摘要：构建了核糖体展示人源抗狂犬病毒单链抗体（scFv）库，筛选制备特异抗狂犬病毒糖蛋白（RVGp）的稳定性人源抗体．应用核糖体抗体库技术，从经狂犬病毒Vero疫苗免疫的志愿者外周血淋巴细胞中分离、构建核糖体展示scFv基因库．体外转录翻译后，以RVGp重组蛋白作筛选抗原，采用亲和富集法淘选RVGp特异性scFv抗体基因．在原核系统pET22b（＋）／BL21（DE3）中实现scFv抗体片段的可溶性表达，ELISA鉴定阳性克隆．然后对筛选的scFv进行稳定性改构，构建VH-Lc—VK稳定性抗体，并对其生物学活性进行初步研究．成功构建了库容量约为6．2×10^12的核糖体展示scFv抗体基因库．在180个筛选克隆中，克隆RB24、RB71、RB109和RB156显示出较高的ELISA值，其基因序列分析结果显示，它们是全新的人源抗RVGp抗体．改构后的抗RVGpVH—Lc—VK抗体的稳定性明显改进，可特异识别RVGp并有效中和狂犬病毒，抑制狂犬病毒对靶细胞的感染．以上结果表明，人源抗RVGp特异性抗体的获得，为狂犬病的有效预防、诊断和治疗提供了新的途径，而且将为其他人源抗体的制备提供理论依据和技术基础．

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