作者:范六民; 梁前进; 王健; 李宏俊 期刊:《生物学通报》 2012年第11期
细胞生物学 1下面Westernblot蛋白印迹显示5个参与生长激素调节的细胞信号通路的蛋白信号分子(a~e)的迁移距离。(2.7分)
作者:李卓; 许志坚; 叶木石; 洪伟平 期刊:《广东医科大学学报》 2010年第03期
目的检测neprilysin(NEP)在前列腺癌细胞系和组织中的表达。方法用实时荧光定量PCR、western blot检测前列腺癌细胞系(LNCaP、PC-3)、39例前列腺癌和16例正常前列腺组织中NEP mRNA和蛋白表达。结果与正常组织相比,LNCaP及PC-3细胞中NEP mRNA表达下调,尤以LNCaP细胞更为显著;在经甲基化抑制剂作用后,PC-3细胞NEP mRNA恢复表达的程度明显高于LNCaP细胞。前列腺癌组织中NEP mRNA和蛋白表达均明显低于正常前列腺。结论 NEP表达下调...
作者:吴茂旺; 徐祥; 李剑波 期刊:《中国法医学》 2019年第05期
目的探讨运用免疫组化方法检测c-jun蛋白在脑组织中表达部位差异性推断颅脑损伤致伤方式可行性。方法采用液压冲击方法和单摆式打击方法分别建造直线加速与旋转加速大鼠闭合性颅脑损伤模型。100只SD大鼠随机分为直线加速损伤组、旋转加速损伤组及假手术组和对照组。用免疫组织化学技术(SABC)方法检测大鼠在伤后30min、1h、3h、6h及12h时间窗口期不同部位脑组织c-jun蛋白表达规律,所得数据经SPSS16.0统计软件处理。并采用蛋白印迹(W...
作者:周光现; 常馨月; 阚靖博; 张恩平 期刊:《家畜生态学报》 2012年第03期
试验旨在通过基因工程方法获得重组肌肉生长抑制素蛋白。提取秦川牛的骨骼肌总RNA,根据基因库中海福特牛肌肉生长抑制素基因序列设计合成特异性引物,引物两端分别加上BamHI和XhoI酶切位点及保护碱基,用RT—PCR方法扩增肌肉生长抑制素全长基因,并将其克隆到pMD18-T载体上,测序后经BamH工和X矗0工双酶切,将目的片段插入到PGEX-4T-1中,构建原核表达载体PGEX-4T-1-M,将重组表达质粒转化至Rosetta(DE3)中诱导表达。结果表明,...
作者:李桂霞; 高书亮; 赵凤鸣; 许冬青; 皮文霞; 徐德国; 周韬; 王明艳 期刊:《时珍国医国药》 2012年第06期
目的探讨山茱萸水提液体外对D-半乳糖致衰人胚肺成纤维细胞(MRC-5)的影响作用及机制。方法 MTT法观察山茱萸水提液对D-半乳糖致衰MRC-5细胞生长状况的影响;Western blot法观察山茱萸水提液对D-半乳糖致衰MRC-5细胞抗衰老通路P16,P21的影响;Telomere PNA Kit/FITC for Flow Cytometry法观察山茱萸水提液对MRC-5细胞端粒长度的影响。结果 MTT检测山茱萸水提液对D-半乳糖致衰MRC-5细胞有促进增殖作用;Western blot法检测,与对照组比...
作者:许淑芬; 刘磊; 方艳秋; 刘多; 倪志强; 候俊杰; 谭岩 期刊:《中国妇幼保健》 2013年第27期
目的:探讨胰岛素样生长因子结合蛋白2(IGFBP-2)在卵巢肿瘤组织中的表达及其与卵巢癌临床病理学特征的关系。方法:选择正常卵巢组织(10例)和卵巢肿瘤组织(卵巢良性肿瘤12例,卵巢交界性肿瘤10例,卵巢癌26例,包括中度和高度分化者12例,低度分化者14例),采用逆转录-聚合酶链反应(RT—PCR)方法检测卵巢组织IGFBP-2基因表达情况,Western blotting检测卵巢肿瘤组织IGFBP-2蛋白表达情况。结果:RT-PCR和Western blotting结...
