作者:沈宏杰; 陈子兴; 费敏; 祁小飞; 岑建农; 王元元; 何军; 姚利; 邱桥成 期刊:《中华血液学》 2008年第08期
骨髓增生异常综合征(MDS)是一组起源于骨髓干/祖细胞的恶性克隆增殖性疾病,随着诊断方法的不断完善,如何从分子水平对MDS进行诊断是最近几年研究的重点。Mihara等发现,BMI-1蛋白质在MDS患者CD34^+细胞中的表达可以作为该病诊断的一个分子标志。BMI-1属于聚梳蛋白家族(Polyeomb group,PcG)癌基因。我们应用实时定量RT—PCR检测BMI-1 mRNA在MDS患者骨髓单个核细胞中的表达水平并分析其临床意义。
作者:贾娜; 高星; 王瑞生 期刊:《毒理学》 2005年第01期
目的观察二乙氧基乙醇(2-EE)诱导大鼠生精细胞凋亡及Bcl-2家族、Fas系统和Caspase-3与细胞凋亡过程的作用,探讨2-EE诱导大鼠生精细胞凋亡的分子调控机制.方法选用SD大鼠(8只,分3个实验组和1个对照组,每组2只)以800mg/kg剂量分别灌胃1、3和5d.提取一侧睾丸组织DNA用于DN段分析,另一侧睾丸组织RNA用于半定量RT-PCR分析Bax、Bcl-2、Fas、Fas-L和Caspase-3基因mRNA水平变化.用QuantityOne4.1.1软件定量各条带亮度,以GAPDHRT-PCR定量结...
作者:张春林; 廖威明; 李佛保; 曾炳芳; 曾益新 期刊:《中华病理学》 2005年第08期
作者:刘亮; 刘畅; 张晓启; 明佳; 刘旭盛; 徐辉; 程天民 期刊:《中华烧伤》 2005年第03期
作者:张志宏; 马腾骧; 王广有; 张月; 李胜芝; 李光三; 刘思金; 劳为德 期刊:《中华器官移植》 2005年第06期
目的为了研究异种移植,建立血管内皮细胞组织特异性表达人衰变加速因子(DAF)的转基因小鼠.方法采用受精卵显微注射技术,将含有人内皮细胞粘附分子-2(ICAM-2)基因启动子、人DAF cDNA(插有人DAF基因第一个内含子)、SV40splice/polyA的外源基因导入小鼠受精卵的原核中;选取注射后仍健康的受精卵移植入假孕母鼠的输卵管中待分娩.聚合酶链(PCR)技术及Southern印迹杂交法确定外源基因整合阳性转基因小鼠.RT-PCR方法和流式细胞术分别用于...
作者:张三泉; 蒋会勇; 宋兰英; 胡海; 张进华; 赵彤 期刊:《中华医学》 2005年第44期
肺癌是发病率和死亡率增长最快、对人类健康和生命威胁最大的恶性肿瘤.大量实验研究表明,肺癌的发生、发展和转移过程受多种基因的调控[1].现代遗传学研究显示,肺癌的发生发展是个逐渐演化的过程,该过程涉及到众多原癌基因的激活和抑瘤基因的失活,而探讨抑瘤基因的失活在肺癌发病机制中的作用是目前研究中的一个热点.本研究通过克隆候选抑瘤基因KIAA1173,进而制备cDNA探针,进行原位杂交(ISH),来检测该基因mRNA在肺癌组织中的表达水...
作者:胡绍燕; 陈子兴; 岑建农; 顾伟英; 赵晔; 谷敏 期刊:《中华内科》 2005年第12期
目前关于胰岛素样生长因子结合蛋白相关蛋白1(IGFBP-rP1)基因的研究报道主要见于实体瘤 [1-3],尚无与白血病发生、发展的相关报道.我们利用实时定量逆转录酶式聚合反应(QRT-PCR)技术,检测白血病患者不同病程中IGFBP- r P1基因mRNA的表达水平,并与WT1、RbAp46基因进行相关分析,探讨其与白血病发生的关系.
