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基于滚环扩增及串联G-四链体-血红素DNA酶的高灵敏“Turn-on”型Hg^2+传感器研究

作者:张何; 王青; 傅昕; 赵智粮 湖南工程学院化学化工学院; 湘潭411104
滚环放大   汞离子   尿液分析   比色分析  

摘要:以聚苯乙烯微球为载体,利用滚环放大技术,发展了一种以串联G-四链体-血红素DNA酶催化及T-Hg^2+-T特异识别为基础的“Turn-on”型Hg 2+高灵敏生物传感器,用于尿液样本中Hg^2+的高效检测。通过链霉亲和素和生物素的特异性结合,将富T生物素化Hg^2+捕获探针固定至微球表面,当Hg 2+存在时,通过形成T-Hg^2+-T结构将含有G-四链体互补序列的环化单链DNA序列捕获至微球表面,滚环扩增后在微球表面产生大量包含串联G-四链体的DNA序列。当氯化血红素(Hemin)插入G-四链体后,形成具有增强催化活性的G-四链体-hemin DNA酶,可催化ABTS和H2O2反应形成ABTS·+,在420 nm处具有最大吸收。考察了多种因素对检测体系的影响,在最优实验条件下,此方法对Hg^2+的线性检测范围为0.4~100 pmol/L,检出限为0.3 pmol/L(S/N=3),回归方程为△A 420 nm=0.1+0.0019 C Hg^2+(pmol/L)。当共存离子大量存在时,传感器对Hg^2+仍然具有高的选择性。应用于尿液样品中Hg^2+检测,加标回收率为94.0%~106.0%,相对标准偏差(RSD)为1.4%~2.6%。此方法具有良好的选择性、灵敏度及抗干扰能力,可用于复杂样品中Hg 2+的检测。

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