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紫茎泽兰处理鸡柔嫩艾美耳球虫后差异基因筛选和分析

作者：晏云涛; 吕瑞青; 石莲琴; 杨建发; 段纲; 邹丰才; 项勋 刊期：2018年第09期

为获得紫茎泽兰处理鸡柔嫩艾美耳球虫后差异基因,将0.5%紫茎泽兰提取液作用于鸡柔嫩艾美耳球虫卵囊孢子化过程,采用抑制消减杂交技术(SSH)筛选处理后卵囊的差异表达基因,通过GO和COG功能预测分析,并采用实时荧光定量PCR验证差异表达的基因。结果显示,采用SSH成功构建了紫茎泽兰处理前后鸡柔嫩艾美耳球虫卵囊的cDNA消减文库,获得86条ESTs序列,经...

奶水牛固醇携带蛋白2基因克隆、生物信息学分析及其组织表达检测

作者：梁莎莎; 庞春英; 邓廷贤; 马小娅; 陆杏蓉; 段安琴; 梁贤威 刊期：2018年第09期

本研究旨在对水牛固醇携带蛋白2(sterol carrier protein 2,SCP2)基因进行克隆及生物信息学分析,并检测其在水牛不同组织中的表达。以黄牛SCP 2基因(登录号:NM_001033990.3)为种子序列成功克隆了水牛SCP 2基因完整CDS区,该序列长1 632 bp,可编码543个氨基酸;其与黄牛、绵羊、山羊、白鲸、人、家犬和家猫的同源性分别为95.9%、93.4%、92.4%、89.4...

羊口疮病毒疫苗株与野毒株VIL-10基因的比较分析

作者：冯倩; 吴锦艳; 陈妍; 刘永杰; 张克山; 尚佑军; 刘湘涛 刊期：2018年第09期

试验旨在比较分析羊口疮病毒(orf virus,ORFV)VIL-10基因在疫苗株和野毒株之间的差异特征。参照GenBank中公布的ORFV NZ2株的VIL-10基因序列设计并合成1对特异性引物,分别以疫苗株和野毒株提取的基因组DNA为模板,采用PCR方法扩增ORFV的VIL-10基因全序列并进行测序,应用生物信息学相关软件分析基因的核苷酸、氨基酸变异情况及蛋白结构。结果显示,...

牛支原体pdhc基因的克隆、表达及其亚细胞定位

作者：张懿; 邢小勇; 温峰琴; 包世俊 刊期：2018年第09期

试验旨在研究牛支原体(Mycoplasma bovis,M.bovis)武威株二氢硫辛酰胺转乙酰酶(PDHc-E2)基因序列特征及其在牛支原体细胞中的位置。参照GenBank中牛支原体HB0801株pdhc基因(登录号:CP002058.1)设计引物,应用PCR扩增获得牛支原体武威株pdhc基因,在测序及序列分析的基础上,应用Overlap PCR完成点突变后将其克隆至pET-28a(+)中,构建原核表达载体pET...

弓形虫MORN 2基因敲除株的构建及其表型鉴定

作者：陈凯; 王金磊; 白梦捷; 杨文彬; 黄思扬 刊期：2018年第09期

本研究旨在构建弓形虫(Toxoplasma gondii)Ⅰ型RH虫株的膜占位与识别联结蛋白2(membrane occupation and recognition nexus protein,MORN2)基因敲除株,探究MORN 2基因的表型功能。利用CRISPR/Cas9技术在sgRNA设计网站筛选出以MORN 2基因为靶标的sgRNA并设计引物,以pSAG1∷CAS9-U6∷sgUPRT质粒为模板,在Q5酶作用下构建出MORN2靶向CRISPR的质粒;...

利用重叠延伸PCR构建红色荧光蛋白布鲁氏菌表达载体

作者：罗成; 齐江矫; 王元元; 高剑峰 刊期：2018年第09期

为了构建能够在布鲁氏杆菌宿主细胞和宿主个体中稳定表达红色荧光蛋白的载体,试验通过PCR分别获得核糖体结合位点-红色荧光蛋白(RBS-Red)与布鲁氏菌特异DNA(BDNA)片段,利用重叠延伸PCR获得RBS-Red-BDNA重叠片段;将重叠片段插入pLB载体,利用SmaⅠ与SacⅡ对重组pLB载体和pMC-221质粒进行双酶切后连接目的片段,连接产物转化大肠杆菌DH5α感受态细胞;...

