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高产铁载体荧光假单胞菌Pseudomonas fluorescens sp-f的筛选鉴定及其铁载体特性研究

作者：赵翔; 陈绍兴; 谢志雄; 沈萍 刊期：2006年第05期

采用改进的CAS检测平板从东湖中筛选得到了一株高产铁载体细菌sp-f，并用CAS检测液定量检测其分泌铁载体量，发现其As/AГ仅0．09（0D680），su（Siderophore Unit）为90％，达到产铁载体菌最高级。用BIOLOG检测板，结合细菌生理生化反应、形态观察和16S rDNA序列比对分析等分类鉴定方法，确定sp-f为一株荧光假单胞菌。P．fluorescens sp-f生长过...

具抗肿瘤活性放线菌菌株YIM 90022的分离和系统发育分析

作者：陈义光; 李文均; 崔晓龙; 姜成林; 徐丽华; 张玉琴; 文孟良 刊期：2006年第05期

从青海盐碱土壤样品中分离到一株兼性嗜碱放线菌YIM 90022，该菌株的发酵产物具有很强的体外抗胃癌、肺癌、乳腺癌、皮肤癌、肾癌和子宫癌肿瘤细胞株活性。基于16S rRNA基因序列的系统发育分析表明，菌株YIM 90022属于拟诺卡氏属（Nocardiopsis）的成员，与该属的4个有效发表种N．exhalans DSM 44407^T，N．prasina DSM 43845^T，N．metallicus ...

大肠杆菌O23 O-抗原基因簇序列的破译及UDP-N-乙酰葡萄糖-C4异构酶的鉴定

作者：程剑松; 王威; 王荃; 高春绪; 王磊; 彭霞 刊期：2006年第05期

采用鸟枪法破译大肠杆菌O23标准株的O-抗原基因簇序列，并用生物信息学的方法进行了基因注释和分析；采用基因缺失和互补的方法鉴定了O23的UDP-GlcNAc C4异构酶（Gne）；用同源建模的方法构建了O23 Gne的高级结构并对其活性位点进行了分析；分析了不同血清型大肠杆菌O-抗原基因簇中gne基因的多样性；根据O23 O-抗原基因簇中的特异基因筛选出了可...

假单胞菌M18转录调节因子σ^S基因与无启动子lacZ基因融合突变株的构建和鉴定

作者：葛宜和; 许煜泉 刊期：2006年第05期

通过菌落原位杂交和Southem杂交，从假单胞菌M18基因组文库中克隆了rpoS基因及相邻序列。为了深入研究影响rpoS基因表达的调控因素，运用同源重组技术，将无启动子阻半乳糖苷酶基因（-’lacZ）插入并融合于rpoS基因中，构建了假单胞菌M18rpoS基因突变株M18SZ。Miller法测定显示，突变株M18SZ的β-半乳糖苷酶可高达480U，而野生株检测不到β-半乳糖...

双功能枯草杆菌诱导型高效表达分泌载体的构建与鉴定

作者：李瑞芳; 张添元; 罗进贤 刊期：2006年第05期

利用大肠杆菌质粒pSP72和枯草杆菌质粒pUB18共整合得到双功能克隆载体pSB。在pSB多克隆位点依次引入枯草杆菌果聚糖蔗糖酶基因启动子-信号肽序列sacB p．s．、地衣芽孢杆菌淀粉酶基因终止子序列α-amyT和短小芽孢杆菌增强子基因degQ，最终构建了双功能枯草杆菌诱导型高效表达分泌载体pSBPTQ。将Vasostatin Ⅰ基因作为靶基因检测sacB p．s．、α-am...

兔出血症病毒（RHDV）WHNRH株的分离鉴定及基因组全序列的测定与分析

作者：李建文; 王红宁; 田浪; 黄勇; 张夏兰 刊期：2006年第05期

从发病长毛兔中分离鉴定了兔病毒性出血症病毒WHNRH株。参考GenBank中已登录的RHDV毒株序列对RHDV WHNRH分离株进行了全基因组序列测定与分析。设计5对扩增区段相互重叠的RHDV特异性引物，扩增除5’和3’末端以外的序列，采用设计锚引物的5’RACE方法以及针对RHDV 3’末端的polyA结构设计引物获得了RHDV WHNRH株的5’和3’末端序列。胶回收各PCR...

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刊期：2006年第05期

海栖热袍菌内切葡聚糖酶Cel12B与木聚糖酶XynA CBD结构域融合基因的构建、表达及融合酶性质分析

作者：李相前; 邵蔚蓝 刊期：2006年第05期

海栖热袍菌内切葡聚糖酶Cel12B是极耐热胞外酶，氨基酸序列分析表明不含有纤维素结合结构域（CBD），对结晶纤维素无活性，但同样菌种来源的木聚糖酶XynA有催化结构域和纤维素结合结构城。用同样极耐热酶CBD区域和Cel12B融合构建重组质粒pET-20b—Cel12B—CBD，经诱导表达后，对结晶纤维素有活性，酶学特性研究表明：最适反应温度为100℃、最适p...

