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粘膜免疫戊型肝炎试验性疫苗的研究

作者：周永东; 张明程; 蒋琳; 沈心亮; 毕胜利 刊期：2005年第01期

采用原核表达的戊型肝炎病毒结构区基因(HEV ORF2)编码蛋白,与新型人用疫苗佐剂类MF59配制成试验性疫苗,通过粘膜免疫途径免疫实验小鼠,研究其产生粘膜免疫和体液免疫的效果.结果表明,通过滴鼻和灌胃两种粘膜免疫途径免疫BALB/c小鼠,均能诱导小鼠产生针对HEV ORF2试验性疫苗的血清IgG和IgA,血清IgG的抗体滴度为1:800～1:1600,血清IgA抗体滴度为1...

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刊期：2005年第01期

表达流行性感冒病毒HA基因非复制型重组腺病毒的构建及免疫效果的研究

作者：赵小东; 韩峰; 应革; 王璇; 王艳; 吴淑华 刊期：2005年第01期

通过RT-PCR扩增流行性感冒(流感)病毒HA基因,克隆至腺病毒穿梭载体pAdTrack-CMV,该重组质粒与腺病毒DNA共转化E.coli BJ5183,通过细菌内同源重组获得重组腺病毒DNA,将其转染293细胞获得重组腺病毒.PCR证实HA基因已整合至腺病毒基因组中,Western blot结果检测到重组病毒感染293细胞中HA的表达.重组病毒经滴鼻和灌胃两种途径免疫小鼠,结果2次免疫...

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刊期：2005年第01期

一种高效快速浓缩腺相关病毒载体的方法

作者：彭建强; 彭忞; 谭淑萍; 曹晖; 连忠辉; 董小岩; 吴小兵 刊期：2005年第01期

腺相关病毒载体(adeno-associated viral vector,AAV vector)是一种具有良好应用前景的基因治疗载体.研究中往往需要高滴度的重组AAV病毒(＞105v.g./细胞),为此利用完整的腺相关病毒颗粒具有耐受有机溶剂的特点,创造性地采用了一种用乙醇沉淀重组AAV病毒的方法,达到了高效、快速浓缩AAV载体的目的.结果表明,乙醇沉淀法可以高效浓缩AAV载体,并且...

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刊期：2005年第01期

人乳头瘤病毒11型L1主要衣壳蛋白的B细胞表位多肽作为疫苗的研究

作者：李元朝; 吕凤林; 曹伟; 左国伟; 艾军华; 胡承香 刊期：2005年第01期

分析了人乳头瘤病毒11型(HPV11)L1主要衣壳蛋白的B细胞优势表位,并以此为基础研制表位多肽疫苗.研究中采用Goldkey和PC/Gene软件系统,分析HPV11的L1主要衣壳蛋白的二级结构、抗原性、B细胞表位,并引入氨基酸抗原性指数,综合评估其B细胞优势表位.Fmoc固相合成表位多肽,高效液相层析方法纯化,毛细管电泳分析其纯度.与0.2ml佐剂完全乳化后,按50趣/...

中国河北省卢龙县儿童轮状病毒腹泻研究

作者：方肇寅; 张丽杰; 唐景裕; 章青; 胡海宽; 谢华萍; 郑丽舒; Duncan; Steele; Paul; Kilgore; Joseph; Bresee; Erik; Hummelman; Xi; Jiang; Roger; Glass 刊期：2005年第01期

轮状病毒是我国儿童重症腹泻的主要病原.按照WHO轮状病毒监测方案,于1999年7月至2003年6月,在河北省卢龙县开展了医院和社区为基础＜5岁儿童轮状病毒腹泻的监测.结果表明:卢龙县＜5岁儿童腹泻的发病率为1.3次/人/年.4年中全县共有2350名＜5岁急性腹泻患儿住院,占所有住院儿童的38%(2350/6213).住院的腹泻患儿每年有两个高峰,一个是夏季(6～8月),...

血中检测SARS冠状病毒N蛋白在SARS实验室早期诊断中的作用

作者：狄飚; 车小燕; 高阳; 郝卫; 周端华; 吴新伟; 王亚娣; 鲁恩洁; 陈芳; 张伟; B.J.Zheng; 刘于飞; 刘远; 蒋力云; 杨卫路; 何丽娟; 王鸣 刊期：2005年第01期

为明确严重急性呼吸综合症(SARS)冠状病毒N蛋白在SARS实验室早期诊断中的作用,通过微量中和试验及酶联免疫方法、间接免疫荧光法检测疑似病人恢复期血清(大于28天)中SARS-IgG抗体,确诊SARS患者.同时收集发病不同时期SARS及普通发热病人血清,利用酶联免疫方法检测SARS-CoV N蛋白,并与荧光定量PCR早期诊断方法相比较.共检测:广州地区2003年12月～2...

