首页 期刊 中国细胞生物学学报 小鼠受精卵中蛋白激酶C底物的鉴定 【正文】

小鼠受精卵中蛋白激酶C底物的鉴定

作者:于爱鸣; 宗志宏; 武迪迪; 于秉治 中国医科大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室沈阳110001
小鼠   动物实验   受精卵   蛋白激酶c   底物  

摘要:为研究蛋白激酶C(protein kinase C,PKC)在小鼠早期发育中的调节作用,运用超排卵和体外受精技术,采用体外磷酸化和放射自显影的方法,鉴定小鼠1-细胞期受精卵中PKC的底物.经特殊的反复冻融处理,消除卵中内源性蛋白激酶活性.55个受精卵的样品中加入部分纯化的PKC,结合应用较强的PKC抑制剂H-7和星形孢菌素以及促分裂原活化蛋白激酶抑制剂PD098059作为对照,观察到12条PKC底物蛋白的放射自显影带,根据标准蛋白质Rf值绘制的标准曲线计算,这些磷酸化蛋白的相对分子量分别约为120 kDa、100 kDa、79 kDa、63 kDa、59 kDa、47 kDa、40 kDa、34 kDa、32 kDa、26 kDa、24 kDa和22 kDa.实验结果表明,PKC可通过底物蛋白活性的调节,在小鼠早期发育中发挥重要作用.

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