作者:赵佳福; 许厚强; 宋书弦; 段志强; 陈祥 期刊:《生物技术通报》 2018年第11期
克隆获得BLM基因全长CDS区,研究其在细胞中的表达情况。从人前列腺癌PC3细胞中提取总RNA,反转录成cDNA,采用分段克隆的方法获得BLM全长CDS区,将其定向插入到原核表达载体pET-32a和真核表达载体pEGFP-N3,构建p ET-32a-BLM和p EGFP-N3-BLM。将获得的重组质粒转化BL21(DE3)感受态细胞或转染PC3细胞,通过SDS-PAGE、Western blotting、荧光定位观察等方法研究人BLM解旋酶在细胞中的表达或定位。BLM解旋酶的原核表达结果显示,不同IPTG浓...
作者:单文娟; 刘忠渊; 张馨玉; 张富春 期刊:《中国生物工程》 2004年第02期
本研究通过酵母Pichia pastoris表达鼠卵透明带3(mZP3)蛋白,获得控制害鼠生育研究的抗原物质。根据国际基因库已发表的mZP3基因序列设计引物,并分别在5’引物和3’引物中引入EcoRⅠ和XbaⅡ酶切位点。经PCR扩增,将mZP3克隆至穿梭质粒pGAPZaA上,获得的重组穿梭质粒pGAPZaA-mZP3经线性化后,采用LiCl法转入毕赤酵母SMD1168菌株中,Zeocin^+筛选阳性克隆,酵母发酵上清液进行SDS-PAGE和Western-blot检测,结果表明mZP3在酵母中得到...
作者:宁洪叶; 蒋贤高; 施伎蝉; 何贵清; 吴正兴 期刊:《中国预防医学》 2019年第07期
作者:杨静; 王明娟; 石晓虹; 齐洁敏 期刊:《临床与实验病理学》 2018年第02期
目的探讨c—IAPl蛋白和mRNA在胃腺癌组织中的表达及临床意义。方法采用免疫组化sP法、Western blot和qRT—PCR技术检测50例胃腺癌组织和40例癌旁正常胃黏膜组织中c—IAP1蛋白和mRNA的表达,分析其在胃腺癌发生、发展中的作用及与临床病理特征的关系。结果c—IAP1蛋白和mRNA在胃腺癌组织中的表达水平明显高于癌旁正常胃黏膜组织(P均〈0.05)。胃腺癌组织中c-IAP1蛋白和mRNA的表达与组织分化程度、TNM分期、淋巴结转移、浸润深度均...
作者:车祺; 蒋涛; 林伊凤; 李慧; 张农 期刊:《中华病理学》 2005年第07期
作者:王真奎; 姚丽芬; 程阅凤; 王秀洁 期刊:《卒中与神经疾病》 2009年第04期
目的研究连接蛋白32在颞叶癫痫患者病变海马组织中的表达,从而为癫痫的发病机制进一步提供理论依据。方法14例颞叶癫痫(伴海马硬化)患者手术切除的病变海马组织为癫痫组,8例因其他疾病死亡进行尸检者的正常海马组织为对照组,死者生前无癫痫发作,利用免疫组织化学与蛋白印迹检测(Western-blot)方法检测两组连接蛋白32的表达水平,并进行比较。结果应用免疫组织化学方法检测发现对照组连接蛋白32有比较低的水平表达,但在癫...
作者:康春生; 浦佩玉; 李捷; 王虎; 董伦; 王广秀; 张云亭; 全冠民 期刊:《中华神经外科》 2005年第05期
目的研究反义AKT2(antisense AKT2,AS-AKT2)cDNA对鼠脑胶质瘤细胞系C6的生长抑制作用.方法将AS-AKT2 cDNA构建体转染鼠脑胶质瘤细胞系C6,原位杂交和蛋白印迹鉴定后,应用PCNA阳性率和MTT法检测细胞增殖能力,TUNEL法计算凋亡指数.应用立体定向技术将C6细胞和转染反义AKT2 cDNA的C6细胞种植到SD大鼠的右侧尾状核作为对照组和转染组;并对颅内已经形成C6胶质瘤的大鼠进行脂质体包裹的AS-AKT2 cDNA和空载体治疗;MRI动态监测大鼠颅内肿瘤...
