首页 期刊 中国现代医生 构建PDCD5基因真核表达载体及电转染BGC823细胞的研究 【正文】

构建PDCD5基因真核表达载体及电转染BGC823细胞的研究

作者:李鹏辉; 费洪新; 王立红; 许惠玉; 张海燕 齐齐哈尔医学院基础医学院; 黑龙江齐齐哈尔161006
pdcd5基因   pc   电转染   bgc823细胞系  

摘要:目的 构建PDCD5基因真核表达载体,并电转染BGC823细胞,获得稳定转染细胞。方法 设计合成PDCD5基因片段,将其插入经Eco RⅠ和XhoⅠ双酶切的pc DNA3.1+表达载体,菌落PCR和基因测序进行鉴定。重组质粒电转染BGC823细胞,G418筛选数周后PCR鉴定稳定转染细胞。结果 重组质粒经菌落PCR测序分析表明,PDCD5基因序列准确插入预期位置,且序列正确。重组质粒成功电转染BGC823细胞,并整合入细胞基因组DNA。结论 成功构建了PDCD5基因真核表达载体,并整合进BGC823细胞基因组,为研究PDCD5基因的功能及胃癌的基因治疗提供实验基础。

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