摘要:试验通过离子交换色谱法对肌肉中钙激活酶(Calpain)进行定量分析研究,确定了Calpain粗提液制备工艺.对Calpain粗提液进行全波长紫外扫描说明276~280 nm处有一个吸收高峰.应用DEAE离子交换层析对Calpain进行纯化,用0~500mmol·L-1NaCl Tris-HCl进行离子强度线性梯度洗脱,在280 nm波长下测定洗脱液的光吸收值,洗脱得3个蛋白峰,μ-Calpain和m-Calpain分别在NaCl为130~180 mmol·L-1和260~300mmol·L-1时洗脱下来,钙激活酶抑制蛋白(Calpastatin)在NaCl为70~110 mmol·L1时洗脱下来.Calpain分子量为110 000u,通过电泳试验表明,本检测结果提取液正好在分子量约为110000 u处有一条清晰的带,说明所得提取物为Cal-pain,而且纯度较高.
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