性克隆;抽提基因组DNA,用PCR方法验证核酶基因已转入K562细胞;荧光定量PCR和免疫印迹反应检测白血病细胞中VEGFmRNA和蛋白表达量的改变;将白血病细胞皮下接种BALB/c裸鼠,观察转染细胞在裸鼠体内成瘤及生长...
作者:顾静文; 张弢; 陈波斌; 吕元; 林果为 期刊:《中华血液学》 2006年第01期
目的 研究发夹状小分子干扰RNA(small RNA interference,siRNA)对白血病多药耐药细胞株K562/A02多药耐药基因(mdr1)和谷胱甘肽S-转移酶(GSTπ)基因功能的影响。方法 以mdr1 mRNA第79~99和GSTπ mRNA第308~327核苷酸为作用靶点,合成针对靶区域序列的发夹状siRNA,克隆入pSilencer2.1-U6neo,克隆产物为pSilence mdr1和pSilence GSTπ,转染K562/A02细胞株。用Western blot和荧光免疫组化法观察P糖蛋白(P-gP)和GSTπ蛋白...
作者:谢岷; 康睿; 俞燕; 朱珊; 贺钰磊; 许望琼; 唐道林; 曹励之 期刊:《中华血液学》 2008年第08期
目的探讨高迁移率族蛋白1(HMGB1)基因沉默对白血病细胞耐药逆转的作用。方法将HMGB1基因特异性干扰RNA(HMGB1 siRNA)导入K562/A02细胞中,通过Western blot和RT—PCR方法检测HMGB1基因在转染前后的表达;WST8法检测阿霉素(ADM)对转染前后K562/A02细胞的半数抑制浓度(IC50);流式细胞术检测凋亡细胞百分率;Western blot检测线粒体促凋亡蛋白Smac/DIABLO的释放:采用caspase活性定量检测试剂盒分析caspase-3的活性。结果...
作者:胡绍燕; 陈子兴; 岑建农; 谷敏; 赵晔; 沈慧玲; 王玮 期刊:《中华血液学》 2006年第02期
目的 探讨视网膜母细胞瘤相关蛋白46(RbAp46)基因对白血病细胞的作用机制。方法 将全长RbAp46基因的cDNA转染人白血病细胞系K562细胞及人脑膜胶质瘤细胞系SHG44细胞,建立稳定过度表达RbAp46基因的细胞株,观察细胞的生物学行为的同时,通过RT—PCR方法寻找表达差异的相关基因。结果 过度表达RbAp46基因的K562细胞及SHG44细胞生长受抑。表现在K562/RbAp46细胞与K562/CMV细胞于生长第4天分别为(90.00±8.40)×10^4和(119.58...
作者:宋永平; 房佰俊; 魏旭东; 郑树 期刊:《中华血液学》 2005年第11期
目的进一步阐明白血病细胞对伊马替尼耐药的机制.方法经过对K562细胞系长期的鬼臼乙叉甙(Vp16)诱导和克隆筛选,建立了一株耐药细胞系K562/Vp16,利用干细胞高效能将Hoechst 33342荧光染料泵出细胞的特性,采用流式细胞术从K562/Vp16细胞系中分选出一小群细胞,即边缘细胞(Side population,SP),称为K562/Vp16 SP细胞,并初步探讨了其对伊马替尼耐药的机制.结果BCR/ABL和ABL蛋白在K562细胞、K562/Vp16 SP细胞及K562/Vp16非SP细胞(K562/Vp...