摘要：背景:转化生长因子β1(transforming growthfactor β1,TGFβ1)能通过自分泌和旁分泌机制促进肿瘤细胞的生长,最近有研究表明反义TGFβ1基因转染骨肉瘤细胞后可以降低肿瘤细胞的增殖活性.目的:观察反义TGFβ1基因对骨肉瘤细胞恶性表型的逆转作用,探讨其预防骨肉瘤的发生、发展的意义.设计:完全随机设计,对照实验研究.地点和材料:研究地点为华中科技大学同济医学院附属协和医院骨科实验室.TaqDNA聚合酶、TRIzolTM试剂、Superscript PreamplificationSystem、胎牛血清、DMEM培养基、Lipofectamine、无血清培养基、G418、PCR引物、反义TGFβ1表达质粒pcDNA3-TGFβ1(-)、人骨肉瘤细胞系MG-63、Balb/c裸鼠、流式细胞仪、CO2培养箱、相差显微镜.方法:将反义TGFβ1基因转染骨肉瘤细胞MG-63后,检测细胞周期、细胞凋亡和明胶酶A表达,并观察转染细胞软琼脂克隆形成数和裸鼠体内致瘤能力.主要观察指标:细胞周期和细胞凋亡检测;RT-PCR检测MMP-2基因表达;软琼脂培养克隆形成实验;裸鼠体内成瘤性的检测.结果:与MG-63和空载体转染细胞MG-pcDNA3相比,反义基因转染细胞MG-TGFβ1(-)的Go/G1期细胞从56.2%和60.1%增至71.6%,S期细胞从19.1%和17.8%降至12.9%,MMP-2 mRNA表达明显减少.MG-TGFβ1(-)的软琼脂克隆形成数从48.6±8.1和45.2±4.7减至28.2±5.6,裸鼠体内形成肿瘤的体积[(83.4±27.4)mm3]也明显小于MG-63组[(191.3±21.5)mm3]和MG-pcDNA3组[(204.2±30.7)mm3].结论:反义TGFβ1基因转染骨肉瘤细胞可以逆转肿瘤细胞的恶性表型,抑制肿瘤的侵袭和转移.

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