中国兽医科学杂志 北大期刊 CSCD期刊 统计源期刊

猪2型圆环病毒ORF1基因的克隆及表达

作者：蒋智勇; 宋长绪; 高向阳; 王贵平; 赵亚华 刊期：2004年第05期

根据GenBank中猪圆环病毒2型(PCV-2)的ORF1基因序列,设计合成了1对引物,对PCV-2广东株(GD)ORF1基因进行PCR扩增,将扩增的ORF1基因克隆入pMD 18-T载体,获得的重组质粒命名为pMD-ORF1.将ORF1的KpnⅠ和XbaⅠ双酶切产物插入原核表达载体pBAD/gⅢ C得到重组子,命名为pBAD/gⅢ-ORF1.序列分析表明,克隆的ORF1与德国分离株AF201897核苷酸序列的同源性高...

口蹄疫病毒全长cDNA克隆的快速构建

作者：方先珍; 刘光清; 刘在新; 李平花; 谢庆阁 刊期：2004年第05期

利用RT-PCR和3′ cDNA末端快速扩增(RACE)技术分别扩增出包含口蹄疫病毒(FMDV)全基因组的2个重叠cDN段,将其分别插入到载体pcDNA3.1zeo(+)和pGEM-T-Easy中,然后利用片段本身单一酶切位点将FMDV全长cDNA克隆至pcDNA3.1zeo(+)载体,经PCR扩增、酶切鉴定和序列测定.结果表明,重组质粒(pcDNA3.1/FMDV)携带了FMDV OH/99基因组全长cDNA序列.

猪囊尾蚴cDNA质粒表达文库的构建

作者：宗瑞谦; 才学鹏; 季建莉; 景志忠 刊期：2004年第05期

从猪囊尾蚴中提取总RNA,并分离出mRNA,采用定向克隆方法,将猪囊尾蚴cDN段重组入质粒表达载体pSPORT-1的NotⅠ和SalⅠ双酶切位点之间,构建了猪囊尾蚴cDNA表达文库.通过库容量鉴定,所构建的表达文库的容量为2×106;经含有IPTG和X-gal的颜色选择平皿测定,其重组率为100%.

胸膜肺炎放线杆菌APXⅡA基因的克隆及序列测定

作者：赵卫平; 逯忠新; 陈振文; 杨学山; 赵萍; 高鹏程; 储岳峰 刊期：2004年第05期

用PCR法从胸膜肺炎放线杆菌(APP)7型的DNA提取物中扩增出大小为2 873 bp的APXⅡA基因片段;将PCR产物重组到质粒载体pMD 18-T中,并对重组质粒进行酶切分析及序列测定.结果表明,克隆片段为完整的目的基因,该片段的核苷酸序列与国外分离株M30602的同源性达99.7%.

扎鲁司特对低温诱发肺动脉高压肉鸡右心功能的影响

作者：欧德渊; 乔健; 刘文菊; 李静; 范春艳; 高铭宇; 董世山 刊期：2004年第05期

禽流感重组禽痘病毒疫苗不同途径及剂量接种的免疫效力

作者：乔传玲; 李呈军; 于康震; 刘志军; 李雁冰; 陈化兰 刊期：2004年第05期

将表达禽流感病毒(AIV)H5 HA和N1 NA基因的重组禽痘病毒(rFPV-HA-NA)以不同剂量分别经翅下刺种、肌肉注射、皮下注射、点眼及滴鼻途径接种于4周龄SPF鸡.结果,该疫苗经翅下刺种、肌肉注射和皮下注射途径接种的SPF鸡,能够诱导其产生血凝抑制(HI)抗体;用100LD50的HPAIV A/Goose/Guangdong/1/96(H5N1)毒株攻击后,免疫鸡无一发病和死亡,免疫保护率为1...

鸭源H9N2亚型流感病毒NS基因的克隆及表达

作者：赵思婷; 王贵华; 张瑞华; 金梅林; 陈焕春 刊期：2004年第05期

根据GenBank中收录的H9N2亚型流感病毒的NS基因序列设计合成了1对引物NSU/NSL,利用RT-PCR扩增出了H9N2株NS基因;将该基因片段克隆到pMD 18-T载体上,并对所得到的重组质粒进行酶切分析及序列测定.结果,获得了NS基因片段的阳性重组子,扩增的NS基因包含NS1基因完整的阅读框架和部分NS2基因,其序列与GenBank中收录的其他分离株NS基因比较,同源性达96...

