作者:李汇森; 刘国良 期刊:《实用糖尿病》 2020年第01期
先天性甲状腺功能减退症,部分是基因异常所致,致甲状腺发育不全,严重的无甲状腺细胞,在甲状腺细胞分化的早期,和大鼠胚胎期8. 5天和人类胚胎期32天,甲状腺原基上出现的内胚层细胞,被认为是滤泡细胞前体,滤泡细胞前体的分子标志是4个转录因子的共表达,HHEX,Titf1/Nkx 2-1,Pax 8,Foxel[1],这4个转录分子将滤泡细胞前体从原咽中的其他细胞分离出来。
细胞分离 一般来说病毒尺寸为80~100纳米,细菌几百纳米,细胞尺寸更大,而纳米包覆体尺寸约30纳米.由于纳米复合体性能稳定,一般不与胶体溶液和生物溶液反应,因此用纳米技术进行细胞分离在医疗临床诊断上有广阔的应用前景.目前生物芯片材料已成功运用于单细胞分离、基因突变分析、基因扩增与免疫分析(如,在癌症等临床诊断中作为细胞内部信号的传感器).最近伦敦的儿科医院、挪威工科大学和美国喷气推进实验室利用纳米磁性粒子成功地...
作者:汪水平; 王文娟; 谭支良 期刊:《家畜生态学报》 2006年第02期
反刍动物瘤胃上皮由基底层、棘层、粒层和角质层等四层组成,在瘤胃发酵终产物的代谢中具有重要作用,但其形态学受动物本身及饲喂制度等诸多因素的影响,造成细胞代谢活性上的差异。现在,应用离体瘤胃上皮细胞,使研究其组织形态学和代谢成为可能。
作者:宋荣景; 司霞; 陈月; 冯婉玉 期刊:《精准医学》 2018年第06期
目的 探讨一种改良的简易灌注分离小鼠肝细胞的方法。方法 采用改良的简易两步灌注法分离小鼠肝细胞,即使用连有头皮针的注射器进行肝门静脉插管并灌流冲洗,再用Ⅳ型胶原酶灌流消化;分离肝细胞后采用室温静止法进行纯化;利用锥虫蓝染色法鉴定细胞存活率;培养板预先用鼠尾胶原铺备,利用倒置显微镜观察细胞形态;细胞贴壁后1~10d检测培养液上清液中的白蛋白的分泌情况,判断肝细胞的生物学活性和功能。结果成功建立了一种简单易行的分...
作者:王影; 孙红; 范乐明; 周峰 期刊:《徐州医科大学学报》 2005年第05期
目的建立稳定的成年大鼠心肌细胞分离和培养方法,以便进行成年大鼠心肌细胞收缩功能的研究.方法将成年大鼠心脏挂于Langendorff装置上灌流,胶原酶消化分离成年大鼠心肌,无血清悬浮培养心肌细胞.光镜观察,结合形态学和收缩功能评价心肌细胞.结果新分离的心肌细胞的收获量为(4~6)×106个,杆状和圆形,其中长杆状细胞大于75%,横纹清晰,收缩幅度(12.00±2.68)%.无血清培养24h后,细胞保持完整的形态结构,长杆状心肌细胞占总数的70%以上,收...
作者:徐尤年; 刘桂林; 蒙臣; 张诗海 期刊:《中国全科医学》 2016年第03期
目的通过与传统的腹腔巨噬细胞提取方法——轻揉法进行比较,建立一种高效提取小鼠腹腔巨噬细胞体外分离培养的方法——快速振荡法。方法 2014年11月选取雄性健康SPF级C57b1/6小鼠20只,采用随机数字表法分为轻揉组和振荡组,各10只。分别采用传统的腹部轻揉法和快速振荡法提取小鼠腹腔巨噬细胞。流式细胞仪检测巨噬细胞凋亡率,计算细胞总数及巨噬细胞总数。结果两组小鼠体质量和腹腔灌洗液回收率比较,差异无统计学意义(P〉0.05)。...
作者:洪伦; 雷海波; 唐岸柳; 沈守荣 期刊:《中国医药导报》 2011年第12期
目的:探讨一种简便、高产的大鼠肝星状细胞(HSC)分离方法,为研究肝细胞相关实验提供细胞原材料。方法:应用悬浮缓冲液校正Nycodenz密度梯度分离液,使其浓度为11.3%(w/v),采用单层一步梯度离心法分离HSC。采用台盼蓝染色排斥法鉴定细胞活率,desmin免疫细胞化学染色法鉴定HSCs纯度。结果:肝星状细胞得率每只大鼠约(4.0±0.5)×10^7个,细胞活力达到90%,细胞纯度达到95%。结论:本法简便、高产,是一种理想的分离...
