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一个古老学科的新发展——发展临床解剖学要找准新技术的结合点

作者：钟世镇 刊期：2004年第01期

人体解剖学是一门十分古老的学科,科研选题步履维艰.我们密切结合临床发展的需要,开辟了一条生机盎然的新道路,建立了现代临床解剖学研究体系.回顾科学技术发展的历史,技术往往超前于基础研究,成为理论突破的先导.一个传统学科的发展,必须选准与新技术的结合点.本文围绕临床解剖学的创新发展,分别叙述了与显微外科解剖学、临床解剖生物力学、断...

噬菌体表面展示技术的新发展及在病毒性肝炎研究中的应用

作者：成军 刊期：2004年第01期

噬菌体展示技术是一种目的基因在噬菌体表面的表达产物与亲和选择相结合的技术.噬菌体结构蛋白pⅢ和pⅧ均可作为载体来展示外源多肽或蛋白质.初期阶段,噬菌体展示技术主要是用于单链可变区抗体、随机多肽库等的筛选,但近年来随着噬菌体cDNA表达型文库的构建,噬菌体展示技术的用途逐渐扩大.目前噬菌体展示技术不仅可以用于研究蛋白结合蛋白,而且...

抗丙型肝炎病毒核心蛋白单链抗体的制备及免疫组织化学研究

作者：钟彦伟; 成军; 焦成松; 张忠东; 李强; 李莉; 陈菊梅 刊期：2004年第01期

目的制备丙型肝炎病毒核心蛋白单链抗体并进行免疫组织化学研究.方法以大肠杆菌表达的重组丙型肝炎病毒(HCV)核心蛋白为固相抗原,利用抗原-抗体亲和性结合的原理,从半合成的人源可变区噬菌体抗体库中经过3轮"吸附-洗脱-扩增"的筛选过程及酶联免疫吸附试验(ELISA)和DNA序列分析,获得HCV核心蛋白的人源单链抗体;用该抗体对7721转染全长HCV cDNA后...

丙型肝炎病毒核心蛋白人源抗独特型单链抗体在大肠杆菌中的表达

作者：钟彦伟; 成军; 张忠东; 李强; 李莉; 陈菊梅 刊期：2004年第01期

目的在大肠杆菌中表达丙型肝炎病毒核心蛋白人源抗独特型单链抗体.方法采用噬菌体表面展示技术,将丙型肝炎病毒(HCV)核心蛋白单克隆抗体固相包被于Nunc板.从人源噬菌体单链可变区抗体库中经过3轮"吸附-洗脱-扩增"的筛选,获得结合活性较强的人源HCV核心蛋白抗独特型(抗-Id)scFv阳性克隆.从阳性克隆中提取质粒,经Sfi I/NotI酶切鉴定后,亚克隆到pCA...

噬菌体表面展示技术筛选乙型肝炎病毒前S1蛋白结合蛋白基因

作者：董菁; 王业东; 成军; 皇甫竞坤; 钟彦伟; 杨倩 刊期：2004年第01期

目的以乙型肝炎病毒(HBV)前S1蛋白为靶蛋白,寻找其相应的结合蛋白.方法应用T7 cDNA文库噬菌体展示技术克隆与前S1蛋白具有结合作用的蛋白序列,命名为前S1结合蛋白(PreS1BP).将推断的氨基酸序列在蛋白质库中进行搜索,自Gen-Bank中获得结合蛋白的cDNA和基因组的全长序列.结果初步确定PreS1BP即为神经胶质瘤抑制基因区候选基因2(GLTSCR2),cD-NA长为...

应用噬菌体展示技术筛选乙型肝炎病毒核心启动子结合蛋白

作者：张忠东; 成军; 钟彦伟; 王业东; 董菁; 陈天艳; 杨倩; 张树林; 刘妍 刊期：2004年第01期

目的通过筛选乙型肝炎病毒(HBV)核心启动子(core promoter)结合蛋白,为HBV复制机制的研究探索新的途径.方法应用噬菌体表面展示技术,以HBV核心启动子的聚合酶链反应产物作为固相筛选分子,对噬菌体人肝细胞cDNA文库进行5轮 "吸附-洗脱-扩增"的筛选过程,经噬斑的PCR扩增后,构建克隆载体,最后对所筛选克隆进行DNA序列分析和同源性搜索.结果噬菌体经...

