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与脐带间充质干细胞共培养对奶牛乳腺上皮细胞乳脂合成及关键基因表达的影响

作者:赵艳坤; 邵伟; 余雄 新疆农业大学动物科学学院新疆肉乳用草食动物营养实验室; 新疆乌鲁木齐830052
脐带间充质干细胞   奶牛乳腺上皮细胞   共培养   乳脂   基因表达  

摘要:探究与脐带间充质干细胞共培养对奶牛乳腺上皮细胞(BMECs)乳脂合成及关键基因表达的影响。将脐带间充质干细胞和乳腺上皮细胞利用Transwell小室双层共培养,BMECs单纯培养为对照组,IGF—IR抑制剂AG1024处理细胞,检测上清IGF—I、甘油三酯(TAG)含量变化,再用磷脂酰肌醇3一羟激酶(P13K)信号阻断剂LY294002孵育细胞,RT—qPCR检测乙酰辅酶A羧化酶(ACACA)、脂肪酸合成酶(FASN)和固醇调节元件结合蛋白(sterol regulatory element,bindingproteins,SREBP1)基因的相对表达丰度。结果显示,共培养后BMECs的IGF—I含量极显著升高(P〈0.01),TAG含量显著升高(P〈0.05);加入AG1024后,IGFI明显受到抑制(P〈0.01),显著降低了各组TAG含量及各基因的表达丰度(P〈0.05);LY294002抑制了P13K(P〈0.01)、AKT、mTOR(P〈0.05)mRNA的表达,显著降低了TAG含量及ACACA、FASN、SREBPlmRNA的表达(P〈0.05);共同处理后极显著降低了TAG合成量及各基因相对表达丰度(P〈0.01)。结果表明,脐带间充质干细胞能够通过IGF—I介导P13K/Akt/mTOR信号通路上调BMECs乳脂合成关键基因的表达丰度,促进TAG的合成。

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