味蕾是味感觉器官.在哺乳动物中味蕾主要分布在舌上皮中.味蕾中存在基细胞、亮细胞、暗细胞和中间细胞四种类型,蕾内神经纤维和蕾周神经纤维共同支配味蕾.利用免疫组织化学技术,能在功能上对味细胞和味觉神经纤维进行分类和鉴定.味蕾组织染色方法在舌面拓扑学和味觉系统发育研究中起着重要作用.分离出单个的味蕾细胞是研究受体细胞传导味觉机理的手段.味蕾组织培养对于研究味觉神经支配提供了有效的模型.文章介绍了味觉细胞生物学...
作者:郑鑫; 梁海涛; 杨连玉; 李家奎; 杨文艳; 王哲 期刊:《中国兽医学报》 2004年第06期
采用剪切消化法,对猪肝细胞进行了分离和原代培养.结果显示:分离的肝细胞即时存活率为93.4%,培养存活率为87.6%,并观测了肝细胞体外的生长形态和增殖规律,摸索了建立猪原代肝细胞体外培养模型的条件,为在细胞水平研究猪的营养代谢提供了方法和技术保障.
作者:陈兴; 崔大付; 刘长春; 苏波; 王海宁 期刊:《仪表技术与传感器》 2005年第02期
基于微电子机械系统(MEMS)技术的样品预处理生物芯片是一种微型化的生物样品预处理器,它具有体积小、试剂消耗少、处理速度快、可实现集成自动化等优点,成为微全分析系统(μ-TAS)研究的热点和难点.综述了基于MEMS技术的3类具有不同功能的样品预处理生物芯片,介绍了样品预处理芯片的原理、结构、分类及应用,并探讨了其发展趋势.
作者:张威; 周莉; 金惠铭; 曲晓义; 张国平; 殷莲华; 朱大年 期刊:《中国病理生理》 2005年第09期
作者:何文; 吕杰; 李涛; 文艳飞; 韩婵林; 蔡柳洪 期刊:《中国病理生理》 2018年第02期
目的:建立有效分离、提纯及培养人卵丘颗粒细胞的方法,并与人壁层颗粒细胞的体外培养相比较。方法:收集卵胞浆内单精子显微注射取卵时的卵泡液和直接机械分离卵母细胞所得的卵丘颗粒细胞复合物,直接将卵丘颗粒细胞复合物接种于培养皿中培养。用密度梯度离心法分离卵泡液中的人壁层颗粒细胞。用免疫荧光法检测卵泡刺激素受体(follicle stimulating hormone receptor,FSHR)的表达;用CCK-8法检测细胞生长曲线;用ELISA检测这2种颗...
作者:王勇平; 朱兆金; 徐向阳 期刊:《中国组织工程研究》 2017年第28期
背景:课题组在前期研究的基础上,体外分离、培养及鉴定新西兰大白兔距骨软骨细胞。目的:探讨新西兰大白兔距骨软骨细胞体外分离、培养及鉴定的实验方法。方法:课题组采用单纯Ⅱ型胶原酶消化法体外分离新西兰大白兔距骨软骨细胞,进行体外培养,通过形态学观察、甲苯胺蓝染色和Ⅱ型胶原蛋白免疫细胞化学染色对软骨细胞进行鉴定。结果与结论:①倒置相差显微镜观察3代以内新西兰大白兔距骨软骨细胞呈多角形或三角形,核为圆形或...
作者:张玉华; 郑德宇; 秦书俭 期刊:《中国组织工程研究》 2004年第11期
大面积骨缺损与骨不连等疾病一直是困扰临床骨科的难题,骨组织工程的提出为其治疗提供了一种可行的方法.种子细胞是骨组织工程的核心与基础,一直是人们普遍关注的热点.目前的种子细胞包括成骨细胞,骨细胞,骨膜成骨细胞,骨髓基质细胞等.其中骨髓基质细胞被公认为是一较理想的种子细胞:获取方便,来源较广泛,对供体损伤较小,体外培养技术成熟,细胞增殖较快,而且可以作为一些成骨因子基因转染的靶细胞.骨髓基质细胞、基质支架和/或成骨...