犊牛前脂肪细胞的培养及其增殖与分化模型的建立

作者：夏成; 王哲; 朱淑玲; 张才; 张洪友 刊期：2004年第05期

选择犊牛小肠网膜、附睾脂肪垫、腹部皮下脂肪组织材料,应用原代消化细胞培养法培养细胞.结果,由小肠网膜培养出了成分均一、增殖旺盛、分化率高的梭形细胞.经形态学动态变化观察、生长曲线测定、油红O脂肪染色及对胰岛素反应的测定,证明为功能活跃的前脂肪细胞,并在体外重现了其增殖、肥大的全过程.结果显示,小肠网膜脂肪组织存在着功能活跃的...

牛羊流行性口膜炎的治疗

作者：易淑琴 刊期：2004年第05期

2003年6～8月,甘肃省渭源县从外地引进数批小尾寒羊,在一些羊群中开始流行口膜炎,以后五竹、路园、锹峪、莲峰等乡的役牛相继发生类似疫病,经甘肃省兽医技术推广总站系统检查,确诊为口膜炎.

《牛羊病诊治彩色图谱》出版

刊期：2004年第05期

广西家犬狂犬病病毒的感染状况调查

作者：李华明; 郭建刚; 刘棋; 郑敏; 邓朝阳; 邹联斌; 兰斌 刊期：2004年第05期

为了解广西家犬狂犬病病毒的感染状况,采用RT-PCR方法对广西13个市、地区的家犬携带狂犬病病毒情况进行了检测,结果阳性检出率达6.69%(19/284),证明广西家犬存在一定程度的带毒.

小热休克蛋白家族的研究进展

作者：郭爱疆; 才学鹏 刊期：2004年第05期

1962年Ritossa等发现果蝇唾液腺多线染色体在环境温度升高时,某些特定部位在1min 内就出现'蓬松'现象,当温度恢复到正常时,其他部位才会出现类似的蓬松.

动物RNA病毒全长感染性cDNA的研究进展

作者：张淼涛; 刘湘涛; 张彦明; 谢庆阁 刊期：2004年第05期

动物致病性RNA病毒,如登革热病毒(DEN)、猪瘟病毒(CSFV)、牛病毒性腹泻病毒(BVDV)、口蹄疫病毒(FMDV)和风疹病毒(RUBV)等,可诱发人或动物产生严重的传染病.这些传染病在世界各地的间歇性暴发,给人类健康造成了严重影响,给畜牧业发展造成了巨大的损失.逆向遗传学的发展有力地推动了动物RNA病毒的研究,它的基本内容包括通过RT-PCR获得RNA病毒的全...

大肠埃希氏菌F18ab菌毛F亚单位基因的克隆与鉴定

作者：成大荣; 徐建生; 吕玲; 唐波; 曹军; 孙怀昌; 高崧 刊期：2004年第05期

根据已发表的大肠埃希氏菌F18ab菌毛F亚单位(FedF/ab)的基因(fedF/ab)序列,设计了1对引物,利用PCR技术从大肠埃希氏菌F107/86、YCED1、YCED2、C、D和12F株中分别扩增获得了一段序列,并克隆至pGEM-T载体,获得了重组质粒TF107F、TYCED1F、TYCED2F、TCF、TDF、T12FF.经琼脂糖凝胶电泳、序列测定及分析,6个重组质粒的大小均为903 bp,与fedF/ab 基因...

狂犬病的分子生物学诊断

作者：殷相平; 柳纪省; 胡永浩; 张兴旺; 李志勇; 王辉; 李宝玉; 兰喜 刊期：2004年第05期

从攻击咬伤人并致其死亡的犬脑组织中提取总RNA,用特异性引物通过反转录聚合酶链反应(RT-PCR)获得了长度约为1 423 bp的核酸片段,与预期的片段大小相符;将扩增产物连接到pMD 18-T 载体中,转化大肠埃希氏菌JM109,筛选氨苄青霉素抗性菌落,提取质粒,经酶切鉴定、PCR分析及测序,证明所克隆的1 423 bp片段含有完整的狂犬病病毒N基因,与国外参考毒株的...