作者:程黎娜(综述); 甘华田(审校) 期刊:《华西医学》 2008年第03期
RNA干扰(RNA interference,RNAi)是指将双链RNA(dsRNA)导入细胞,其序列与靶基因同源,它在细胞内可与靶基因mRNA结合,并迅速将其降解,从而抑制该基因的表达。2001年,Elbashir等在哺乳动物细胞中用化学合成的21nt的dsRNA诱导产生了特异性的RNAi,RNAi技术迅速扩展到哺乳动物领域。研究证实,转染小的双链siRNA进入细胞,siRNA能特异地结合相应的靶基因mRNA,导致其降解进而引起90%以上的相应蛋白表达的减少。基于RNAi的上...
作者:王颖; 刘力 期刊:《基础医学与临床》 2005年第05期
近年来,对功能基因组的研究使人们对基因功能的认识不断深入.后基因时代的来临,又使基因功能研究备受瞩目.RNA干涉对基因表达的抑制为我们提供了新的研究工具.RNA干涉(RNAi)是将双链RNA(dsRNA)导入细胞引起特异基因mRNA降解的一种细胞反应过程.它是转录后基因沉寂(PTGS)的一种.本文简要介绍RNAi的发生机制及该过程中重要分子Dicer的研究进展.
作者:崔云峰; 崔乃强; 李东华; 张琚 期刊:《世界华人消化》 2005年第09期
目的:研究家族遗传性胆囊胆固醇结石患者、非家族遗传性胆囊胆固醇结石患者和非胆固醇结石患者肝组织HMGCoA还原酶(HMGCR)、固醇携带蛋白2(SCP2)基因mRNA的表达情况,进而明确二者在胆石形成中的作用.方法:选取2003-08/2004-08天津市南开医院外科住院病例90例,均取得患者及家属知情同意,其中家族遗传性胆囊胆固醇结石患者28例,非家族遗传性胆囊胆固醇结石患者30例,非胆固醇结石患者32例,术中肝活检,行肝组织总RNA提取,逆转录反应合...
作者:张玲; 郭莲; 彭勇; 陈兵 期刊:《世界华人消化》 2005年第11期
目的:通过正、反义T-STAR(testis-signal transduction and activator ofRNA)基因转染结肠癌HCT-116细胞,观察对细胞端粒酶活性的影响.方法:用脂质体Lipofectamine法将正、反义T-STAR基因转染入HCT-116细胞,用RT-PCR及Westernblot方法检测该细胞T-STAR基因mRNA和蛋白表达变化,并用PCR-ELISA法检测细胞端粒酶活性改变.结果:在T-STAR转染的结肠癌HCT-116细胞中,TSTAR mRNA和蛋白表达显著增加(分别为296%,180%,P<0.01),端粒酶活性明...
作者:严旭禛; 陈巍; 杨爱婷; 尤红 期刊:《肝脏》 2018年第08期
microRNA(miRNA)是一种内源性小分子非编码RNA,通过与特定靶基因mRNA的3’-UTR区不完全结合,在转录后水平上调控基因表达。多项研究表明,microRNA-21(miR-21)在肝纤维化患者及小鼠模型中表达均明显上调,敲除或抑制miR-21表达可显著减轻肝纤维化(表1)。然而,Caviglia等近期研究发现,miR-21在肝星状细胞(HSCs)活化及肝纤维化进展过程中的作用有限。
作者:张玲; 郭莲; 彭勇; 陈兵 期刊:《第三军医大学学报》 2005年第11期
目的通过反义技术抑制肺腺癌A549细胞T-STAR (testes-signal transduction and activator of RNA)基因内源性表达,观察对细胞端粒酶活性的影响.方法用阳性脂质体法将T-STAR反义基因转染入A549细胞,用RT-PCR及Western blot方法检测转染细胞内源性T-STAR基因mRNA和蛋白表达水平,并用PCR-ELISA法检测细胞端粒酶活性改变.结果反义基因可在mRNA及蛋白水平有效抑制肺腺癌A549 T-STAR基因的表达,同时明显降低细胞端粒酶活性.结论肺腺癌A54...
