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汉滩病毒S基因的分段表达及其线性和构象型抗原表位分析

作者：王涛; 张全福; 李川; 刘琴芝; 李建东; 梁米芳; 李德新 刊期：2005年第03期

构建汉滩病毒76-118 N蛋白及其分别从N-端和C-端缺失的共6个突变体,在大肠杆菌BL-21中进行表达,并对其中一些蛋白进行了纯化.通过Western blot、酶联免疫吸附试验(ELISA)进行汉滩病毒N蛋白的抗原表位分析,N蛋白及6个缺失突变体都与组特异性抗体L13F3呈阳性反应,而缺失突变体与型特异性抗体AH30呈阴性反应.构建汉滩病毒76-118 N蛋白及其6个缺失突...

焦磷酸测序技术在确认北京严重急性呼吸综合征（SARS）病毒株并检测基因突变中的应用

作者：程绍辉; 梁明华; 李泽琳; 张霆; 张珑; 马洪涛; 刘哲伟; 曾毅 刊期：2005年第03期

结合严重急性呼吸综合征(SARS)病毒株序列信息分析和高通量测序技术,建立一种快速、简单地确定SARS病毒株并筛查SARS病毒突变位点和突变频率的方法.从感染人SARS病毒的Vero-6细胞中提取病毒RNA,反转录为cDNA后,PCR扩增目的基因片段,采用焦磷酸测序技术(Pyrosequencing Technology,PSQ)进行第2 601、7 919、9 479、19 838多个碱基突变位点测序和...

中国首次分离的辛德毕斯病毒XJ-160病毒株感染性全基因组cDNA克隆的构建与分析

作者：杨益良; 梁国栋; 付士红; 何海怀; 李晓宇; 邓娟; 苏乃伦; 王力华; 侯云德 刊期：2005年第03期

报告了中国首次分离的辛德毕斯病毒XJ-160株的感染性全基因组cDNA克隆的构建与鉴定.利用RT-PCR方法获得覆盖病毒全长基因组的cDN段,以低拷贝质粒pBR322作为骨架,将基因组cDNA置于SP6 RNA聚合酶启动子之后,基因组3'末端带有35个连续的A,通过DNA重组技术组装成病毒基因组全长cDNA克隆.该克隆可在大肠杆菌DH5a中稳定扩增.经体外转录,RNA转录体转染B...

基因Ⅰ、Ⅳ型戊型肝炎病毒高灵敏度通用引物的设计和初步应用

作者：葛胜祥; 郭清顺; 李少伟; 张军; 夏宁邵 刊期：2005年第03期

设计针对国内流行的戊型肝炎病毒(HEV)基因Ⅰ、Ⅳ型,在这两型序列的保守区域设计了一套RT-PCR引物--E引物,并将E引物与目前较常用的3对通用引物(Meng、ConORF1和ConORF2引物)比较了检测基因Ⅰ、Ⅳ型HEV的灵敏度.对基因Ⅰ型HEV,E引物能检出的稀释度为105,参考引物能检出的稀释度为102～104;对基因Ⅳ型HEV,E引物能检出的稀释度为102,参考引物能检...

CD／5-FC对KSHV肿瘤转化基因K12诱导NIH3T3转化细胞的杀伤作用

作者：唐桂霞; 卢春 刊期：2005年第03期

采用分子克隆技术构建含卡波济肉瘤相关疱疹病毒(Kaposi's sarcoma-associated herpesvirus,KSHV)转化基因K12和含胞嘧啶脱氨酶(CD)基因重组逆转录病毒表达质粒,分别命名为LZRS-K12和pLXSN-Fcy::Fur.将LZRS-K12质粒转染NIH3T3细胞系,诱导细胞转化获得具有肿瘤细胞生物学特性的N/K12细胞,进一步将pLXSN-Fcy::Fur质粒转染N/K12细胞,获得含CD基因的...

人乳头瘤病毒16L1-减毒志贺氏杆菌为载体疫苗的构建及免疫效应初步鉴定

作者：杨筱凤; 陈宏伟; 郑瑾; 司履生; 董小平; 王一理 刊期：2005年第03期

为预防高危型人乳头瘤病毒16型(HPV16)诱发宫颈癌,制备以减毒志贺氏杆菌为载体的HPV16预防疫苗,以期载体可介导机体产生粘膜免疫反应,达到预防HPV16感染的目的.为此构建了以HPV16L1为免疫原的减毒志贺氏杆菌苗,并初步鉴定候选疫苗的减毒特性和免疫效果.利用基于志贺氏杆菌virG/icsA基因的表达载体(pHS3199),将HPV16L1基因插入后构成pHS3199-hpv1...

