中国实验诊断学杂志 统计源期刊

结核分枝杆菌抗原优势肽段融合抗原38kD-ESAT6-CFP10的构建与抗原性初步检测

作者：冯晓燕; 陈坤; 宋晓国; 王国华; 朱翠侠; 李惠文; 韦攀健; 张贺秋 刊期：2009年第03期

目的为了提高结核病诊断试剂的特异性和敏感性，构建了结核分枝杆菌抗原优势肽段融合抗原38kD-ESAT6-CFP10，并且采用双抗原夹心ELISA方法初步分析了该融合抗原的抗原性。方法运用生物学软件分析抗原优势肽段并模拟其串联后的三维结构，以确保串联后仍保持良好的抗原性。通过PCR方法分别扩增38kD、ESAT-6和CFP40抗原优势肽段基因并将其进行连接...

重组质粒pcEgr-hp53的构建及在A549和SKOV-3细胞中电离辐射诱导p53基因和蛋白的表达

作者：刘锋; 董丽华; 李艳博; 龚守良 刊期：2009年第03期

目的构建重组质粒pcEgr-hp63，并探讨其在A549和SKOV-3细胞中的辐射诱导表达及抗癌作用。方法将野生型p53 cDNA全长插入pcDNA3．1质粒多克隆位点，用Egr-1启动子替代pcDNA3.1质粒CMV启动子，构建成pcEg-hp53重组质粒；通过脂质体介导转染法将重组质粒坶hp53和pcDNA3.1分别转染入A549和SKOV3细胞株，并经G418筛选稳定克隆并扩增培养。采用RT-PCR...

激活素受体相互作用蛋白ARIPzip真核表达载体的构建及表达

作者：裴颖; 刘飙; 鲍永利; 于春雷; 孙颖; 李玉新; 乌垠; 苏冠方 刊期：2009年第03期

目的构建激活素受体相互作用蛋白 （aetivin receptor interacting protein zip, ARIPzip） 真核表达载体，以便进一步探讨其生物学作用。方法从小鼠成纤维细胞3T3中提取HNA，并利用ARIPzip特异性引物通过RT-PCR方法扩增了ARIPzip cDNA，并克隆入pcDNA-Flag载体中，构建重组载体pcDNA-F-ARIPzip。将重组载体转染入HEK293细胞中，并通过免疫印迹...

骨髓间充质干细胞向心肌样细胞分化的实验研究

作者：曹京燕; 程月新; 姜敏辉; 姜胜华; 林娜; 王育林 刊期：2009年第03期

目的研究5-氮胞苷（5-Aza）对培养人骨髓间充质干细胞（MSCs）的作用，并对分化后的心肌样细胞进行鉴定。方法采用密度梯度离心法分离到骨髓单个核细胞（MB-MNC），用含200ml／L胎牛血清的低糖型DMEM培养液进行培养。采用差速贴壁法纯化MSCs，用流式细胞仪检测细胞表面抗原。以5-Aza诱导第3代MSCs 24h后，继续培养。于培养的第4周，采用免疫细胞...

《中国实验诊断学》杂志入编《中文核心期刊要目总览》

刊期：2009年第03期

移植骨髓间充质干细胞后的脑脊液促进神经干细胞的分化

作者：杨海云; 顾锐; 王文军; 高忠礼 刊期：2009年第03期

目的观察骨髓间充质干细胞（BMSC）移植于损伤脊髓后，所提取的脑脊液（BMSCs-CSF）对体外培养的神经干细胞向神经元细胞分化的影响，探讨BMSCs促进神经干细胞分化的机制。方法培养BMSCs及神经干细胞；制作大鼠脊髓损伤模型；将体外培养的BMSCs注入脊髓损伤区，于术后3d、5W分别提取脑脊液，并注入神经干细胞培养液中，观察神经干细胞向神经元细...

VK3通过引起氧化应激激活NF-κB诱导PC-3M细胞发生凋亡

作者：周磊; 王皓; 苏静; 李扬; 赵雪俭; 孙连坤 刊期：2009年第03期

目的探讨维生素K3（VK3）作用下人雄激素非依赖前列腺癌PC-3M细胞发生凋亡的机制。方法PC-3M细胞按处理方法不同分对照组、VK3（60／μmol／L）组、VK3（60μmol／L）＋NAC（40μmol／L）组，给药事件均为12h。应用MTF法检测PC-3M细胞生存率；PI-AnnexinV双染法检测细胞凋亡率；荧光法检测细胞内还原型谷胱甘肽含量；提取细胞核蛋白，Western-blot...

五味子提取物逆转K562／DOX细胞阿霉素耐药的实验研究

作者：邱海洋; 郗昕; 张一帆; 梁铁; 张永和; 宋京郁; 孙连坤 刊期：2009年第03期

目的探讨五味子提取物对阿霉素耐药细胞株K562／DOX的耐药逆转作用。方法MTT法检测单独应用阿霉素或阿霉素与五味子提取物联合作用的K562／DOX细胞的生存率；RT-PCR检测MDR1、MRP1 mRNA表达；Western blotting检测MDR1蛋白的表达。结果与对照组相比，单独应用阿霉素组细胞的生存率未见明显变化；而阿霉素与五味子提取物联合作用组细胞存活率显著...

