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基于山桐子转录组序列的SSR分子标记开发

作者:李娜; 姚民; 梅兰菊; 廖望; 陈放; 唐琳 四川大学生命科学学院; 生物资源与生态环境教育部重点实验室; 成都610064
山桐子   转录组   ssr   分子标记   遗传多样性  

摘要:为研究山桐子遗传多样性,对山桐子转录组数据进行分析,开发SSR分子标记技术. 将山桐子高通量转录组测序获得的84 213条Unigene进行简单重复序列(SSR)位点挖掘和分析,并结合引物验证,初步证明其可行性. 通过软件分析,共获得含SSR位点的序列数23 077,出现频率为27.40 %,涉及序列数量为29 953条,发生频率为35%. SSR序列中包括1 620种重复基元类型,其中单核苷酸、二核苷酸和三核苷酸为优势重复类型,SSR位点数分别为9 782(32.67%)、6 921(23.11%)和5 420(18.10%). 单核苷酸中A/T类型比例最高,为9 630(32.15%),二核苷酸和三核苷酸中以类型AG/CT(4 679;15.62%)和AAG/CCT(1 220;1.53%)为主. SSR位点重复次数差别较大,主要是3次(4 748;15.70%),其次为6次(3 707;12.25%)和5次(3 475;11.60%). 运用多态性分析的方式初步验证SSR位点在不同地区山桐子标记中的可行性. 同时,利用Primer 5.0进行引物设计,随机筛选100对引物进行验证,31对引物可以扩增出条带,19对引物扩增出预期大小的条带,8对引物能特异性区分宜宾、资阳、宁强、成都4个不同地区的山桐子. 本研究通过分析山桐子高通量转录组序列的SSR信息,筛选出8对引物验证不同地区山桐子的遗传多样性,将有助于山桐子基因挖掘、分子标记育种和资源保护等后续工作的开展. (图6 表4 参26)

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