重组腺相关病毒2型／人肿瘤坏死因子受体：Fc（rAAV2／hTNFR：Fc）的构建和生物学活性研究

作者：高凯; 赵爱志; 吴小兵; 药力波; 张英起; 王军志 刊期：2005年第03期

为研究腺相关病毒2型载体应用于类风湿性关节炎进行基因治疗的可行性,首先构建携带人肿瘤坏死因子Ⅱ型受体胞外区和人免疫球蛋白IgG1 Fc段融合基因的重组2型腺相关病毒(FAAV2/hTNFR:Fc),并对其生物学活性进行研究.以RT-PCR分别从U937和人淋巴细胞总RNA中扩增人肿瘤坏死因子Ⅱ型受体胞外区和人免疫球蛋白IgG1 Fc段基因,并以重叠延伸PCR的方法将二...

按痘苗病毒优势密码子改造HIV-1 gag基因提高表达水平的研究

作者：张相民; 辛伟; 王世峰; 李仁清; 陆柔剑; 王文玲; 吕亦晨; 阮力 刊期：2005年第03期

为确定痘苗病毒密码子偏向性与基因表达的关系及其在痘苗病毒与宿主细胞相互作用过程中的作用,按痘苗病毒的优势密码子对HIV-1 gag基因进行改造,并对合成基因与野生型HIV-1gag基因在痘苗病毒载体系统的表达水平进行了研究.结果显示:①各目的基因分别正向插入了痘苗病毒TK区7.5k启动子下游;②免疫荧光检测显示,改造前后的gag基因均能够很好地在痘...

柯萨奇病毒A组16型中国分离株（Cox．A16SHZH00—1）全基因组序列测定及分析

作者：李琳琳; 何雅晴; 朱俊萍; 薛颖; 朱雅芳; 徐星晔; 金奇 刊期：2005年第03期

对分离自2000年中国深圳地区手足口病患儿粪便标本的柯萨奇病毒A组16型(Coxsackievirus A16,Cox.A16)病毒SHZH00-1株进行全基因组序列测定及分析后发现,Cox.A16 SHZH00-1的基因组(未包括多聚腺苷酸尾)长度为7 410bp,其中5'端非编码区(5'UTR)长为745bp,病毒基因组编码区全长6 582个核苷酸,编码一个含2 193个氨基酸残基的多聚蛋白,3'端非编码区长...

全国2005年脊髓灰质炎监测实验室网络工作研讨会在云南召开

刊期：2005年第03期

中国柯萨奇病毒A组16型部分VP1区序列测定及系统进化分析

作者：卫灿东; 李琳琳; 何雅晴; 徐星晔; 薛颖; 金奇 刊期：2005年第03期

利用1999～2004年连续6年从中国深圳及北京地区分离的柯萨奇病毒A组16型(Coxsackievirus A16,Cox.A16)毒株的部分VP1区基因序列进行分析和研究,试图找出中国Cox.A16的种系进化规律和分型依据.6株Cox.A16病毒部分VP1区核苷酸和氨基酸同源性均较高,相互间核苷酸同源性为94.5%～98.0%,氨基酸同源性为97.8%～100%.6株中国分离株与Cox.A16国际参考株...

口蹄疫病毒多基因重组质粒的体外表达及衣壳组装

作者：郭慧琛; 刘在新; 孙世琪; 冷青文; 刘湘涛; 谢庆阁 刊期：2005年第03期

PCR扩增获得包含口蹄疫病毒P1、2A、3C、3D及部分2B编码区的目的基因片段P12X3C3D,将P12X3C3D经AflⅡ和XbaⅠ双酶切后,定向克隆于真核表达质粒载体pcDNA3.1(+);另将PCR扩增获得的P12X3C3D直接与真核表达质粒载体pTARGETTM连接,进行筛选、鉴定及DNA序列分析,分别获得重组质粒pcDNA3.1/P12X3C3D、pTARGET/P12X3C3D.将重组质粒分别转染BHK-21细胞,...

含EBV-LMP2基因重组腺病毒修饰的树突状细胞疫苗体内外特异性抗瘤作用的研究

作者：左建民; 周玲; 杜海军; 付华; 王琦; 曾毅 刊期：2005年第03期

鼻咽癌(NPC)在东南亚地区,尤其在我国南方地区发病率高达40/10万～60/10万.Epstein-Barr virus(EBV)在鼻咽癌的病因学中有着十分重要的作用,在肿瘤细胞中该病毒的存在为以CTL为基础的免疫治疗提供了一个潜在靶位.

乙型肝炎病毒X蛋白（HBx）：一种多功能的病毒调节因子

作者：徐烟青; 周永东; 毕胜利 刊期：2005年第03期

乙型肝炎病毒(HBV)的慢性感染是导致肝细胞癌(HCC)的主要危险因子.X蛋白(HBx)被认为在肝细胞癌的发生发展中起重要作用.X基因是HBV基因组最小的开放读码框,它编码的X蛋白含154个氨基酸,分子量约为16.5kD.HBx是一种多功能的病毒调节因子,通过调节细胞和病毒的转录活性、信号传导途径、基因毒性压力反应、蛋白质降解等,直接或间接地影响HBV的复制...

《病毒学报》征稿简则

刊期：2005年第03期