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SARS冠状病毒BJ01株基因组全长cDNA的构建与鉴定

作者：赵卓; 韩剑峰; 陈水平; 秦成峰; 姜涛; 于曼; 何维明; 秦鄂德 刊期：2005年第01期

目的:构建我国自行分离的SARS冠状病毒BJ01株基因组全长cDNA分子,为阐明SARS病毒致病的分子机制奠定基础.方法:采用分段克隆的方法对病毒全基因组进行分段扩增和克隆,然后将全基因组各cDN段分别进行体外连接获得全长cDNA分子,并对其接头序列进行PCR扩增和测序鉴定.结果与结论:获得了SARS病毒BJ01株基因组全长cDNA分子,对其接头处序列的测定结果...

密码子优化和蛋白加强免疫对SARS-CoV N基因重组质粒免疫原性的影响

作者：姜涛; 陈水平; 于曼; 赵慧; 秦成峰; 段鸿元; 秦鄂德 刊期：2005年第01期

目的:观察密码子优化的SARS-CoV N基因的重组质粒,以及DNA初始免疫-蛋白加强免疫方式诱导小鼠的体液免疫应答水平,探讨提高SARS-CoV DNA免疫原性的途径.方法:SARS-CoV BJ01株N基因和密码子优化N基因分别通过从病毒RNA中RT-PCR扩增和人工合成获得,并克隆至pVAX1载体.将重组质粒DNA以100 μg/只的剂量肌肉注射免疫BALB/c小鼠,于第20天同剂量再免疫1...

中国生理学会应用生理学专业委员会成立暨《中国应用生理学杂志》创刊20周年纪念大会和学术讨论会征文启事

刊期：2005年第01期

河南省部分地区HIV耐药性毒株流行状况及进化特征研究

作者：李敬云; 李宏; 李韩平; 王哲; 杨坤; 辛天义; 鲍作义; 刘思扬 刊期：2005年第01期

目的:了解河南省HIV耐药性毒株的流行状况及其进化规律.方法:以河南省南部某乡未经抗病毒治疗的艾滋病患者(45人)以及经抗病毒治疗3个月和6个月的部分患者(分别为118人和124人)为研究对象,通过逐一访谈了解一般情况、服药方案、服药依从性及保障措施、抗病毒治疗前后的临床表现等,同时采集14 ml EDTA抗凝静脉血,检测CD4/CD8细胞数、病毒载量及基...

16SrDNA寡核苷酸芯片鉴定致病菌的初步研究

作者：郑桂丽; 翟俊辉; 唐学玺; 王津; 郭兆彪; 杨瑞馥 刊期：2005年第01期

目的:建立一种基于16S rDNA寡核苷酸芯片的检测和鉴定常见致病菌的技术. 方法:以16S rDNA为靶标,针对待检细菌设计合成一系列寡核苷酸探针,制备寡核苷酸芯片.细菌DNA经通用引物扩增标记后,与芯片杂交,对杂交图谱进行分析归纳,得到一套种和属特异的检测模式.结果:以本室保存的33株菌(包括7个属15个种)进行初步检验,结果表明,种水平上的鉴定准确率...

应用抑制消减杂交技术研究鼠疫菌与假结核菌基因组之间的差异

作者：王效义; 秦珑; 戴二黑; 童宗中; 韩延平; 张建国; 郭兆彪; 宋亚军; 周冬生; 王津; 王俊; 杨瑞馥 刊期：2005年第01期

目的:研究古典型鼠疫菌与假结核菌ATCC29833基因组间的差异,为进一步认识鼠疫菌的起源与进化奠定基础.方法:通过抑制消减杂交技术比较两种细菌基因组间的差异.结果:与已测序的3株鼠疫菌基因组进行同源性比较,发现了259个假结核菌基因组中存在的特异序列,与基因库进行同源性比较发现了10个假结核菌ATCC29833基因组中存在的新序列.结论:抑制消减杂...

S波段高功率微波对家兔眼的损伤效应

作者：周游; 单清; 苏镇涛; 李子建; 马萍; 钱焕文 刊期：2005年第01期

目的:研究S波段高功率微波(HPM)对家兔眼的损伤效应.方法:家兔在散瞳麻醉只暴露头部的条件下,分3个剂量水平,单次HPM远场平面波照射,于照后7个时间点,通过肉眼、眼底镜、裂隙灯观察,以及视网膜电图测定、组织病理学方法等研究HPM对家兔的角膜、晶状体、视网膜等眼重要部位的结构与功能的影响.结果:HPM照射后,角膜表面粗糙,一周内恢复;晶状体后皮...

