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CRISPR-Cas9介导的蒙古牛MSTN基因敲除细胞系的建立

作者：郭梓茹; 张立; 马云龙; 苏小虎; 周欢敏; 张焱如; 刘晓 刊期：2018年第04期

试验旨在利用CRISPR-Cas9技术对蒙古牛胎儿成纤维细胞肌肉生长抑制素(myostatin,MSTN)基因进行编辑,构建无标记的MSTN基因敲除的蒙古牛细胞系,为培育肌肉发达的蒙古牛提供试验材料。通过组织块贴壁法对妊娠45d的蒙古牛胎儿建立皮肤成纤维细胞系,同时在第2外显子区域选定1个gRNA靶位点,使用在线软件设计sgRNA序列,并选取评分较高的3个sgRNA,采用...

绵羊DRB1基因外显子2酵母表面展示库的构建及鉴定

作者：王元元; 严国; 罗成; 齐江姣; 谭君; 周光普; 周永顺; 徐杰; 高剑峰 刊期：2018年第04期

为了揭示布鲁氏菌病的致病机制并研制其新型分子疫苗,试验利用酿酒酵母展示系统展示绵羊白细胞表面抗原DRB 1基因,构建DRB 1基因外显子2的酵母表面展示库。参照GenBank中绵羊MHCⅡDRB 1基因序列设计引物,以绵羊脾脏组织cDNA为模板,反转录扩增得到预期长度的产物,双酶切连接到克隆载体pEASY-T1,命名为pEASY-T1-DRB1。双酶切连接到表面展示载体pYD...

三穗麻鸭Cofilin2基因序列分析及其组织表达研究

作者：华敏; 贺欣薇; 万润; 程振涛; 周碧君; 文明 刊期：2018年第04期

为探究三穗麻鸭丝切蛋白2(Cofilin2)基因特征及其在鸭组织中的表达规律,试验根据GenBank中鸡Cofilin 2基因序列设计特异性引物,利用RT-PCR方法扩增获得目的基因,利用生物信息学软件分析三穗麻鸭Cofilin 2基因特征,实时荧光定量PCR方法检测Cofilin 2基因在三穗麻鸭不同组织中的表达情况。结果显示,三穗麻鸭Cofilin 2基因编码区大小为498 bp,可编...

水貂生长激素的原核表达及特异性抗血清制备

作者：苏俊; 刘曼; 王吉贵; 孙燕; 刘维全 刊期：2018年第04期

本研究旨在建立水貂生长激素(mink growth hormone,mGH)的原核高效表达体系,探索mGH蛋白规模化生产方法,利用获得的目的蛋白制备特异抗血清。将已构建的原核表达载体pET28b-mGH转化大肠杆菌Rosetta(DE3)TM pLysS感受态细胞,经IPTG诱导表达,超声破碎菌体后离心获得包涵体蛋白,利用8 mol/L尿素对其进行溶解和复性,经Ni-NTA树脂亲和层析纯化获得重...

从江香猪PDK4基因干扰载体的构建与检测

作者：杨洋; 许厚强; 陈伟; 徐敏; 谌颖莲 刊期：2018年第04期

为了进一步揭示PDK 4基因在猪肌内前体脂肪细胞中的调控作用,本试验采集5日龄从江香猪背最长肌,采用Ⅱ型胶原酶进行消化,分离肌内前体脂肪细胞,进行原代和传代培养及形态学观察;根据克隆得到的PDK 4基因序列,利用在线软件设计合成3对特异性单链siRNA序列和1对阴性对照序列,经退火后形成双链,连接pLVX-shRNA2-Puro载体,重组质粒采用双酶切及测序...

定量检测猪繁殖与呼吸综合征病毒游离受体夹心ELISA方法的建立与应用

作者：夏文龙; 吴植; 郭长明; 朱善元; 余树培; 张鑫宇; 夏晓莉; 孙怀昌 刊期：2018年第04期

为了建立猪繁殖与呼吸综合征病毒(porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)游离受体定量检测方法,本试验用表达猪唾液酸黏附素(Sn)游离受体的重组腺病毒rAd-Sn4D-Fc感染PK-15细胞,以细胞培养上清纯化的Sn4D-Fc游离受体作为标准抗原,鼠抗猪Sn免疫血清为一抗,生物素标记兔抗猪Sn多克隆抗体为二抗,建立定量检测Sn4D-Fc游离受体...

梅花鹿瘤胃纤维素降解菌的分离鉴定及其酶活力测定

作者：韦海婷; 刘晗璐; 李光玉; 司华哲; 刘晓颖 刊期：2018年第04期

为获得来源于梅花鹿瘤胃的高效纤维素降解菌,本试验采集了3锯龄健康梅花鹿的新鲜瘤胃液,用羧甲基纤维素钠(CMC-Na)培养基分离筛选纤维素降解菌,综合其形态学、生理生化特征和16S rDNA基因测序等对分离菌株进行分类学鉴定,利用DNS法对菌株的产纤维素酶条件进行初步研究,并探讨以不同物质为底物时的纤维素酶酶学特性,为后期菌株的应用提供理论数据...

11株瘤胃源芽孢杆菌生理学特性研究

作者：谈诗谣; 张雪; 王红英; 钱斯日古楞 刊期：2018年第04期

试验对已筛选的11株瘤胃源芽孢杆菌的产酶活力、耐酸、耐胆盐和抑菌活性及菌株间相容性进行研究。采用3,5-二硝基水杨酸法(DNS法)测定纤维素酶的活力,涂布平板计数法测定菌株的耐酸性、耐胆盐等特性,牛津杯法测定抑菌活性,滤纸片法进行室内相容性试验。结果显示,菌株T-2、T-3和T-10产纤维素酶的酶活力较高;菌株T-2、T-5、T-7、T-8和T-9表现较强...

发酵玉米蛋白粉对奶牛瘤胃体外发酵特性及微生物菌群的影响

作者：姜鑫; 张立阳; 赵雪娇; 徐宏建; 张永根 刊期：2018年第04期

添加不同发酵菌剂的完全混合发酵日粮对延边黄牛瘤胃微生物体外发酵特性的影响

作者：张旭; 郭盼盼; 严昌国; 高青山; 金锡九 刊期：2018年第04期

5种青贮饲料在奶牛瘤胃中的淀粉降解特性

作者：刘艳芳; 马健; 李胜利; 余雄 刊期：2018年第04期

发酵黄芪—甘草水提物对817肉鸡生长性能、免疫器官指数和肉品质的影响

作者：张晓静; 史洪涛; 牛湘楠; 宋予震; 汤法银; 边传周; 乔宏兴 刊期：2018年第04期

中草药—益生菌—胆汁酸复合制剂对蛋鸡生产性能、蛋品质及免疫指标的影响

作者：曾佳佳; 陈静; 陈振; 李士栋; 王丽荣; 孙明杰; 徐海燕; 谷巍 刊期：2018年第04期

发酵中药渣对断奶仔猪生长性能、血液生化指标、抗氧化能力及免疫功能的影响

作者：侯海锋; 李茜 刊期：2018年第04期

肉用西门塔尔牛与和牛杂交群体的肉品质分析

作者：史新平; 陈燕; 徐玲; 金生云; 宝金山; 牛红; 王泽昭; 李俊雅; 孙少华 刊期：2018年第04期