首页 期刊 食品科学技术学报 食品中蜡样芽胞杆菌实时荧光RPA检测方法的建立与应用 【正文】

食品中蜡样芽胞杆菌实时荧光RPA检测方法的建立与应用

作者:刘立兵; 南汇珠; 孙晓霞; 姜彦芬; 王金凤; 王建昌 河北出入境检验检疫局技术中心; 河北石家庄050051; 河北省检验检疫科学技术研究院; 河北石家庄050051
蜡样芽胞杆菌   等温扩增   实时荧光rpa   检测方法  

摘要:为实现简便快速地检测蜡样芽胞杆菌(Bacillus cereus),根据Gen Bank中蜡样芽胞杆菌16 S RNA序列设计特异性引物和exo探针,建立了一种实时荧光重组酶聚合酶扩增方法,在39℃恒温下仅需20 min即可完成检测。该方法特异性扩增蜡样芽胞杆菌16 S RNA基因片段,对其他芽胞杆菌和非芽胞杆菌无扩增;以蜡样芽胞杆菌基因组DNA作为模板,该方法的检测灵敏度为1.0×10^-3ng/μL,同已发表的real-time PCR方法一致。人工污染实验表明,当大米饭中蜡样芽胞杆菌污染量≥1.5×10^4CFU/g时,即可通过real-time RPA方法检出,所需时间仅为6-13min;而当污染量≥1.5×10^5CFU/g时,才能通过real-time PCR方法检出,所需时间至少为30 min(Ct值为20-31)。

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