首页 期刊 广东药科大学学报 不同自体血清对体外培养小鼠骨髓基质细胞的影响 【正文】

不同自体血清对体外培养小鼠骨髓基质细胞的影响

作者:王宵; 黄国彪; 陈俊; 何俊华; 薄华本 广东药科大学生命科学与生物制药学院/广东省生物技术候选药物研究重点实验室; 广东广州510006; 广东药科大学药学院; 广东广州510006
小鼠   血清   骨髓基质细胞   灭活   mtt检测  

摘要:目的 探讨小鼠自体血清的制备、处理方法和自体血清的最大添加量。 方法 制备10%血浆、10%血清和空白组血清来培养小鼠原代骨髓细胞,倒置荧光显微镜观察细胞形态及生长状态,MTT检测细胞活力;灭活的10%血清与未灭活的10%血清和空白组血清来培养原代骨髓细胞,MTT检测细胞活力;0%、5%、10%、15%、20%小鼠血清分别培养原代骨髓细胞,MTT检测细胞活力;将小鼠血清冻干,用IMDM培养基重悬血清的冻干粉,配制终浓度为0%、5%、10%、15%、20%的冻干粉溶液,培养原代骨髓细胞,MTT检测细胞活力。 结果 骨髓基质细胞体外培养3 d后,血清组的细胞吸光度值(0.497±0.009)显著高于血浆组(0.076±0.003), P< 0.01;灭活组的细胞吸光度值(0.503±0.013)显著高于未灭活组 (0.317 ±0.014), P< 0.01;血清直接加入细胞时,5%组细胞生长状态最好,血清浓度的增加会影响细胞状态。经过冻干后,血清添加量可增加到20%。 结论 不加抗凝剂并将血清灭活为最佳制备自体血清的方法;5%的小鼠血清为体外培养骨髓基质细胞的最佳血清浓度;将小鼠血清冻干,体外培养骨髓基质细胞的血清浓度增加至20%。

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