羊源类鼻疽伯克霍尔德菌BPSL 1467基因克隆、表达及其蛋白生物信息学分析

作者：张萌萌; 李宝宝; 曹瑞勇; 黄海峰; 张振兴; 杨小健; 聂鑫; 朱姝; 王凤阳; 杜丽 刊期：2018年第09期

试验旨在克隆和表达羊源性类鼻疽伯克霍尔德菌(Burkholderia pseudomallei,B.pseudomallea)的BPSL 1467基因,并对其表达的蛋白进行生物信息学分析。以羊源类鼻疽伯克霍尔德菌(BPHN1株)基因组为模板,参照GenBank中类鼻疽伯克霍尔德菌K96243标准株BPSL 1467基因序列设计引物,PCR扩增获得目的基因片段,将所得片段与pET-28a(+)载体连接,构建pET-28a(...

伏牛白山羊TACR 1基因扩增及生物信息学分析

作者：施会彬; 王玉琴; 田志龙; 张小辉; 王建平; 杨芳; 李元晓 刊期：2018年第09期

本研究旨在克隆伏牛白山羊TACR 1基因,并对其结构和编码蛋白进行生物信息学分析,为进一步研究TACR 1基因的功能及其在生殖生理和免疫调节中的作用奠定基础。根据GenBank中已发表的山羊TACR 1基因(登录号:NC_030818.1)序列设计引物,对伏牛白山羊TACR 1基因进行分段PCR扩增并测序,拼接后得到包含TACR 1基因完整编码区的序列片段。结果表明,伏牛白...

河流型水牛热休克蛋白70的原核表达及其对精液抗冻性的影响

作者：李芳芳; 龙开旭; 俸祥仁; 黄项生; 潘堂峰; 江明生; 王国利; 邓祝新; 蒋钦扬; 郭亚芬 刊期：2018年第09期

试验旨在克隆河流型水牛热休克蛋白70(heat shock protein 70,HSP70)基因的CDS区序列,构建HSP70原核表达载体,诱导表达HSP70融合蛋白,进一步研究HSP70蛋白对水牛精液抗冻性的影响。以摩拉水牛精子基因组DNA为模板,采用PCR方法扩增HSP 70基因CDS区序列,将PCR产物与pET30a质粒连接构建重组原核表达质粒,诱导表达HSP70融合蛋白,将获得的表达蛋白作...

过表达MAT2A基因促进猪肌内脂肪细胞分化的研究

作者：赵存真; 吴海港; 唐雪峰; 焦凤超; 马云; 刘纪成 刊期：2018年第09期

本研究通过构建腺病毒介导的体外超表达载体,探究腺苷甲硫氨酸转移酶2A(methionine adenosyltransferase 2A,MAT2A)基因在猪肌内脂肪细胞分化中的作用。根据GenBank中猪MAT2A基因mRNA序列(登录号:NM_001167650.1)设计引物,提取猪脂肪组织细胞总RNA并反转录获得cDNA,以此为模板进行PCR扩增并连接到pAdTrack-CMV腺病毒穿梭载体中,对重组质粒pAd-MA...

高温对母猪泌乳和相关调控激素影响的研究进展

作者：张浩洁; 胡宝玉; 熊佳丽; 陈婷; 孙加节; 罗君谊; 习欠云; 艳; 张永亮 刊期：2018年第09期

母乳的产量和质量对哺乳仔猪的成活率、生长速度及健康程度至关重要,而高温是影响家畜泌乳健康的一个重要环境因素。特别是夏季,动物因长期处于高温环境而容易引发热应激。此外,动物的泌乳过程受到机体内分泌系统的严格调控,涉及多种激素,包括催乳素(PRL)、生长激素(GH)、胰岛素样生长因子-1(IGF-1)等。很多生产数据和研究结果表明,高温会造成母...

三丁酸甘油酯对乙酸刺激仔猪肠道屏障功能的影响

作者：张俊梅; 宋转; 周颖; 刘文凯; 易丹; 王蕾; 赵迪; 侯永清 刊期：2018年第09期

日粮中添加辣诺素对海兰褐蛋鸡产蛋性能和蛋品质的影响

作者：陈志敏; 刘国华; 郑毅; 常文环; 郑爱娟; 蔡辉益; 张姝 刊期：2018年第09期

对妊娠后期甘肃高山细毛羊补饲秸秆全价颗粒饲料效果的研究

作者：王春辉; 张利平; 张昌吉 刊期：2018年第09期

瘤胃源益生菌对小鼠生长和生理特性的影响

作者：冀海龙; 王红英; 周英男; 钱斯日古楞 刊期：2018年第09期