作者:杨玲; 申政磊; 佟力; 尹列芬; 杨曼; 辜学忠; 尚学琴 期刊:《白血病淋巴瘤》 2004年第03期
作者:张敏; 王金穗; 曹云山; 李妘; 朱任之 期刊:《实用癌症》 2005年第06期
目的检测膜联蛋白A1(Annexin A1)在正常乳腺组织、乳腺良性增生、癌前病变及乳腺癌中的表达,以探讨其表达差异同乳腺癌发生发展的相关性.方法应用免疫组织化学SABC方法和蛋白印迹检测乳腺正常组织、良性病变(纤维腺瘤)、癌前病变(乳腺囊性增生症)、非浸润性导管癌、浸润性导管癌中Annexin A1的表达情况.结果Annexin A1的染色评分在20例癌旁正常乳腺组织为1.5328±0.45603;在20例良性病变为1.3250±0.56928;在20例癌前病变为0.9125±0....
作者:孔虹; 黄志刚 期刊:《四川生理科学》 2004年第01期
作者通过转染细胞(ACC-m/nm23-H1)蛋白表达经免疫组化方法分析鉴定获得满意效果这一方法,将该法与蛋白印迹方法加以比较,并进行分析评价,重新认识到该法具有许多优势.
作者:刘国洲; 董娟; 孙莉 期刊:《安徽预防医学》 2019年第02期
目的了解艾滋病确证试验中确证标本和不确定标本的特征,分析确证标本、不确定标本的带型分布情况。方法收集2008~2017年市辖区各类检测机构艾滋病筛查实验室的艾滋病抗体初筛阳性样本,按《全国艾滋病检测技术规范》要求,使用蛋白印迹法(WB法)进行艾滋病抗体确证试验。结果十年期间,艾滋病初筛检测46145份标本,艾滋病抗体确证阳性1041份,阳性率为2.26%;抗体不确定为122份,2015年除外,不确定数逐年增加。各确证国产试剂的特异性和敏...
作者:刘全忠; 蒋岩 期刊:《中华皮肤科》 2004年第04期
人类免疫缺陷病毒(HIV)感染的标准检测方法是用免疫学方法检测HIV抗体.这种检测涉及两个步骤:先用酶免疫法(EIA)筛查(HIV-1/2),随后用特异性的蛋白印迹实验予以确定.目前,各国采用的HIV确认试验绝大多数是蛋白印迹.蛋白印迹试验中的特异性条带是HIV或HIV前病毒的各种成分引发的特异性免疫反应.
作者:王芸; 吕国栋; 薛娜; 张富春; 马纪 期刊:《细胞与分子免疫学》 2005年第06期
目的: 制备昆虫抗冻蛋白DAFP特异性的鼠抗血清.方法: 根据GenBank已发表的Dendroides canadensis抗冻蛋白基因序列(gi: 2737939),人工合成加拿大拟步甲虫(Dendroides canadensis)的抗冻蛋白基因(dafp),并克隆到原核表达载体pGEX- 4T-1和pMAL-p2x中,在大肠杆菌中进行表达.表达的融合蛋白经Glutathione Sepharose 4B纯化后,免疫小鼠制备抗DAFP的抗血清,抗体的效价及特异性分别采用ELISA和Western blot 进行检测.结果: SDS-PAGE检测表...
作者:范奎奎; 李强; 杨文雅; 潘登; 李海军; 杜晨光 期刊:《畜牧兽医学报》 2018年第04期
旨在探究Western blot检测低丰度蛋白表达及试验过程对检测结果的影响。本试验以6~8周龄C57/BL6小鼠背肩甲棕色脂肪组织(Brown adipose tissue,BAT)为试验材料,以低丰度表达的黑皮质素4型受体(Melanocortin-4-receptor,MC4R)为检测蛋白,不同蛋白处理方法及电转膜液的组分、pH为试验对照条件,探究蛋白提取方法、电转液的组分与pH对转膜效率的影响。结果显示,转膜初始电压及功率与转膜液中十二烷基磺酸钠(SDS)含量及pH极显著相...