趋化因子FKN对单个核细胞TNF-α和MMP-2表达的影响及ERK在其中的作用

作者：张学颖; 雷明明; 孙健; 金元哲 刊期：2009年第03期

目的探讨趋化因子Fmetalkine（FKN）对单个核细胞肿瘤坏死因子-α（Tumor Necrosis Factor，TNF-α）和基质金属蛋白酶-2（matrix metal proteinase-2, MMP-2）表达的影响及细胞外信号调节激酶（extracellular signal-regulated kinase,ERK）在其中的作用。方法抗凝血用聚蔗糖-泛影葡胺密度梯度离心法分离人外周血单个核细胞；将提取的单个核细胞...

Smad7稳定转染胶质母细胞瘤细胞系的建立

作者：陈志明; 曹红十; 李荣贵; 史艳芬; 李玉林 刊期：2009年第03期

目的建立Smad7稳定转染胶质母细胞瘤细胞株，并观测Smad7表达对U251细胞增殖的影响。方法应用脂质体将真核细胞表达质粒pCDNA3.0-Smad7和空载质粒pCDNA3.0转染人胶质母细胞瘤细胞。并在转染后绘制生长曲线以观测细胞增殖。结果RT-PCR和westem blot证实Smad7在转录和蛋白翻译水平上均呈高表达。Smad7转染后，细胞增殖速度减慢。结论Smad7稳定转染...

基质金属蛋白酶抑制剂抗肝癌细胞系侵袭作用的实验研究

作者：王海波; 张弘; 韩喜春; 姜伟栋; 贾明库 刊期：2009年第03期

目的探讨基质金属蛋白酶抑制剂-3（TIMP-3）对人肝癌细胞系（HXPG2）恶性表型的影响。方法利用基因重组技术构建含全长人TIMP-3cDNA的真核表达载体，利用脂质体法转染入HEPG2细胞。检测转染后鳓细胞的金属蛋白酶（MMPs）的活性、体外侵袭能力、制成裸鼠肝癌动物模型后体内成瘤性及自发转移能力等多项生物学行为的变化。结果HEPG2细胞在转染了TIM...

大鼠慢性脑缺血后皮层凋亡调控基因变化及法舒地尔对其的影响

作者：李宗树; 徐忠信; 莽靖; 魏爱宣; 赵晴; 钱佳丽; 陈晓红 刊期：2009年第03期

目的观察法舒地尔对慢性脑缺血大鼠学习记忆及皮层Caspase-3、Bcl-xl达的影响。方法采用双侧颈总动脉永久性阻断法（2VO）建立慢性脑缺血模型，应用Morris水迷宫检测学习记忆能力，免疫组化方法检测凋亡调控基因Caspase-3、Bcl-xl表达。结果2VO组和法舒地尔组大鼠与假手术组相比逃避潜伏期和游泳路径均明显延长，法舒地尔组学习记忆成绩均明显优...

尼美舒利对人胃癌SGC7901细胞生长及细胞周期分布的影响

作者：黄国民; 乔士兴; 房学东; 刘林林 刊期：2009年第03期

目的探讨尼美舒利对体外培养的胃癌细胞生长及细胞周期分布的影响。方法以人胃癌细胞株SGC7901为对象，用放射免疫分析法测定细胞培养上清PGE2水平，体外药物敏感实验（MTT）法检测尼美舒利对肿瘤细胞的增殖抑制效应，流式细胞术检测肿瘤细胞周期分布变化情况。结果尼美舒利可减少PGE2产生，尼美舒利对人胃癌细胞株生长的抑制作用呈时间、剂量依...

紫杉醇联合三氧化二砷作用人结肠腺癌LS-174T细胞增殖及凋亡的实验研究

作者：刘洪义; 王权; 于金海; 王大广; 所剑 刊期：2009年第03期

目的以人结肠腺癌LS-174T细胞系作为体外模型，研究紫杉醇与三氧化二砷联合作用抑制肿瘤细胞增殖及凋亡双重作用的机理。方法采用不同浓度的紫杉醇与三氧化二砷联合作用于体外培养的人结肠腺癌LS-174T细胞，以MTT比色法和形态学观察检测其对人结肠腺癌LS-174T细胞的抑制作用。以TUNEL法和Annexin V-Fife、PI染色、共聚焦显微镜检测其对人结肠腺...

蛛网膜下腔出血大鼠脑干组织谷氨酸转运体的表达及尼莫地平的影响

作者：郗昕; 康劲松; 邱海洋; 康秋君; 石国英; 毕云枫 刊期：2009年第03期

目的探讨谷氨酸转运体（EAATs）在蛛网膜下腔出血（ShH）大鼠脑干表达的动态变化。方法采用枕大池二次注血法建立Wistar大鼠SAH模型。应用颅多普勒超声检测和RT-PCR方法，分别观察蛛网膜下腔出血大鼠基底动脉血流速度和谷氨酸转运体在脑干的变化。结果①超声检测显示与对照组相比，枕大池注血大鼠第1天基底动脉血流加快，第7天达到高峰，第14天...