摘要：目的采用Biacore T200分析系统建立高通量检测蛋白与组蛋白多肽相互作用的表面等离子共振(SPR)方法。方法将生物素标记的牛血清白蛋白BSA和YEATS2蛋白分别固定在SA芯片的参比和样品通道上,将不同修饰的组蛋白多肽H3K27cr(巴豆酰化)、H3K27ac(乙酰化)和H3K27(未修饰)稀释成3.9,7.8,15.6,31.2,62.4,125,250μmol/L,依次注入芯片表面,所得数据经Biacore T200分析软件处理,计算YEATS2蛋白与多肽相互作用的亲和力。结果参比通道固定BSA有效地降低了H3K27cr多肽与芯片基质的非特异性吸附。BSA与H3K27cr无特异性结合。YEATS2与组蛋白多肽的亲和力为H3K27cr>H3K27ac>H3K27,与等温滴定微量热(ITC)技术所得结果相吻合。结论优化的SPR方法适用于高通量筛选与特定蛋白相互作用的组蛋白多肽,并可进行亲和力的检测。

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