杂志简介：《中国兽医科学》杂志经新闻出版总署批准，自1971年创刊，国内刊号为62-1192/S，是一本综合性较强的农业期刊。该刊是一份月刊，致力于发表农业领域的高质量原创研究成果、综述及快报。主要栏目：预防兽医学、临床兽医学
杂志简介：《中国兽医科学》杂志经新闻出版总署批准，自1971年创刊，国内刊号为62-1192/S，是一本综合性较强的农业期刊。该刊是一份月刊，致力于发表农业领域的高质量原创研究成果、综述及快报。主要栏目：预防兽医学、临床兽医学
作者：宋浩刚 吴亚峰 沈剑强 胡萌 刘永杰 陆承平 刊期：2011年第02期
从南京市某集贸市场所售6种淡水鱼体内分离细菌,根据细菌染色、培养特性及16SrRNA基因扩增等特点进行嗜水气单胞菌的鉴定,对鉴定阳性的菌株测定其溶血、溶蛋白特性,采用PCR技术调查毒力因子的基因分布情况,以斑马鱼作为实验动物研究了不同毒力基因型代表菌株的致病性。试验共分离得到39株嗜水气单胞菌,检出率为65.0%（39/60）;检测气溶素（aer）...
作者：白东宁 齐雪峰 赵献军 段连茂 靳亚平 李义 王大会 王芳 刊期：2011年第02期
以永生化山羊子宫内膜上皮细胞作为体外模型,采用革兰氏染色法观察乳酸菌和致病菌对子宫内膜上皮细胞的黏附特性;通过平板计数法观察乳酸菌对致病菌的黏附拮抗作用。结果显示,嗜酸乳杆菌、粪肠球菌、盲肠肠球菌对子宫内膜上皮细胞均表现出很强的黏附特性,黏附细菌数分别为每个细胞87、45、34个。黏附拮抗试验显示,3株乳酸菌均使致病菌的黏附率显...
作者：张伟伟 王超 杨宗伟 陈宗艳 李传峰 刘光清 刊期：2011年第02期
为分析J亚群禽白血病病毒LTR基因的体外启动活性,将其克隆至含有萤光素酶报告基因的pGL3载体中,构建了LTR重组质粒及其缺失不同区段的重组质粒,转染DF-1细胞测定萤光素酶的表达情况。结果显示,缺失U3时萤光素酶的表达量明显降低,缺失U5时萤光素酶的表达反而上升,这表明U3区可能具有强启动子功能,而U5区可能具有负调控功能。在此基础上,为鉴定LTR...
作者：冯迎春 颜其贵 郭万柱 王小玉 舒蕾' 刊期：2011年第02期
根据山羊地方性鼻内肿瘤病毒（ENTV-2）基因组序列设计5对引物,通过RT-PCR技术从山羊地方性鼻内肿瘤自然感染病例的鼻液中分段扩增获得了ENTV的基因组,构建了ENTV的cDNA文库,并对基因组序列进行了生物信息学分析。结果显示,获得的序列全长7 168bp,包含相互重叠的gag-pro-pol-env编码区及部分5′端非编码区,属B/D型病毒粒子。ENTV-SC与ENTV-2（20...
作者：何小兵 贾怀杰 陈国华 房永祥 李玩生 曾爽 景志忠 刊期：2011年第02期
采集甘肃省兰州市某猪场疑似猪瘟样品,将RT-PCR检测为阳性的样品处理后接种PK-15细胞并盲传至第12代,结果在盲传2代之后的细胞培养物中均可检测到猪瘟病毒（CSFV）E2基因。经浓缩、纯化的病毒在电镜下呈约25nm典型的CSFV病毒粒子,将其命名为GSLZ株。对E2基因核苷酸序列的分析显示,该分离株与标准参考毒株以及国内外分离株的同源性为83.1%～99.8%...
作者：周朝伟 林方军 刘遥鹏 胡海平 刘晓凤 张兴栋 刘涛 李洋 李志琼 刊期：2011年第02期
从鲫鱼的肠道内提取总RNA,运用RT-PCR扩增ghrelin基因并测序,用生物信息学软件预测其结构,并构建系统进化树,探讨了鲫鱼ghrelin基因的生物学功能,为进一步研究该基因对鲫鱼摄食的影响奠定基础。结果显示,获得了长490bp的ghrelin基因（GenBank登录号为HM567312）,其序列含有1个312bp的完整开放阅读框,编码103个氨基酸;ghrelin蛋白分子质量为11 51...
作者：朱海波 李国清 张萍 李结 李金平 蔺智兵 刊期：2011年第02期
为了对广东首株犬源贾第虫进行分离鉴定,采用常规方法分离犬粪便中的贾第虫包囊,通过显微镜观察对其进行形态学鉴定,并以小亚基核糖体RNA（16SrRNA）基因和谷氨酸脱氢酶（gdh）基因作为遗传标记,采用PCR方法对其进行了扩增、克隆、序列测定和分析。将扩增序列与GenBank中登录的参考序列进行比对,并用DNAStar软件建立系统进化树,以确定该贾第虫的...
