摘要：目的：观察肿瘤坏死因子α对体外培养的视神经星形胶质细胞的促增殖作用，为进一步分析星形胶质细胞的功能奠定实验基础。 方法：实验于2005-06／10在贵阳中医学院第二附属医院眼科和贵阳医学院解剖学教研室完成。将出生24h以内的新生小鼠断颈处死后，采用机械法分离视神经管内段的视神经，进行视神经星形胶质细胞的原代和传代培养及纯化，倒置相差显微镜观察培养细胞的生长过程和形态学变化。取第3，5，6代以后的细胞接种于24孔培养板中，贴壁后取出分别进行免疫荧光化学染色和免疫细胞化学染色，检测细胞胶质纤维酸性蛋白及S-100阳性产物情况。在第6代培养细胞中添加肿瘤坏死因子α，四唑盐比色法观察肿瘤坏死因子α对胶质细胞增殖的影响。 结果：①原代及传代培养的细胞形态光学倒置相差显微镜观察结果：经机械分离培养的原代细胞24h开始贴壁，贴壁细胞形态以梭形、不规则形为主。经消化传代去除悬浮的死亡细胞，培养至第4代以后细胞形态基本一致，细胞体积大，呈星形、梭形及不规则形，突起少，核相对较大，贴壁细胞呈片状生长。②培养的视神经星形胶质细胞胶质纤维酸性蛋白及S-100阳性产物免疫组织化学检测结果：免疫荧光染色及免疫细胞化学染色显示，胶质纤维酸性蛋白及S-100呈阳性，髓磷脂碱性蛋白免疫细胞化学染色阳性率小于1％，未加一抗的呈阴性。第6代以后细胞阳性率达97％以上。③细胞增殖活性四唑盐比色法检测结果：随着肿瘤坏死因子α的浓度加大，胶质细胞表现出增殖亢进现象，以30m表现最为显著，亢进效果明显强于未添加肿瘤坏死因子α的培养细胞（0．197±0．002，0．276±0．005，P〈0．001）。 结论：机械分离纯化新生小鼠视神经星形胶质细胞纯度高，肿瘤坏死因子α能够促进星形�

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