摘要：根据已发表的传染性法氏囊病病毒(IBDV)核苷酸序列,在病毒结构蛋白VP2编码基因的高变区两端外侧的保守序列内设计合成了2条寡核苷酸引物,对各种不同致病性的12株参考毒株进行了RT-PCR检测.结果:12个参考毒株均能扩增出约679 bp的目的片段,而对照的5种鸡源性病原体NDV、IBV、CAIV、E.coli、PM均未扩增到相应片段;对疑似IBD的34份临床病料进行检测,并同时在其扩增的片段内设计另1对引物进行Nested-PCR检测,结果基础RT-PCR检测到11份阳性,Nested-PCR检测到23份阳性,后者的检出率大大提高.结果表明,建立的RT-PCR诊断技术具有特异、快捷、敏感的特点.取限制性内切酶Sac ⅠSsp Ⅲ以及设计的2条vvIBDV(超强毒株)特异性引物,分别应用vVP2片段PCR扩增产物的限制性内切酶分析和型特异性引物的PCR扩增2种方法,对7个IBDV分离参考毒株和24个临床样品进行致病性分型.结果,确定21株属于cIBDV(经典毒株),8株属于vvIBDV,2株未能确定;2种分型方法的结果基本一致,均可用于IBDV的快速分型,型特异性引物的PCR扩增方法更为简便和快捷.

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