作者：邵小雪 周双海 谢俊岭 冉多良 刊期：2011年第02期
为了构建猪圆环病毒1型（PCV1）感染性DNA克隆,并为PCV1基因突变体的构建及PCV2的相关研究奠定基础,采用PCR方法从PCV1质粒中扩增出了PCV1全基因组片段,将其插入到pBluescriptⅡSK（＋）载体中,构建了单拷贝PCV1DNA克隆,并进一步构建了双拷贝PCV1DNA克隆;将双拷贝PCV1DNA克隆转染入PK-15细胞以获得拯救病毒,并初步测定了拯救病毒在体外细胞培养...
作者：危艳武 刘长明 范培虎 吴洪丽 温士刚 刊期：2011年第02期
从临床病例中分离到1株高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）变异株HBR,经细胞传代和蚀斑克隆获得了1株增殖性能稳定的传代毒株。为了检测该毒株在Marc-145细胞传代过程中毒力的变化,用PRRSV-HBR株第125代培养物（毒价为107.5 TCID50/mL）经肌肉注射和滴鼻途径接种18头35日龄PRRSV抗体阴性猪,同时设未接种对照组。结果试验猪未出现明显的临...
作者：王雪敏 王皓婷 邱亚峰 史子学 魏建超 邵东华 王志亮 马志永 刊期：2011年第02期
将目的基因NP亚克隆入原核表达质粒pET-28（a）中,构建了重组表达载体pET-28（a）-S-NP,然后用重组质粒转化BL21（DE3）感受态细菌,并利用IPTG诱导蛋白表达。将表达的蛋白利用His-Band Ni＋柱进行亲和层析纯化,Western-blot鉴定表达蛋白。结果显示,重组质粒经双酶切后可得到与目的片段长度相同的特异性条带;测序结果显示此特异性条带与参考序列...
作者：刘媛 左玉柱 范京惠 刊期：2011年第02期
从河北省部分地区病猪中分离大肠杆菌,根据GenBank中登录的大肠杆菌不耐热肠毒素B亚基（LTB）基因序列,设计了1对引物,采用PCR技术扩增LTB的编码基因,得到一条375bp的片段。将其连入Simple-T载体中,经酶切、PCR及序列测定法进行鉴定。测序正确后,将该基因插入到pET-28a（＋）载体中构建原核表达载体,将此重组质粒转化到Rosetta（DE3）感受态细胞...
作者：牟静 杨应东 杨光友 王颖旺 安晓雪 阳爱国 古小彬 韦雷飞 文建国 王淑贤 边尧 刊期：2011年第02期
为分析多头带绦虫Tm45W重组蛋白的免疫原性,利用RT-PCR技术首次从激活的多头带绦虫六钩蚴中扩增出多头带绦虫Tm45W基因。将扩增产物重组于原核表达载体pET32a（＋）中,构建pET32a-Tm45W表达载体,转化至大肠杆菌BL21（DE3）中,经IPTG诱导表达融合蛋白;表达产物进行SDS-PAGE和Western-blot分析后,将纯化的Tm45W重组蛋白免疫小鼠,用ELISA检测其血清...
作者：范鑫 郝永清 张爱荣 史冬艳 陈晓杰 刊期：2011年第02期
采用PCR方法对编码金黄色葡萄球菌纤黏蛋白B的D区和纤黏蛋白原凝集素A的A区基因片段进行了特异性扩增,并通过重叠延伸PCR扩增了FnBPB-ClFA串联基因,构建了克隆质粒pMD19-FnB-PB-ClFA。将该基因片段定向插入到原核表达载体pET-32a（＋）中,构建了表达质粒pET-FnBPB-ClFA,并将其转入宿主菌BL21（DE3）。SDS-PAGE分析表明,在1mmol/L IPTG诱导下,在5...
作者：黄良宗 王淑敏 马春全 张桂红 顾万军 刊期：2011年第02期
为了评价高致病性猪繁殖与呼吸综合征弱毒疫苗（JXA1-R）对仔猪超前免疫的免疫效果及安全性,给3头巴马香猪超前免疫弱毒疫苗JXA1-R 1头份/头,以3头同窝仔猪为对照组,接种等量疫苗稀释液,观察疫苗免疫后的临床表现,测定疫苗免疫后的抗体动态变化及排毒情况;免疫后第35天,采用高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒（JXA1）攻毒,测定攻毒后的抗体变化、...
作者：王建科 程世鹏 易立 杨莘 罗彬 许红丽 闫喜军 武华 刊期：2011年第02期
以抗水貂肠炎病毒（mink enteritis virus,MEV）单克隆抗体为捕获抗体、兔抗MEV多克隆抗体为检测抗体,建立了MEV双抗体夹心ELISA检测方法。该方法用于MEV抗原的检测。经过试验,单克隆抗体的最适稀释度为1∶20,兔抗MEV多克隆抗体的最适稀释度为1∶3 200。用该ELISA方法分别检测MEV、水貂阿留申病病毒、犬瘟热病毒样品。结果表明,ELISA方法具有良...
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