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人／鼠嵌合模型中人重组α-病毒疫苗的免疫学作用评价

作者：倪兵; 李艳秋; 杨日高; 林治华; 姜曼; 黎万玲; 吴玉章 刊期：2004年第05期

目的建立人/鼠嵌合模型(Trimera),并研究重组α-病毒在此模型中对人黑色素瘤的免疫学作用.方法构建人/鼠嵌合模型并用流式细胞术进行鉴定.构建重组病毒和重组质粒并在体外转染鉴定其表达.疫苗免疫动物后检测特异抗体滴度和细胞毒T淋巴细胞活性.结果FACS分析发现,人白细胞占Trimera小鼠腹腔淋巴细胞的88.84%,脾脏中为57%.免疫后的小鼠腹腔细胞在效...

HLA-C和HLA-G基因真核细胞双表达载体的克隆及鉴定分析

作者：张磊; 杨珏琴; 姚芳娟; 许玲娣; 范丽安 刊期：2004年第05期

目的构建人HLA-C和HLA-G基因真核细胞双表达载体.方法用RT-PCR从孕妇蜕膜组织有核细胞总mRNA中逆转录扩增全长HLA-C和HLA-G cDNA,首先将HLA-G经BamHⅠ和Cla Ⅰ双酶切,HLA-C经EcoRⅠ和Xho Ⅰ双酶切后,分别定向插入真核细胞双顺反子载体pVITRO2的多克隆位点1(mcs1)和2(mcs2)中,然后经酶切和测序鉴定,确定已建立pVITRO2的单表达质粒pVITRO2-HLA-G和...

激活素ⅡA型受体在免疫细胞上的表达

作者：劳凤学; 张学军; 徐桂月; 崔雪玲; 杨煜; 柳忠辉 刊期：2004年第05期

目的探讨激活素ⅡA受体(ActRH A)在免疫细胞中的表达,揭示激活素(Activin)对免疫细胞的作用方式.方法以ActRⅡA C末端肽作为抗原免疫家兔制备特异性抗ActRⅡ A C末端抗体,通过免疫细胞化学染色技术观察ActRⅡA在免疫细胞上的分布.RT-PCR检测ActRⅡA mRNA表达情况,硝酸还原酶法检测小鼠腹腔巨噬细胞产生NO水平.结果采用特异性抗ActRⅡA C末端抗体...

死亡结构域沉默子参与两型TNF-α胞毒效应机制的研究

作者：朱俊; 郑芳; 李琳芸; 冯玮; 姜小丹; 李卓娅 刊期：2004年第05期

目的比较两型TNF对肿瘤细胞的胞毒效应与SODD表达关系的异同.方法应用MTT法检测两型TNF对HL60和U937的杀瘤效应.应用RT-PCR技术,检测HI60和U937肿瘤细胞株SODD、TNFR1的表达情况及两型TNF对其影响.结果对S-TNF耐受而对TM-TNF敏感的HL60细胞内接头分子SODD表达水平明显高于TNFRI表达水平,而对两型TNF均敏感的U937细胞内SODD表达相对极低于TNFRI的...

人PD-L2基因克隆及其在大肠杆菌中的表达

作者：何贤辉; 徐丽慧; 刘毅; 蔡小嫦; 曾耀英 刊期：2004年第05期

目的克隆人PD-L2基因并构建PD-L2胞外区的原核表达载体,在大肠杆菌中进行表达.方法以RT-PCR方法从活化的人外周血单个核细胞总RNA中克隆PD-L2基因的cDNA,构建PD-L2胞外区的原核表达载体,在大肠杆菌BL21(ED3)中进行表达并鉴定.结果克隆到PD-L2基因cDNA编码区全长序列,经DNA测序证明其与已报道的序列一致.进而构建了PD-L2胞外区的原核表达载体,并...

MAGE-3基因真核表达载体构建及在小鼠黑色素瘤细胞中的表达

作者：马加海; 隋延仿; 陈广生; 叶菁; 黄亚渝; 曲萍; 张秀敏 刊期：2004年第05期

目的扩增人黑色素瘤抗原-3(Melanoma antigen 3,MAGE-3)基因,构建真核表达载体,并在小鼠黑色素细胞瘤B16中进行表达.方法采用PCR扩增MAGE-3基因,连接到真核表达载体pIRES2-EGFP中,构建真核表达载体pIRES2-EGFP-MAGE-3,脂质体法转染小鼠黑色素瘤B16细胞.G418筛选阳性克隆,荧光显微镜和RT-PCR分别检测阳性克隆中增强型绿色荧光蛋白(Enhanced green...

人肥大细胞的IgE依赖性组胺和类胰蛋白酶分泌

作者：何韶衡; 何永松; 谢华 刊期：2004年第05期

目的利用人结肠组织的肥大细胞和肥大细胞激活的体外研究系统评价人肥大细胞释放类胰蛋白酶和组胺的能力及其机制.方法经酶悬浮的人结肠肥大细胞与抗IgE抗体共同培养后记录浓度相关曲线和时间关系曲线.类胰蛋白酶用酶联免疫吸附试验的方法测量,而组胺则由一种以玻璃纤维为基础的荧光比色法测量.结果抗IgE抗体可引起浓度相关性的组胺和类胰蛋白酶...