应用噬菌体展示技术筛选丙型肝炎病毒非结构蛋白NS4A结合蛋白

作者：钟彦伟; 成军; 张忠东; 杨艳杰; 李强; 董菁; 黄燕萍; 刘敏; 王建军 刊期：2004年第01期

目的筛选丙型肝炎病毒(HCV)非结构蛋白NS4A结合蛋白,为HCV致病机制的研究探索新的途径.方法应用噬菌体展示技术,以HCV非结构蛋白NS4A作为固相筛选分子,对T7噬菌体人肝细胞cDNA文库进行5轮"吸附-洗脱-扩增"的筛选过程,经噬斑的PCR扩增后,构建克隆载体,最后对所筛选克隆进行DNA序列测定和同源性分析.结果噬菌体经富集后,从随机挑选的12个克隆中得...

下期专题预告

刊期：2004年第01期

《妇产科急症学》（第2版）

刊期：2004年第01期

应用噬菌体展示技术筛选乙型肝炎病毒表面抗原基因启动子Ⅱ结合蛋白

作者：杨艳杰; 成军; 陈东风; 钟彦伟; 张忠东; 王建军; 刘妍 刊期：2004年第01期

目的通过筛选乙型肝炎病毒(HBV)表面抗原基因启动子Ⅱ(SPⅡ)结合蛋白,为HBV复制机制的研究探索新的途径.方法应用噬菌体展示技术,以HBV的表面抗原基因启动子Ⅱ的聚合酶链反应(PCR)产物DNA作为固相筛选分子,对噬菌体人肝细胞cDNA文库进行5轮"吸附-洗脱-扩增"筛选过程,经噬斑的PCR扩增后,构建克隆载体,最后对所筛选克隆进行DNA序列测定和同源性分...

Janus激酶／信号转导子和转录激活因子通路与创伤脓毒症的关系

作者：姚咏明; 盛志勇 刊期：2004年第01期

Janus激酶/信号转导子和转录激活因子(JAK/STAT)通路因其简单的构成模式和独特的激活方式而备受关注,它参与了多种早期细胞因子的信号转导及调控过程,其中尤以IFN-γ、IL-1、IL-6、IL-10、IL-4与JAK/STAT活化关系密切.新近研究发现,JAK/STAT通路对脓毒症晚期介质--高迁移率族蛋白B1(HMGB1)表达亦具有明显的调节作用,抑制该信号转导途径可下调HMGB...

脓毒症大鼠多器官白介素18表达及其与内毒素血症的关系

作者：李红云; 姚咏明; 董宁; 于燕; 鄢小建; 盛志勇 刊期：2004年第01期

目的观察盲肠结扎穿孔术(CLP)所致脓毒症大鼠重要脏器白介素18(IL-18)基因表达的变化规律,并初步探讨IL-18与内毒素血症的关系.方法54只Wistar大鼠随机分为正常对照组(n=6)、CLP组(n=36)和重组杀菌/通透性增加蛋白(rBPI21)治疗组(n=12),检测动物肝、肺、肾组织中IL-18 mRNA表达水平、内毒素水平和器官功能指标的改变.结果CLP大鼠肝、肺组织内毒...

NF-κB抑制剂对烫伤脓毒症大鼠致炎/抗炎细胞因子表达的影响

作者：姚咏明; 姚胜; 陈劲松; 李红云; 董宁; 于燕; 盛志勇 刊期：2004年第01期

NF-κB在烧伤脓毒症大鼠肝损伤中的作用

作者：尹会男; 柴家科; 姚咏明; 吴焱秋; 申传安; 刘强 刊期：2004年第01期

大鼠腹腔巨噬细胞高迁移率族蛋白B1诱生机制的初步探讨

作者：刘辉; 姚咏明; 于燕; 盛志勇 刊期：2004年第01期

目的探讨腹腔巨噬细胞高迁移率族蛋白B1(HMGB1)诱生的分子机制.方法取正常Wistar大鼠腹腔巨噬细胞置24孔培养板中(1×106/孔),培养3天后用内毒素(LPS)刺激,观察LPS刺激与巨噬细胞HMGB1 mRNA表达的时效关系及量效关系,同时观察氟达拉滨(fludarabine,STAT1抑制剂)及雷帕霉素(rapamycin,STAT 3抑制剂)对HMGB1 mRNA表达的影响.结果LPS刺激可使大鼠腹...