首页 期刊 中国生物工程 融合蛋白NusA-hRI的高效异源表达、纯化及活性分析 【正文】

融合蛋白NusA-hRI的高效异源表达、纯化及活性分析

作者:付大伟; 孙莹莹; 徐伟 哈尔滨商业大学食品工程学院; 哈尔滨150076
人核糖核酸酶抑制因子   融合标签   诱导表达   磁珠纯化   亲和层析  

摘要:人核糖核酸酶抑制因子(human ribonuclease inhibitor,hRI)是一种能够调节核糖核酸酶活性的酸性包浆蛋白。通过构建含SUMO、IF2、GST、NusA、MsyB、Trx和MBP融合标签的重组表达载体,以大肠杆菌BL21(DE3)作为宿主菌进行自诱导(auto-induction,AI)表达,从而使hRI的表达量得以提升。利用MagNi磁珠纯化及电泳分析hRI的表达状况,通过RNase/Sepharose亲和层析获得纯度较高的蛋白。纯化后获得的融合蛋白浓度为2 960.513mg/L,与其它公司的hRI活性进行比较,检测其酶活性约为50U/μl,并使其成功用于RNA的保护,为Nus A-hRI的应用提供理论依据。

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