作者:刘占悝; 刘泽余; 李智杰; 孙飞雁; 郭利 期刊:《中国兽医科学》 2020年第02期
为了检测牛传染性鼻气管炎病毒,本研究建立了牛传染性鼻气管炎病毒SYBR Green I实时荧光定量PCR检测方法。通过设计特异性引物扩增病毒基因,将扩增的目的片段(119 bp)连接到pMD19-T载体中,构建重组质粒。将重组质粒作为阳性标准品,用于SYBR Green I实时荧光定量PCR检测方法的建立。结果显示,特异性引物扩增的目的片段约为119 bp,符合预期的大小,经测序鉴定所扩增的目的片段正确。敏感性结果显示,用该方法检测阳性质粒标准品的最低...
作者:李汉生; 孙刚; 陈晓慧; 姚德恒; 林玉玲; 赖钟雄 期刊:《西北植物学报》 2019年第12期
关于蓝光对龙眼胚性愈伤组织miRNA组学研究中发现大量响应蓝光的miRNAs,挑选关键且差异表达的miR396a-3p2和miR396b-5p进行分子进化特性分析,以进一步明确它们在龙眼响应蓝光过程中的作用。该研究对前体和成熟体进化树、前体二级结构、启动子顺式作用元件、靶基因预测及其响应蓝光表达模式等进行分析。结果表明:(1)由5p臂上形成的miR396成熟体序列保守性较高,由3p臂上形成的miR396成熟体序列特异性较大;茎序列的保守性高于环序列,5...
作者:苏建淳; 张国义; 卢秋霞; 全强 期刊:《陕西医学》 2020年第02期
作者:李娟; 孔冉冉; 梅月菊; 张福生; 田洪岭; 秦雪梅; 杜晨晖; 马存根 期刊:《中草药》 2019年第24期
目的筛选适用于不同生长年限和不同部位的栽培远志实时荧光定量PCR分析(quantitative real time PCR,qRT-PCR)的稳定内参基因,为远志体内各个基因表达分析提供合适内参基因。并对4个细胞色素P450单加氧酶(cytochrome P450 monooxygenase,P450s)基因在上述远志样品中的差异表达进行分析,明确4个P450s基因在栽培远志中的时空表达分布。方法通过qRT-PCR获取Tubulin 1、Tubulin 2、Elongation 1、Elongation 2、Actin 1、Actin 2、GAPD...
作者:康俊梅; 张俏燕; 蒋旭; 王珍; 张铁军; 龙瑞才; 崔会婷; 杨青川 期刊:《中国农业科学》 2020年第02期
【目的】鲨烯环氧酶(squalene epoxidases,SQE)是苜蓿皂甙合成途径中的一种限速酶,与苜蓿皂甙的合成密切相关。通过对苜蓿鲨烯环氧酶(MsSQE1)基因的克隆及在苜蓿中过表达,探究鲨烯环氧酶对皂甙合成的作用机制。【方法】以模式植物蒺藜苜蓿鲨烯环氧酶基因序列设计引物,同源克隆苜蓿MsSQE1。对MsSQE1进行生物信息学分析;通过基因枪轰击技术,使MsSQE1在洋葱表皮瞬时表达,进行亚细胞定位。利用qRT-PCR方法分析该基因在根、茎、叶中的表...
作者:熊业城; 曹修凯; 贺花; 宋林霏; 黄橙; 党李苹; 张晋媛; 雷初朝; 陈宏; 祁兴磊; 黄永震 期刊:《中国牛业科学》 2016年第04期
作者:曾祥建; 李广为; 万芙蓉; 冯建华 期刊:《广东医科大学学报》 2016年第06期
目的观察微小RNA(microRNA)-193a-3p在前列腺癌患者癌组织及血清中表达。方法采用实时荧光定量PCR检测32例前列腺癌患者血清、癌组织、癌旁组织及20例健康人血清中microRNA-193a-3p表达。结果前列腺癌患者血清中microRNA-193a-3p表达明显低于正常对照[(0.58±0.11)vs(1.06±0.14),P〈0.05],且癌组织中microRNA-193a-3p表达明显低于癌旁组织[(0.35±0.07)vs(1.03±0.13),P〈0.01]。结论 microRNA-193a-3p可能是前列腺癌的潜在...
作者:张良一; 张硕; 刘洋; 蒋菲; 连红岩; 李翔; 刘玉良; 宋晓晖; 王传; 顾小雪 期刊:《中国家禽》 2019年第23期
研究旨在建立一种适用于鸡传染性贫血病毒(CIAV)检测的荧光定量PCR技术。制备含有CIAV-Y43株目的片段的DNA作为标准品,10倍比稀释后建立标准曲线,测定敏感性。同时采用标准品对该方法的批内和批间重复性进行检测,并对多种病毒进行特异性检测。结果显示:建立的荧光定量PCR方法能在CIAV-Y43毒株DNA样本中检出荧光信号,最低检出量为10~1拷贝/μL,线性范围达9个数量级;该方法重复性良好,批内重复试验结果变异系数小于1%,批间变异系数平...
作者:高世武; 傅志伟; 陈云; 林兆里; 许莉萍; 郭晋隆 期刊:《作物学报》 2020年第02期
金属硫蛋白是一类富含巯基的低分子量蛋白,在植物的重金属解毒及细胞氧化还原调控等方面起重要的作用。本研究以甘蔗热带种Badila组培苗为材料,分别测定了其在CdCl2、ZnSO4和CuCl2水溶液培养条件下地上部和地下部的重金属含量,结果显示其对上述3种重金属有较强的耐受与富集能力。继而克隆了ScMT1(登录号为KJ504373)、ScMT2-1-5(登录号为MH191346)和ScMT3(登录号为KJ5043704)3个金属硫蛋白家族基因,它们分别属于植物MT亚家族中的MT1...
