摘要：本研究以青海东部地区中国沙棘为试验材料,以中国沙棘雌雄株叶片基因组DNA混池为模板,再用初筛的引物UBC-857用于ISSR体系的优化。采用正交实验并结合单因素实验方法进行优化中国沙棘ISSR-PCR反应体系,得到的最优20.0μL反应体系为:DNA (10 ng/μL) 2.0μL,dNTPs (10 mmol/L) 1.6μL,引物(10μmol/L) 0.2μL,10×PCR Buffer (含Mg2+15μmol/L) 2.0μL,Mg2+Cl (25 mmol/L) 2.0μL,Taq DNA聚合酶(5 U/μL) 0.2μL。经过筛选,引物UBC807能够稳定地扩增出雌雄特异性条带。通过建立最优IS SR-PCR反应体系,为研究中国沙棘提供分子标记水平上的理论依据和技术方法。

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