首页 期刊 化学试剂 基于磁分离方法的猪胰岛素受体分离与活性分析 【正文】

基于磁分离方法的猪胰岛素受体分离与活性分析

作者:钟王磊; 陈维娴; 周国华 岭南师范学院生命科学与技术学院; 广东湛江524048; 岭南师范学院化学化工学院清洁能源材料化学广东普通高校重点实验室; 广东湛江524048
胰岛素受体   磁分离   提取   信号传导   自磷酸化  

摘要:目前,胰岛素受体的分离提取方法为凝集素亲和层析与以胰岛素作为配体的亲和层析。建立磁分离法,采用胰岛素受体亲和磁分离探针提取受体蛋白,对提取条件进行优化,并以免疫印迹法检测胰岛素作用下受体蛋白酪氨酸的自磷酸化反应。结果表明,磁分离探针与粗提取总蛋白孵育16 h是提取受体蛋白的较优条件,所得胰岛素受体保持了其生物活性,能够发生自磷酸化反应。这些结果表明磁分离方法可应用于胰岛素受体的分离纯化,该方法简便、特异性强、稳定、可靠,为胰岛素信号传导、糖尿病病理、药物筛选等研究提供了有效的研究工具。

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