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毛皮兽阿留申病毒可视化交叉等温扩增检测方法的建立及初步应用

作者：韦韬; 吴艳虹; 马瑞芳; 丛丽; 岳志刚; 赵永强; 肖家美; 邵西群 刊期：2019年第06期

为建立快速、特异、灵敏的毛皮兽阿留申病毒可视化交叉引物等温扩增检测方法(CPA),以阿留申病毒属内病毒序列为参考,在VP2序列高变区保守区段设计合成4条特异引物。通过优化CPA反应条件,建立了毛皮兽阿留申病毒可视化交叉引物等温扩增检测方法,并进行了特异性、敏感性试验以及对临床样品的检测。结果显示,该方法可扩增水貂阿留申病毒(AMDV)和狐...

基于重组IBDV VP3蛋白的免疫磁珠间接ELISA抗体检测方法的建立及初步应用

作者：龚如月; 于淑媛; 王书博; 姜艳平; 崔文; 乔薪瑗; 王丽; 周晗; 徐义刚; 李一经; 唐丽杰 刊期：2019年第06期

本研究旨在毕赤酵母中表达鸡传染性法氏囊病毒(infectious bursal disease virus,IBDV)的VP3蛋白,以重组VP3蛋白作为包被抗原建立IBDV血清抗体免疫磁珠间接ELISA检测方法并进行初步应用。利用毕赤酵母表达系统获得约为39 ku的重组VP3蛋白,Western-blotting检测表明,重组VP3蛋白具有良好的特异性和反应原性。免疫磁珠间接ELISA的最佳反应条件:磁...

猪瘟病毒重组酶聚合酶扩增检测方法的建立及应用

作者：王金凤; 张若曦; 刘立兵; 李睿文; 孟令宅; 顾文源; 韩庆安; 王建昌; 袁万哲 刊期：2019年第06期

本研究基于猪瘟病毒(CSFV)5’UTR保守序列,设计特异性引物,建立了可快速检测CSFV的反转录重组酶聚合酶扩增检测方法(reverse-transcription recombinase polymerase amplification,RT-RPA)。该方法在40℃下恒温20 min即可完成反应;且特异性强,与其他瘟病毒和猪的重要病原无任何交叉反应。以体外转录的CSFV RNA为模板,该方法的检出下限为10~2copi...

分子排阻色谱(SEC)分离纯化口蹄疫病毒及其病毒样颗粒的比较

作者：卢渊录; 董虎; 李璐莹; 郭慧琛; 顾玉芳; 孙世琪; 杨玉莹 刊期：2019年第06期

口蹄疫(FMD)是一种世界范围内的烈性偶蹄动物传染病。传统口蹄疫灭活疫苗可以降低疾病发病率,是目前预防口蹄疫的重要手段之一,但灭活疫苗存在病毒逃逸等生物安全问题,已经不适应我国重大疫病逐步净化的方针政策。口蹄疫病毒样颗粒(virus-like particles,VLPs)仅由病毒结构蛋白组成,不含遗传物质,是一种与天然病毒形态最为接近的抗原,其免疫原性...

羊口疮病毒ORFV129蛋白对树突状细胞成熟和功能的影响

作者：杜国玉; 吴锦艳; 曹小安; 李玲霞; 冯倩; 尹双辉; 周建华; 刘永杰; 尚佑军; 刘湘涛; 刘永生 刊期：2019年第06期

猪细胞因子信号传导抑制因子1蛋白的表达纯化与多克隆抗体制备

作者：夏爽飞; 陈鑫鑫; 乔松林; 柴书军; 罗雪刚; 谢莎; 张改平 刊期：2019年第06期

为制备猪细胞因子信号传导抑制因子1(SOCS1)的多克隆抗体,采用RT-PCR扩增猪SOCS1基因序列,将其克隆至原核表达载体pET-28a(+),构建重组表达载体pET28a-pSOCS1,并转化至大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞中,在不同温度、IPTG浓度、诱导时间等条件下进行表达,确定最佳表达条件,并对重组蛋白pSOCS1进行纯化。以表达的重组蛋白pSOCS1免疫新西兰大白兔制备...

弓形虫ME49虫株α-微管蛋白对神经瘤母细胞自噬的影响

作者：孟婷婷; 杨子鹏; 王俊杰; 刘棠慧; 谭杰兴; 李贵峰; 袁子国 刊期：2019年第06期

为研究刚地弓形虫α-微管蛋白(TgTUBA1)与神经瘤母细胞(N2a)自噬的关系,利用TgTUBA1基因的CDS序列设计引物并引入HA标签序列,提取弓形虫ME49虫株总RNA并反转录获得cDNA,以cDNA为模板进行PCR扩增,获得目的片段,并克隆至pcDNA3.1(+)载体上。将构建的真核表达质粒pcDNA3.1(+)-HA-TUBA1转染至N2a细胞内,通过透射电子显微镜和荧光显微镜观察自噬小体,...