超抗原SEA（D227A）的构建及其免疫活性鉴定

作者：宋宏萍; 隋延仿; 叶菁; 李增山; 陈广生; 张秀敏 刊期：2004年第05期

目的构建SEA(D227A)基因的原核表达载体,并进行表达、分离纯化与免疫活性鉴定.方法采用PCR技术从产SEA的葡萄球菌标准株中克隆SEA基因,通过下游引物上的点突变,使SEA基因第680位碱基由A突变为C,致使SEA成熟蛋白的第227位氨基酸残基由天冬氨酸(GAT)突变为丙氨酸(GCT),构建pGEX-SEA(D227A)重组表达质粒,在大肠杆菌DH5α中原核表达,再通过淋巴细胞增...

洛伐他汀影响HL-60细胞凋亡及其机制的研究

作者：张雪玲; 糜漫天; 李等松; 张乾勇; 韦娜 刊期：2004年第05期

目的探讨胆固醇合成抑制剂洛伐他汀(Lovastatin,LOV)对HL-60细胞凋亡的影响及其可能的分子机制.方法采用光镜、透射电镜、DNA梯形带检测以及流式细胞仪分析等技术方法,观察LOV对HL-60细胞形态、超微结构和凋亡的影响,以及Fas抗原表达的改变.结果LOV处理HL-60细胞2 d后,光镜下细胞数量明显减少,细胞形态发生不同程度的改变;透射电镜下,HL-60细胞...

大肠杆菌不耐热肠毒素B亚单位的分泌表达与性质鉴定

作者：冯强; 杨珺; 张卫军; 郭桐生; 刘开云; 邹全明 刊期：2004年第05期

目的较高效率分泌表达大肠杆菌不耐热肠毒素B亚单位并鉴定其性质.方法将编码成熟大肠杆菌不耐热肠毒素(LTB)的基因引入pET22b(+)并转化E.coli BL21(DE3);重组工程菌在改良M9-CAA培养基内进行表达;对分泌表达的LTB进行纯化后进行神经节苷脂(GM1)结合活性、免疫原性与黏膜免疫佐剂活性的鉴定.结果LTB既能分泌表达至胞周质又能以包含体形式表达,两...

C-myc标记肽对单链抗体与抗原结合活性的影响

作者：杨康鹃; 孟繁平; 王玉祥; 金桂花; 范华英; M.Stassen; M.de; Baets 刊期：2004年第05期

目的探讨在不同的免疫学检测方法中,与单链抗体相连的亲和标记肽对单链抗体与抗原结合活性的影响.方法在制备'VH-连接链-VL'型结构抗乙酰胆碱受体单链抗体时,将c-myc标记肽与单链抗体的VL连接,应用先将抗c-myc抗体固定单链抗体的固相放射免疫测定法、直接将单链抗体与乙酰胆碱受体结合的液相放射免疫测定法,分别测定单链抗体与乙酰胆碱受体的结...

胆固醇自稳失调对SP2／0骨髓瘤细胞免疫原性的影响

作者：毛应华; 糜漫天; 朱俊东; 承海 刊期：2004年第05期

目的探讨胆固醇自稳失调抖汀(LOV)处理SP2/0细胞,导致胆固醇自稳失调,以密度梯度离心法分离细胞膜;以rmGM-CSF和rmIL-4诱导获得小鼠骨髓细胞来源的DC,混合淋巴细胞反应(MLR)检测其功能;DC负载细胞膜抗原活化T细胞获得肿瘤特异性CTL,MTT法检测其对SP2/0细胞的杀伤效果.结果MLR结果表明DC具有较强的刺激同种T细胞增殖的能力;与对照组膜抗原诱导的C...

《医学信息》杂志征订、征稿启事

刊期：2004年第05期

《中国航天医药杂志》更名启事

刊期：2004年第05期

CML细胞诱导自体和脐血T细胞TCR Vβ谱系和杀伤性分析

作者：杨力建; 李扬秋; 陈少华; 黄梅娟; 韩素芳; 张学利; 张涛 刊期：2004年第05期

目的了解慢性粒细胞白血病(CML)细胞诱导T细胞的TCR Vβ亚家族限制性利用和克隆性增殖情况,及其对CML细胞的杀伤活性.方法采用混合淋巴细胞/肿瘤细胞培养(MLTC)方法,利用CML细胞体外诱导脐血或患者的T细胞增殖,用RT-PCR和基因扫描分析MLTC前后T细胞的24个TCR Vβ亚家族基因的互补决定区(CDR3),了解各Vβ亚家族的利用和T细胞克隆性特点.并利用LDH方...