作者:曾润铭; 刘梦璋; 林菁 期刊:《中国组织工程研究》 2005年第18期
目的:探讨吲哚美辛、雷公藤多甙、甲氨蝶呤、地塞米松4种常用抗类风湿性药物对成纤维样滑膜细胞体外增殖的影响,为类风湿性关节炎患者临床用药,改善其功能提供依据.方法:实验于2003-05/2004-02在的第一军医大学细胞生物实验室完成.类风湿性关节炎及正常滑膜组织,分别来源于第一军医大学南方医院脊柱骨病科和汕头市第二人民医院外二科因类风湿性关节炎而行全膝关节置换术或经关节镜滑膜切除术的患者和无关节炎病史的创伤性截肢患者,...
作者:徐莹; 张定棋; 慕永平; 陈佳美; 王清兰; 平键; 刘伟; 刘平 期刊:《中国组织工程研究》 2018年第21期
背景:由于小鼠肝脏小、血管较细,其原代肝星状细胞分离的难度相对较大,且得率有限,难以满足体外实验需求。目的:建立小鼠原代肝星状细胞高效稳定的分离方法,提高小鼠原代肝星状细胞的得率与纯度,为研究肝纤维化的机制奠定实验基础。方法:取成年雄性C57BL/6小鼠,以无钙镁离子的前灌流液经门静脉充分灌注肝脏,再先后以1 g/L链霉蛋白酶和0.7 g/L Ⅳ型胶原酶灌注,使用Nycodenz进行梯度密度离心,获取中间层原代肝星状细胞,...
作者:宋巍; 胡吟燕; 郭维; 郑贵亮; 翟所强 期刊:《中国组织工程研究》 2005年第21期
目的:探讨利用酶消化和机械解剖相结合方法分离新生大鼠耳蜗上皮细胞层的方法.方法:实验于2003-02/06在解放军总医院耳鼻咽喉科研究所进行.取新出生SD大鼠耳蜗基底膜后,将其放入含有嗜热菌蛋白酶的D-Hank溶液中,37℃孵箱孵育25 min进行酶消化,然后在高倍显微镜下应用自制的超细钨丝刀进行显微机械分离.对分离的耳蜗上皮细胞层进行半薄切片硼砂甲苯胺蓝染色与耳蜗冰冻切片苏木精-伊红染色进行形态对比.结果:①分离后的耳蜗基底膜上...
作者:刘通; 于佳妮; 陈玉佩; 陈欢; 邹德辉; 晏珺; 卢宗孝; 刘悦; 张莉; 霍则军 期刊:《中国组织工程研究》 2018年第25期
背景:多裂肌的损伤、萎缩是临床各种腰背痛及功能障碍的主要来源之一,肌卫星细胞是肌肉干细胞,对肌肉的损伤修复起至关重要的作用。但目前尚缺少有关多裂肌卫星细胞分离培养方面的研究。目的:采用单根肌纤维法分离大鼠多裂肌卫星细胞并进行鉴定。方法:在体分离大鼠多裂肌,采用单根肌纤维法获得多裂肌卫星细胞,经反复差速贴壁法纯化,观察其形态变化并绘制细胞增殖曲线;以分化培养基进行诱导,观察其成肌分化情况;并采用免疫荧光法鉴...
作者:张年春; 杨志焕; 邓志龙 期刊:《中国组织工程研究》 2004年第17期
目的:探讨兔肌源性干细胞的分离、鉴定和诱导分化的方法.方法:取2月龄幼兔臀肌1 g,采用胶原酶,dispase,胰蛋白酶分步消化,针头过滤,差速贴壁法分离肌源性细胞.用锥虫蓝染色细胞计数描记生长曲线,MTF法间接反映细胞增殖活性.作Bcl-2,Desmin免疫细胞化学染色鉴定肌源性细胞.用分化培养基(DMEM+5 mL/L FBS+50 mL/LHS+10 mg/L BMP2+5 g/L维生素C+10 mmol/L β-甘油磷酸钠+10mg/L地塞米松+10g/L青霉素/链霉素)诱导细胞分化,用Osteocalcin...
作者:段建钢; 王凡; 陈道邦; 陈红; 项涛 期刊:《解剖学》 2004年第02期
近年研究发现,哺乳动物无论在胚胎发育期还是在成年,其中枢神经系统内都存在具有自我增殖和多向分化潜能的神经干细胞[1~3],这一发现为神经损伤修复的研究提供了一条新思路.分离培养神经干细胞,并在体外稳定的增殖与分化,为研究神经干细胞的增殖、分化特性、干细胞移植以及建立细胞系等,提供了细胞来源和保证.