首页 期刊 临床医药实践 慢性髓性白血病bcr/abl融合基因的克隆与表达 【正文】

慢性髓性白血病bcr/abl融合基因的克隆与表达

作者:周永安; 张景萍 山西省儿童医院; 山西太原030013; 太原市中心医院; 山西太原030001
慢性髓性白血病   克隆   鉴定  

摘要:目的:克隆bcr/abl融合基因融合位点基因片段。方法:以慢性粒细胞白血病(CML)K562细胞株总RNA作为模板,采用RT—PCR方法扩增包含Bcr/abl(b3a2)融合位点基因片段。将RT—PCR物按正确的阅读框架,定向克隆到pEGFP—N3的下游,将重组质粒转化大肠杆JM109大肠杆菌,用PCR初筛,将PCR扩增阳性的重组子用EcoR Ⅰ和BamH Ⅰ双酶切鉴定,并进行序列的测定。结果:扩增出470bp的Bcr/abl融合位点基因片段,构建重组质粒pEGFP—bcr/abl,酶切产物的大小分别与预期相符。结论:成功地扩增bcr/abl融合位点基因片段及构建真核表达重组质粒pEGFP—bcr/abl,为在体外表达重组bcr/abl蛋白奠定基础。

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