作者:杨阳; 戴小华; 许行浩; 赵树林; 孙小燕; 余万里; 阿迪莱·艾力; 赵红琼 期刊:《动物医学进展》 2019年第12期
作者:潘红; 赖呈纯; 张静; 黄贤贵; 林玉玲; 赖钟雄 期刊:《应用与环境生物学报》 2019年第06期
不同光质对刺葡萄红色愈伤组织(DLR)花青素的积累以及细胞生长具有重要影响.利用RT-qPCR进行不同光质培养的刺葡萄红色愈伤组织功能基因的表达分析,筛选适用于不同光质下RT-qPCR分析的内参基因.以9种光质(黑暗、白光、红光、黄光、蓝光、绿光、紫光、暖白光、暖黄光)下培养获得的刺葡萄红色愈伤组织为材料,对10个葡萄中常用的内参基因进行RT-qPCR分析.结果显示,geNorm、Normfinder、BestKeeper等3个内参分析软件因算法不同,内参稳...
作者:刘雪杰; 周文娟; 马群飞; 陈伟伟 期刊:《海峡预防医学》 2019年第05期
目的对福州市某综合医院疑似食源性腹泻病人粪便样本进行诺如病毒检测,了解其感染情况与流行特征。方法采集腹泻病人粪便样本,磷酸盐缓冲液处理后用试剂盒提取病毒核酸,用实时荧光定量PCR的方法检测。结果某医院2015年9月至2018年12月,共采集412份样本,诺如病毒检出率为16.8%(69/412),2015年为27.9%(17/61)、2016年为15.7%(14/89)、2017年为16.0%(23/144)、2018年为12.7%(15/118);各组诺如病毒检出率:GⅠ组为4.1%(17/412))、GⅡ组...
作者:万李萍; 李艳; 朱洪松 期刊:《医药论坛》 2019年第11期
作者:戴陈伟; 童琳; 武昌俊; 许勇; 李舜; 朱倩云; 蔡标 期刊:《食品安全质量检测学报》 2019年第23期
目的建立实时荧光定量PCR法快速检测志贺氏菌。方法提取志贺氏菌基因组为模板扩增virA基因片段,将目的片段连接至pMD19-T载体得到重组质粒,转化大肠杆菌DH5α感受态细胞,验证所得到的重组质粒,以紫外分光光度计测量重组质粒吸光度值A260,并换算为质粒拷贝数后作梯度稀释得到不同浓度的质粒标准品;进行荧光定量PCR分析并通过特异性、灵敏性实验以验证该方法的可行性。结果重组质粒标准品浓度在103~108 copies/μL范围内线性关系良好(r...
作者:赖呈纯; 潘红; 张静; 王琦; 高慧颖; 陈源; 黄贤贵 期刊:《江西农业大学学报》 2019年第05期
摘心处理是保证葡萄产量和品质的关键栽培技术之一,选择稳定可靠的内参基因,有利于葡萄摘心响应分子机制相关基因表达的研究。本研究以不同摘心处理的葡萄叶片和茎杆为材料,利用qRT-PCR分析15个候选内参基因Actin、AP-2、Cyclophilin、EF1-α、GAPDH、VAG、SAND、α-Tubulin、β-Tubulin、UBQ-L40、NAD5、ADH2、60SRP、18S rRNA、UBQ等在所供材料中的转录水平,并用RefFinder软件对候选内参基因稳定性进行综合评价。试验结果表明,葡萄...
作者:刘枘岢; 光; 李雯翀; 周敏华 期刊:《实用医学》 2019年第20期
作者:邱庆庆; 袁翔; 黄光华; 蒋钦杨; 杨秀荣; 姜建萍; 蒋和生 期刊:《黑龙江畜牧兽医》 2019年第19期
作者:郭妍婷; 田瑞鑫; 李胜男; 胡新艳; 李祯; 陈俊贞; 赵新艳; 冉多良; 姚刚; 付强; 史慧君 期刊:《黑龙江畜牧兽医》 2019年第24期
为了建立一种基于牛病毒性腹泻病毒(Bovine viral diarrhea virus,BVDV)囊膜蛋白E0基因的实时荧光定量PCR检测方法,试验根据GenBank数据库中BVDV E0基因序列设计特异性引物,扩增BVDV新疆塔城分离株TC株的E0基因并克隆至pBM23载体中并测序鉴定;根据测序结果对E0基因的基本理化性质、B细胞抗原表位、二级结构、三级结构等进行生物信息学分析;以pBM23-E0为标准质粒,10倍梯度稀释后建立实时荧光定量PCR标准曲线。结果表明:BVDV TC株E0...
作者:张燕玉; 韩卓然; 孙敬锋; 吕爱军; 胡秀彩; 刘军锋 期刊:《南方农业学报》 2019年第10期
作者:塔依尔江·麦麦提; 苏比奴尔·艾力; 布威海丽且姆·阿巴拜科日; 佐日古丽·伊斯马伊力; 阿迪力·艾合麦提; 伊拉木江·托合塔洪; 马合木提·哈力克 期刊:《动物学》 2019年第05期
为了分析塔里木马鹿(Cervus elaphus yarkandensis)维生素D受体(VDR)基因的结构和相关功能,本研究从前期研究获得的塔里木马鹿和天山马鹿(C. e. songaricus)皮肤组织转录组测序结果中,获得上调表达的塔里木马鹿VDR基因的序列,对塔里木马鹿VDR基因进行实时荧光定量PCR(qPCR)验证,利用相关软件进行同源性比对、系统进化树构建和生物信息学分析。实时荧光定量PCR结果显示,VDR基因在转录组测序的结果与qPCR的结果中表达趋势一致,均为上...