γ干扰素通过上调I型干扰素表达协同抑制猪传染性胃肠炎病毒的复制

作者：单玲玲; 符芳; 薛美; 李亮; 刘平黄 刊期：2019年第06期

为探索干扰素(IFN)在猪消化道冠状病毒的预防和治疗中的作用,通过反转录定量PCR(reverse transcription-q PCR,RT-qPCR)和间接免疫荧光试验,分别检测猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)拷贝数和TGEV核衣壳蛋白的表达,发现猪源IFN-γ能够显著抑制TGEV在猪睾丸细胞中的复制,并且相同质量浓度的IFN-γ比IFN-α能更有效地抑制TGEV的复制,与猪源IFN-α有明显的协同...

牛病毒性腹泻病毒1型灭活疫苗的制备及其免疫效果评价

作者：阮文强; 张丹丹; 覃思楠; 汤承; 张斌 刊期：2019年第06期

为研究针对牛病毒性腹泻病毒1型(BVDV1)毒株的灭活疫苗,选用本实验室分离的分离株SMU-Z6/1a/SC/2016和SMU-DJ2/1d/QH/2015与201佐剂制备BVDV水包油包水灭活疫苗免疫BALB/c小鼠或奶牛,并通过抗体中和试验、抗体交叉保护试验及ELISA方法对免疫后的抗体消长规律进行研究。结果显示,分离株SMU-Z6/1a/SC/2016制备的灭活疫苗免疫小鼠后产生的中和抗体...

马链球菌马亚种新疆分离株的分离及耐药性和进化分析

作者：周婷婷; 冯凯; 汪丽; 张雪静; 古丽米热; 邓海峰; 李海; 芦文圆; 赵海利; 吕燕; 苏艳 刊期：2019年第06期

为了解新疆马链球菌马亚种流行株的分子特性和遗传变异情况,对2017年采集的病马淋巴组织进行病原分离培养、生化鉴定和药敏试验,并对该分离菌株的SeM基因进行了PCR扩增和测序分析。同时,将该分离株与本实验室2013-2017年分离的10个分离株的SeM基因与国外分离株构建系统进化树。结果表明,成功分离鉴定了马链球菌马亚种ZZM17-1株,该菌株对阿莫西林...

致狐狸眼炎大肠杆菌的生物学特性检测与致病性分析

作者：于莹; 王少辉; 贺实伟; 吕娇; 韩坤; 白雪; 陈立志 刊期：2019年第06期

为确定辽宁省某狐狸养殖场致患病狐狸眼炎的病原菌,从患病狐狸眼部分离病原菌,并对分离株进行形态观察、生化试验、16S rRNA基因序列测定、血清分型及进化分群,在此基础上完成了毒力基因检测、药敏试验以及人工感染小鼠试验等。镜检结果显示,该细菌为革兰阴性短杆菌,最终鉴定结果可以确定此分离株为O25型大肠杆菌,并且2株菌均属于系统发育群B2群...

猪繁殖与呼吸综合征病毒引起猪生殖道感染的研究进展

作者：尹健安; 王健 刊期：2019年第06期

为寻找可能的猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)新受体,PRRSV诱导细胞凋亡的新机制提供新的思路,同时为PRRSV的防治提供进一步的理论指导,结合国内外研究报道,讨论了PRRSV引起猪生殖道感染的原因,PRRSV在猪生殖组织中的靶细胞及其诱导的细胞凋亡,病毒在生殖组织中引起的病变。指出,猪体生殖道感染由病毒血症引起,PRRSV可感染公猪睾丸组织非成熟的精...

56株食源性单增李斯特菌耐药性测定及耐药基因的检测

作者：李庆辉; 康立超; 杜冬冬; 李红欢; 钱凌霄; 刘扬扬; 马勋 刊期：2019年第06期

为调查新疆部分食源性单增李斯特菌的药物敏感性和相关耐药基因的携带现况,采用微量肉汤稀释法(MIC)和K-B琼脂扩散法对56株单增李斯特菌进行18种抗菌药物敏感性试验。通过PCR方法进行12种相关耐药基因检测,并对耐药基因进行测序分析。结果表明,28.6%(16/56)的菌株微量肉汤稀释法检测耐药,而K-B琼脂扩散法检测19.6%(11/56)菌株耐药。56株单增李斯...

猴头菇多糖对MDRV感染RAW264.7细胞后病毒复制及TLR3诱导表达的影响

作者：林绍青; 骆钰; 李明慧; 孙雪宁; 吴宝成; 黄一帆; 吴异健 刊期：2019年第06期

ZEA和DON及其联合作用对小鼠T淋巴细胞Fas/FasL凋亡信号通路的影响

作者：夏苏干; 孙凯; 蔡国栋; 邹辉; 顾建红; 袁燕; 刘学忠; 刘宗平; 卞建春 刊期：2019年第06期