猪链球菌2型次黄嘌呤核苷酸脱氢酶基因的克隆与鉴定

作者：段志涛; 何孔旺; 张雪寒; 倪艳秀; 陆承平 刊期：2006年第05期

根据GenBank猪链球菌2型（SS2）报道序列．对江苏分离株SS2-H部分测序，发现位于已知毒力基因orf2与mrp之间存在两个新的开放阅读框序列。选取可能含有抗原决定簇肽段对应的核酸序列，该阅读框（2738～3694）编码319个氨基酸残基，分子量为33．5kDa，与已知任何基因无同源性。通过InterPro、PHD、DNAstar分析阅读框，并定向克隆至pET-32α（＋）...

蓝光诱导促进黑曲霉产糖化酶的研究

作者：朱俊晨; 王小菁; 张广; 苏捷; 朱明 刊期：2006年第05期

考察了蓝光对黑曲霉产糖化酶的影响并采用扫描电镜观察蓝光下黑曲霉形态发育过程，结果表明，与黑暗对照组相比，蓝光处理使菌丝粗壮，孢囊增大，分生孢子发育提前，黑曲霉糖化酶活力增加，孢子发育和产糖化酶的进程有一定的对应性。黑曲霉在黑暗下生长至36h时，经蓝光诱导糖化酶产量提高更为明显，提示了黑曲霉存在一个对蓝光反应产生最适光感...

达坂喜盐芽孢杆菌D-8^T在低渗冲击下的双向凝胶电泳分析

作者：冯德芹; 解利石; 李小红; 杨苏声 刊期：2006年第05期

为了解革兰氏阳性中度嗜盐菌适应低渗冲击的机制，采用双向凝胶电泳技术，研究达坂喜盐芽孢杆菌（Halobacillus dabanensis）D-8^T在低渗冲击下的差异蛋白表达谱。利用Imagemaster^TM 2D Platinum软件分析到大约650个蛋白点，大多数蛋白分子量分布在17．5～66kDa，等电点为4．0～5．9，偏酸性。在20％盐浓度中生长的D-8菌株受到0％盐浓度的低渗...

Ni^2＋高效结合肽的筛选与作用研究

作者：易卓林; 佟鑫; 马春燕; 黄敬双; 茆灿泉; 除柳; 谢明德 刊期：2006年第05期

利用噬菌体随机十二肽库和金属亲和层析对重金属Ni^2＋进行结合肽筛选。经4轮生物淘洗、噬菌体扩增和DNA测序，获得一组多肽序列。GenBank Blast分析未发现同源序列，Clustal W多重序列比对也未找到Ni^2＋金属结合肽结合基序，但可能含有多聚组氨酸（His）2-5。噬菌体单克隆金属离子螫合树脂的亲和力测定和反筛、抑菌解毒试验表明：展示有金属结...

利用噬菌体随机肽库筛选可结合志贺毒素B亚单位的短肽序列

作者：包士中; 王慧; 荫俊; 杨慧盈; 史晶 刊期：2006年第05期

以制备的重组志贺毒素B亚单位（StxB）为靶标，利用噬菌体展示亲和淘选技术，经4轮筛选，从随机十二肽库中筛选到与StxB结合的一批噬菌体克隆，对特异结合活性较高的27个噬菌体克隆的表面展示肽进行序列测定，其中A6序列出现16次，A9和A3序列分别出现2次和3次。为评价筛选克隆中和毒素毒性的能力，将展示肽出现频率最高的A6噬菌体克隆，体外与志...

4株苯系物降解菌菌株的筛选鉴定、降解特性及其降解基因研究

作者：王琳; 邵宗泽 刊期：2006年第05期

分别以苯、甲苯为碳源，从厦门污水处理厂活性污泥中富集筛选获得了2株苯降解菌B1、B2和2株甲苯降解菌J2、J6。16S rRNA基因鉴定结果表明B1、J2属于假单胞菌属（Pseudomonas sp．），B2、J6属于不动杆菌属（Acinetobacter sp．）。研究表明，这些菌在pH7～10的碱性范围内能很好生长。在以0．1％（V／V）苯或甲苯为唯一碳源的无机盐培养基中，B1...

16S rDNA-RFLP分析六氯苯好氧降解菌群的结构及其多样性

作者：刘婷; 陈朱蕾; 曹丽; 孙蔚旻; 沈韫芬 刊期：2006年第05期

从某化工厂排水沟底泥中取样，经2个月的富集驯化得到六氯苯好氧降解菌群。通过测定该微生物菌群在降解六氯苯过程中累积耗氧量、微生物生长曲线及Cl^-浓度的变化，证明在好氧条件下该微生物菌群能够以六氯苯为唯一碳源和能源生长。当培养温度为30℃，pH为7．0时，该菌群能在18d内将无机盐培养基中浓度为4．5mg／L的六氯苯降解55％以上，降解速...