浙江大学学报·医学版杂志 北大期刊 CSCD期刊 统计源期刊

问号钩端螺旋体致病机制及其属特异性基因工程疫苗研究进展

作者：严杰 刊期：2005年第01期

不同毒力的问号钩端螺旋体(问号钩体)均可黏附细胞,引起胞内游离Ca2+升高,并以内吞方式侵入细胞,导致相似的细胞超微结构病变.强毒力的问号钩体可引起高幅度、双峰型胞内游离Ca2+升高,并可侵入细胞核;弱毒力的问号钩体则否.紫外线灭活前后的问号钩体可引起相似的细胞凋亡率,这提示问号钩体诱导细胞凋亡有特殊的机制.问号钩体外膜中的穿膜蛋白omp...

问号钩端螺旋体诱导的Vero和J774A．1细胞的凋亡和超微结构病变

作者：李立伟; 刘云英; 严杰; 毛亚飞; 罗依惠; 李淑萍 刊期：2005年第01期

目的:探讨不同毒力的钩体黏附和侵入宿主细胞能力及其病理变化.方法:建立Fontana镀银染色法用于观察问号钩体黄疸出血群赖型56601株、波摩那群波摩那型56608株和双曲钩体三堡隆群patoc型Patoc Ⅰ株黏附Vero和J774A.1细胞的能力;采用电镜技术观察感染细胞的超微结构病变;采用FITC-Annexin V/PI荧光标记流式细胞术,检测紫外线灭活前后的上述钩体菌...

问号钩端螺旋体主要外膜蛋白免疫功能表位及其致炎作用的研究

作者：徐丽慧; 严杰; 阮萍; 毛亚飞 刊期：2005年第01期

问号钩端螺旋体磷脂酶C的活性及其内化时细胞内游离Ca^2＋水平的变化

作者：王焕萍; 严杰; 李立伟; 毛亚飞; 李淑萍; 罗依惠 刊期：2005年第01期

巨大阴囊结石一例报告

作者：李恭会; 成晟; 李新德; 许力为 刊期：2005年第01期

1 病例摘要 患者,男性,93岁,萧山农民.反复阴囊左侧区肿痛20余年,阴囊破溃结石脱落后1 h.患者约30年前开始长期卧床,20余年前出现左阴囊区肿痛,但无尿频、尿急、尿痛,无排尿困难.一直未以此就诊,阴囊左侧逐渐增大,如新生婴儿头般大小.2003年5月17日,阴囊左侧区自行掉出一巨大结石,没有明显出血和液体流出,结石脱落后阴囊左侧区明显缩小.由于患者...

rLTB／rCTB-rOmpL1／1融合基因及其原核表达系统的构建和鉴定

作者：阮萍; 严杰; 毛亚飞; 李淑萍; 罗依惠; 李立伟 刊期：2005年第01期

目的:构建ltB/ctB-ompL1/1融合基因及其原核表达系统,鉴定表达产物的免疫和佐剂活性,检测问号钩端螺旋体(简称钩体)野生株ompL1基因的携带和表达情况及钩体患者血清特异性抗体水平.方法:采用连接引物PCR构建ltB-ompL1/1和ctB-ompL1/1融合基因,常规方法构建其原核表达系统.采用SDS-PAGE、Western blot和GM1-ELISA分别检测目的重组蛋白rLTB-rOmpL1...

问号钩端螺旋体lipL32／1-lipL41／1融合基因原核表达系统的构建及其应用

作者：罗冬娇; 严杰; 毛亚飞; 李淑萍; 罗依惠; 李立伟 刊期：2005年第01期

目的:构建问号钩端螺旋体(简称钩体)lipL32/1-lipL41/1融合基因及其原核表达系统,了解钩体野生株lipL32和lipL41基因携带和表达情况及钩体患者的血清抗体水平.方法:采用连接引物PCR构建lipL32/1-lipL41/1融合基因,常规方法构建其原核表达系统.采用SDS-PAGE检测目的重组蛋白rLipL32/1-rLipL41/1表达情况.采用Western blot鉴定rLipL32/1- rLipL41/...

