摘要:目的建立人外周血CD34+细胞及其亚群的纯化分离方法.方法用干细胞采集仪收集了3例病人的外周血干细胞,应用免疫磁珠分离柱快速分离其中的CD34+细胞,随后采用分选型EPICS Elite流式细胞仪进一步分选出CD34+/CD90+双阳性早期造血干细胞.结果免疫磁珠分离纯化后CD34+干细胞的纯度可达83%~95%,回收率54%~71%,活细胞率>95%.流式细胞仪分选后的CD34+/CD90+细胞纯度可达90%以上,回收率在40%~50%,生存率>95%.起始标本中CD34+细胞含量越高,纯化所得到的干细胞纯度和回收率越高.两种纯化后的干细胞在形态学上有明显的不同.结论联合应用免疫磁珠分离和流式细胞仪分选,可以较高的回收率快速纯化高纯度的CD34+细胞及其亚群.
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