S波段高功率微波对大鼠下丘脑垂体肾上腺轴的功能及形态影响

作者：孟丽; 彭瑞云; 高亚兵; 王德文; 王水明; 胡文华; 马俊杰; 杨怡; 苏镇涛 刊期：2005年第01期

目的:探讨S波段高功率微波(HPM)辐射对大鼠下丘脑垂体肾上腺轴(HPA)功能与结构的影响.方法:采用2～90 mW/cm2 的S波段HPM辐照130只二级雄性Wistar大鼠,分别于照后6 h,1 d,7 d,14 d,28 d及3个月活杀,取血、肾上腺、垂体及下丘脑.采用放射免疫法检测血清中相关激素的变化,采用光镜(HE、TB、Peace和Agnor染色)、电镜和图像分析技术,定量研究上述组...

重组肉毒神经毒素A轻链（BONT／ALC）蛋白的表达、纯化与鉴定

作者：贾宏丽; 王景林 刊期：2005年第01期

目的:克隆、表达并纯化肉毒神经毒素A轻链(BoNT/A LC)片段,为BoNT/A的抗体制备和检测方法的建立奠定基础.方法:以PCR方法自肉毒梭菌中扩增BoNT/A轻链基因,直接插入pGEM-T载体,测序正确后再与表达载体pET21a构建重组表达载体pET21a-轻链,转化E.coli BL21(pLys)感受态细胞获得表达工程菌株并进行诱导表达,用Western 印迹鉴定重组BoNT/A 轻链.结果:...

血管生成素基因在大肠杆菌中的表达、纯化及活性研究

作者：邹民吉; 徐东刚; 马百坤; 苏航; 彭善云; 王嘉玺 刊期：2005年第01期

目的:利用原核表达系统获得重组血管生成素(Ang)并研究其生物学活性.方法:构建高效融合表达载体pGEX-4T-Ang,诱导表达后利用亲和层析的方法纯化目的蛋白,经切割后获得非融合的重组人Ang,利用Western印迹检测表达产物的特异性,通过鸡胚尿囊膜血管增生实验检测重组蛋白的生物学功能.结果:表达的目的蛋白约占菌体总蛋白的20%,亲和层析纯化蛋白的纯...

心脏组织特异性表达Cre重组酶转基因小鼠的建立

作者：王剑; 张莉; 毛春明; 程萱; 侯宁; 吕娅歆; 杨晓 刊期：2005年第01期

目的:建立在小鼠心肌细胞中特异性表达Cre重组酶的转基因小鼠.方法:构建了心肌细胞特异性表达Cre重组酶的转基因载体.该载体通过显微注射被导入小鼠受精卵中,通过胚胎移植,获得转基因首建者小鼠.利用PCR检测子代小鼠Cre重组酶整合情况.通过Northern 杂交检测Cre重组酶表达的组织特异性.结果:构建了含有心肌细胞特异性α-肌球蛋白重链(α-MHC)启动...

促炎及抗炎细胞因子在脓毒症小鼠肠道相关淋巴组织的表达

作者：赵立; 陈立军; 尉承泽; 曲楠; 宋旭华; 孟宪钧 刊期：2005年第01期

RNA干涉抑制NIH3T3细胞中外源PC-1基因表达

作者：周立权; 张惠; 高雪松; 王健; 梁瑞霞; 洪宝发; 周建光 刊期：2005年第01期

目的:获得能有效抑制PC-1基因表达的RNAi靶标,用RNAi技术研究PC-1基因表达在前列腺癌中的作用.方法:用DNA重组技术构建了可表达短发夹RNA的重组质粒,将重组质粒与表达PC-1-EGFP融合蛋白的质粒共转染NIH3T3细胞,通过荧光显微镜观察绿色荧光蛋白表达差异,从5个候选靶标中初筛出最合适的RNAi靶标,再通过RT-PCR和Western印迹从mRNA水平和蛋白质水平...

整体原位杂交研究mCcd1在小鼠胚胎发育过程中的表达

作者：景孝堂; 吴燕; 刘淑红; 马子敏; 刘毅; 马鑫; 范文红; 范明 刊期：2005年第01期

目的: 研究mCcd1新基因在小鼠胚胎发育过程中的基因表达,为其功能研究提供线索. 方法: 用地高辛标记mCcd1 RNA探针, 对E9～E11.5小鼠整体胚胎进行原位杂交,检测胚胎发育过程中基因的表达.结果: 在E9～E11.5都有不同程度的表达,E9和E10.5全身都表达,但表达量低.在E11.5的小鼠胚胎开始神经特异性表达,在中脑、眼原基、端脑、菱脑、间脑和脊髓观察...

大鼠头部暴露全氟异丁烯中毒致肺损伤实验模型的建立

作者：张宪成; 丁日高; 张天宏; 黄春倩; 孙晓红 刊期：2005年第01期

目的:建立大鼠头部暴露吸入染毒致急性肺损伤实验模型以便进行全氟异丁烯(perfluoroisobutylene,PFIB)毒理及防治药物研究.方法:用设计的大鼠头部暴露吸入PFIB染毒装置致动物中毒,测定动物中毒后肺灌流液(BALF)中总蛋白含量和肺湿干比变化,在染毒过程中同时用气相色谱连续监测PFIB浓度.结果:在大鼠头部暴露吸入染毒中,PFIB染毒浓度比较稳定.大鼠...