问号钩端螺旋体属lipL32／1-ompL1／1融合基因的真核表达及其表达产物的免疫反应性

作者：严杰; 钊守凤; 毛亚飞; 阮萍; 罗依惠; 李淑萍; 李立伟 刊期：2005年第01期

目的:构建问号钩端螺旋体(简称钩体)的融合基因lipL32/1-ompL1/1真核表达系统并鉴定表达产物的免疫反应性.方法:采用连接引物PCR构建融合基因lipL32/1-ompL1/1,克隆测序后构建lipL32/1-ompL1/1的毕赤酵母真核表达系统pPIC9K-lipL32/1-ompL1/1-P.pastorisGS115.用MM和MD平板分离His+ Mut+型菌落,YPD平板筛选出G418高抗性的His+ Mut+ 转化子.以酵...

新转移相关蛋白SNC19翻译后加工及其活性形式的研究

作者：史影; 郑树; 胡晓晔; 孙立峰; 张苏展 刊期：2005年第01期

目的:进一步从蛋白水平研究SNC19编码蛋白与肿瘤转移的关系;方法:免疫印迹法检测该蛋白在不同肿瘤细胞系及大肠癌组织中的表达;构建Psectag2A-SNC19(ORF)真核表达质粒,转染至乳腺癌细胞BCAP37中瞬时表达,产物经亲和层析纯化,用anti-His mAb进行Western blot鉴定其加工形式,并观察不同的加工产物是否具有明胶酶活性.结果:免疫印迹法显示,在所选肿...

大鼠转化生长因子βⅡ型受体胞外区与γ干扰素融合蛋白真核表达载体的构建

作者：郁子扬; 张立煌; 姚航平; 杨小华 刊期：2005年第01期

目的:在哺乳动物细胞中表达有生物学活性的大鼠转化生长因子βⅡ型受体胞外区与γ干扰素(rsTGFβRⅡ-IFNγ)融合蛋白.方法:提取大鼠肝脏mRNA,用RT-PCR方法分别扩增sTGFβRⅡ和IFNγ基因并克隆至同一真核表达载体pSecTag2A,构建pSecTag2A/rsTGFβRⅡ-IFNγ重组体,以脂质体转染至CHO细胞,用ELISA及Western印迹法检测rsTGFβRⅡ-IFNγ表达,并检测该融合蛋白的...

小鼠ACE2基因的克隆和体外表达以及序列分析与组织分布

作者：谢旭东; 陈君柱; 王兴祥; 朱建华; 孙坚; 陶明; 尚云鹏; 郭晓纲 刊期：2005年第01期

目的:深入研究血管紧张素转化酶2(angiotensin-converting enzyme 2,ACE2)在心血管疾病发病机理中的作用及在高血压基因治疗中的应用,克隆和体外表达小鼠ACE2基因,并进行核苷酸和氨基酸序列分析和组织分布特征研究.方法:采用RT-PCR方法,从小鼠肾组织中扩增出ACE2基因的全长cDNA序列,TA克隆到pGEM-T easy载体,亚克隆到pcDNA3.1+载体,构建重组真核...

胎粪诱导肺损伤及rhSOD的抗炎抗氧化作用研究

作者：卢美萍; 杜立中; 顾伟忠; 俞珍珠; 陈湘湘; 余钟声 刊期：2005年第01期

本刊启事

刊期：2005年第01期

通用引物检测儿童血和脑脊液的6种疱疹类病毒

作者：董关萍; 尚世强; 余钟声; 梁黎; 俞锡林 刊期：2005年第01期

目的:通过PCR-RFLP、DNA克隆和测序分析来检测和区分6种疱疹类病毒,探讨其在临床上的应用价值.方法:在疱疹类病毒高度同源序列DNA多聚酶基因中设计两对通用引物,一对扩增单纯疱疹病毒1型和2型、爱泼斯坦-马尔病毒、人巨细胞病毒4种病毒,另一对扩增水痘-带状疱疹病毒和人类疱疹病毒6型2种病毒,经DNA PCR扩增,并对扩增产物进行分子克隆、序列分析...

黄芪舒张血管平滑肌的作用及机制

作者：张必祺; 胡申江; 单绮娴; 孙坚; 夏强 刊期：2005年第01期