作者:舒莉萍; 何志旭; 姚冬静; 马健娟; 李涛; 叶芝旭 期刊:《贵州医科大学学报》 2012年第05期
目的:为探讨hoxcl3基因在斑马鱼发育过程中与血管形成可能的作用机制,用hoxd3基因的反义mRNA探针进行斑马鱼全胚胎原位杂交,观测hoxd3基因在野生型斑马鱼胚胎发育过程中的表达情况。方法:提取斑马鱼胚胎总RNA,经RT—PCR扩增斑马鱼hoxd3基因片段,
作者:冼磊; 王俊; 姜冠潮; 王丹蕾; 刘军; 李剑锋 期刊:《昆明医科大学学报》 2005年第02期
目的:检测FHIT基因mRNA在非小细胞肺癌(NSCLC)中的表达情况.方法:采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法对53例NSCLC患者的肺癌进行FHITmRNA表达的检测.结果:53例肺癌标本中FHIT基因mRNA的失表达或异常表达率为64.2%(34/53);非肺癌患者肺组织FHIT基因失表达或异常表达率为0.FHIT基因mRNA的失表达或异常表达率与患者性别、年龄、分期、原发肿瘤大小及有无淋巴结转移均无明显关系(P>0.05),在鳞癌中的失表达或异常表达率为91.3%,在腺...
作者:刘志强; 邬丽莎; 何涛; 杨小琼 期刊:《中华结核和呼吸》 2005年第08期
研究表明人类白细胞抗原(HLA)复合体参与人免疫反应的多个环节,其中HLA-Ⅱ类分子在调节免疫反应中起关键性作用,现已证明不同的HLA等位基因及其产物在支气管哮喘(简称哮喘)发病中起抑制性作用或为哮喘的易感因素[1].HLA-DR和HLA-DQ与哮喘的相关性已为国内外学者广泛研究[2,3],HLA-DP与哮喘的相关性也开始受到关注[4].我们的试验通过检测哮喘急性发作期患者和缓解期患者HLA-DPB1基因mRNA的表达量变化,探讨HLA-DPB1基因在哮喘患者发...
作者:项和平; 张长乐 期刊:《中华疾病控制》 2005年第03期
胃癌是常见的恶性肿瘤之一,在我国发病率和死亡率居各类肿瘤之首,转移是胃癌的主要死亡原因[1].近年来发现基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinases,MMP)通过降解细胞外基质(extracelluar matrix,ECM)及基质膜,在肿瘤的浸润与转移中起重要作用[2],其中研究较多的是MMP-2,MMP-9,对MMP-7的研究文献报道较少.MMP-7是MMP家族中的重要成员,在胃肠道肿瘤发展中起重要作用.笔者应用RT-PCR方法检测胃癌组织及其周围正常粘膜的MMP-7基因mR...
作者:吴永璐; 陈洁 期刊:《实用医学》 2017年第03期
微小核糖核酸,简称微小RNA(即microRNAs,miR-NAs)是一类长度约为22个核苷酸的内源性非编码小分子单链RNA,广泛存在真核细胞中。miRNAs作用广泛,通过5’种子序列结合靶基因mRNA的3’非翻译端互补配对来调控胚胎发育、细胞增殖和凋亡、肿瘤的发生发展、脂肪代谢以及激素合成等过程。随着对miRNAs认识的深入,不同肿瘤的miRNAs表达谱不同,大量研究发现miRNAs在泌尿系肿瘤表达异常,证明其具有作为新的泌尿系肿瘤诊断、治疗及判...
变形链球菌GbpA的GBD免疫防龋实验研究;附着状态对口腔白色念珠菌ALS基因mRNA的影响;第一恒磨牙窝沟菌群组成;c血清型变形链球菌致龋相关基因,DN段的批量克隆与高通量筛选;外源性糖对变形链球菌活性氧代谢的作用。
作者:王敏; 王静云; 王欣彦; 谭卓毅; 何旖旎; 岳阳 期刊:《中华妇产科》 2007年第10期
硫酸基转移酶(sulfotransferase,SULT)主要催化人体内硫酸化反应,在外源性化合物(如药物、食品添加剂、致癌物等)的生物代谢和化学防御过程中起着关键作用,在调节各种内源性化合物(如甲状腺激素、类固醇和儿茶酚胺等)的生物活性方面也发挥着重要作用。SULT对于一些通过硫酸化反应来进行代谢的复合物很敏感,包括雌激素和甲状腺激素等。本研究采用RT—PCR方法检测5种SULT基因mRNA在人子宫内膜组织中的表达情况,为探讨雌激...