摘要：背景：课题组在前期研究的基础上，体外分离、培养及鉴定新西兰大白兔距骨软骨细胞。目的：探讨新西兰大白兔距骨软骨细胞体外分离、培养及鉴定的实验方法。方法：课题组采用单纯Ⅱ型胶原酶消化法体外分离新西兰大白兔距骨软骨细胞，进行体外培养，通过形态学观察、甲苯胺蓝染色和Ⅱ型胶原蛋白免疫细胞化学染色对软骨细胞进行鉴定。结果与结论：①倒置相差显微镜观察3代以内新西兰大白兔距骨软骨细胞呈多角形或三角形，核为圆形或椭圆形；②甲苯胺蓝染色可见新西兰大白兔距骨软骨细胞呈紫蓝色，细胞基质呈蓝色；③Ⅱ型胶原蛋白免疫细胞化学染色可见新西兰大白兔距骨软骨细胞胞浆及胞膜出现棕黄色颗粒；④实验成功建立了新西兰大白兔距骨软骨细胞体外分离、培养及鉴定体系；实验结果提示3代以内软骨细胞生长良好，保持软骨细胞稳定的生物学特征。

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