首页 期刊 疾病监测 基于16S rRNA的聚合酶链反应技术用于肺部感染患者痰标本中军团菌的检测 【正文】

基于16S rRNA的聚合酶链反应技术用于肺部感染患者痰标本中军团菌的检测

作者:何晖 赵利伟 朱庆义 广州市疾病预防控制中心 广东广州510440 广州金域医学检验中心 广东广州510330
实时荧光定量聚合酶链反应   军团菌属   痰液  

摘要:目的建立实时荧光定量聚合酶链反应(real-time PCR)方法,检测肺部感染患者痰液中军团菌属特异性16S rRNA基因。方法利用军团菌属特异性16S rRNA基因保守序列设计引物和探针,优化反应条件和反应体系,对嗜肺军团菌、非嗜肺军团菌及其他病原菌标准菌株进行检测,验证该方法的特异性和敏感性。对150例肺部感染患者痰液标本进行检测,阳性者对基因扩增产物测序作验证试验。结果该方法检测军团菌属所有标准菌株均出现阳性信号,其他非军团菌属检测结果均为阴性,灵敏度为10 cfu/ml。150例肺部感染患者的痰液标本,经荧光定量PCR法检出军团菌阳性27例,阳性率为18.0%(27/150),经16S rRNA基因测序验证,阳性率为15.0%(22/150),经χ2检验二者差异无统计学意义(χ2=3.2,P﹥0.05),表明其较好的符合性和等效性。结论 realtime PCR法检测患者痰液标本中军团菌,具有快速、敏感、特异等特点,适用于临床军团菌感染调查及快速检测。

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