SARS冠状病毒分离培养和鉴定的实验研究

作者：鲍琳琳; 涂新明; 蒋虹; 佟巍; 丛喆; 魏强; 朱华; 张扬清; 高虹; 邓巍; 黄澜; 刘亚莉; 王健伟; 秦川 刊期：2005年第01期

建立严重急性呼吸综合征(SARS)冠状病毒分离、培养方法,为SARS冠状病毒动物模型的建立提供实验依据,并根据病毒在体内存活的时间确定检测指标.选用已鉴定为SARS冠状病毒的毒株,经过鼻腔接种感染恒河猴.定期采集咽拭子标本,分离血清或血浆,用Vero细胞进行病毒培养、分离.结果显示,在SARS冠状病毒感染恒河猴后2、5、7天,可以从拭子中分离到病毒,5...

禽Ⅰ型副粘病毒各种禽源分离株毒力及其相关基因的研究

作者：韦平; 韦天超; 杨宗维; 李莉萍; 王林果; 韦正吉; 韦信贤; 李康然; 刘禄 刊期：2005年第01期

用测定新城疫病毒(NDV)毒力的经典方法,即鸡胚平均死亡时间(MDT)和脑内接种致病指数(ICPI),对源于鸡、鸽、鹅、珍珠鸡、孔雀、鹌鹑和画眉鸟等7种禽(鸟)源的共14个禽Ⅰ型副粘病毒(APMV-1)广西分离株,分别测定了毒力.同时对分离株F基因的N-端前段和HN基因的C-末端片段进行扩增、测序和分析,并绘制系谱树.结果发现,分离株的MDT在36h～75h之间,除1株...

猪瘟病毒感染性cDNA克隆的构建及其致病性

作者：; 吴海祥; 张楚瑜; 伊光辉; 曹晟; 温国元 刊期：2005年第01期

为了建立研究猪瘟病毒的技术平台,利用RT-PCR技术构建了猪瘟病毒中国石门株(Shimen)的全长有感染性cDNA克隆pT7SM.通过体外转录线性化的pT7SM并将转录的RNA转染至PK-15细胞中,获得了猪瘟病毒粒子.再用间接免疫荧光法测定了其生长曲线,通过电镜观察到重组病毒呈球形,具有囊膜结构.进一步把获得的猪瘟病毒粒子感染非免疫实验猪,结果子代病毒与石门...

用8质粒病毒拯救系统产生H9N2／WSN重组A型流行性感冒病毒

作者：卢建红; 邵卫星; 刘玉良; 贾立军; 韦栋平; 石火英; 刘秀梵 刊期：2005年第01期

把禽流行性感冒(流感)病毒A/Chicken/Shanghai/F/98(H9N2)的血凝素(HA)和神经氨酸酶(NA)基因cDNA克隆至polⅠ-polⅡ双向转录和表达载体pHW2000,用这两种质粒与8质粒病毒拯救系统中流感病毒A/WSN/33(H1N1)6个内部基因eDNA的质粒组合(6+2重排),共转染COS-1细胞,产生了能在鸡胚中高滴度增殖的H9N2/WSN重组病毒.用A/WSN/33的8个基因cDNA质粒作对照,...

鸡内源性类J亚群禽白血病病毒gp85基因的克隆及分析

作者：杨玉莹; 秦爱建; 顾玉芳; 赵振华 刊期：2005年第01期

为深入探讨J亚群禽白血病病毒(Avian leukosis virus subgroup J,ALV-J)的亚群特性,利用ALV-J gp85基因两侧的序列片段为引物,从正常SPF蛋鸡、商品肉鸡和DF1细胞基因组中完整地扩增了内源性类ALV-J gp85基因.肉鸡和DF1细胞内源性类ALV-J gp85基因同源性达99.9%;SPF蛋鸡内源性类ALV-J gp85基因与肉鸡和DF1细胞的内源性类ALV-J gp85基因之间同源性...

霍乱弧菌噬菌体VP2基因组序列的测定与分析

作者：王多春; 汪敏; 李燕萍; 董辉; 刘中华; 刘延清; 祁国明; 高守一; 金维荣; 阚飙 刊期：2005年第01期

测定并分析了霍乱弧菌噬菌体VP2基因组序列,为VP2生物学特性和功能研究提供分子遗传学基础.为此构建了VP2DNA随机文库,鸟枪法(shot-gun)测定其全基因组序列.测序结果用软件Phrad-Prap拼接成最小重叠群(contig),引物步移法测定contigs间的缝隙(gap)序列,拼接后获得VP2全基因组序列.利用生物信息学技术分析VP2基因组,最后对VP2和相关噬菌体做DNA聚...