首页 期刊 中国生物工程 绿色荧光蛋白标记的表达载体pHis-EGFP的构建 【正文】

绿色荧光蛋白标记的表达载体pHis-EGFP的构建

作者:王伟; 孟超; 朱平; 程克棣 中国医学科学院中国协和医科大学药物研究所; 北京; 100050
表达载体   ggdp合酶   绿色荧光蛋白标记   构建   蛋白纯化  

摘要:为对重组蛋白的表达进行直观检测并简化蛋白纯化的步骤,构建了能在大肠杆菌中表达融合蛋白的通用表达载体pHis-EGFP.该载体含有源自表达载体pET-32a的T7启动子、终止子和源自质粒pUC18的ColE1复制子与绿色荧光蛋白报告基因.应用该载体成功地表达并纯化了酵母GGDP(geranylgeranyl diphosphate,GGDP)合酶融合蛋白,结果表明所构建的载体是一个实用的表达载体,并建立了离子交换层析和亲和层析两步纯化融合蛋白的方法.

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