首页 期刊 生物技术通报 葡萄细胞悬浮培养体系的建立和优化 【正文】

葡萄细胞悬浮培养体系的建立和优化

作者:王玲; 李琰; 代伟娜; 严静; 张朝红 西北农林科技大学园艺学院农业部西北地区园艺作物生物学与种质创制重点实验室; 杨凌712100; 西北农林科技大学生命科学学院; 杨凌712100
葡萄苗   疏松型愈伤组织   细胞悬浮培养   细胞活力  

摘要:为了利用葡萄愈伤组织建立快速稳定的葡萄细胞悬浮体系,以无核白和黑比诺葡萄无菌幼苗的茎段、叶片以及叶柄为外植体,通过基本培养基、不同植物生长调节剂配比及其浓度、PVP等优化疏松型愈伤组织的诱导方法并建立稳定的细胞悬浮培养体系。结果表明,以无核白和黑比诺葡萄茎段为外植体,在添加2.0mg/LNAA和0.3mg/L6-BA的MS培养基上适合疏松型愈伤组织的诱导。以B5为基本培养基添加1.0113lg/L2,4-D和0.5mg/L,6-BA以及0-2%PVP的优化培养条件下,建立了快速稳定的无核白葡萄悬浮培养体系。葡萄悬浮培养细胞生长曲线呈s形,接种后6—18d处于对数生长期,第21天细胞增长量达到最大值。细胞活力测定与TTC染色结果一致表明,接种后培养9d细胞活力最强。建立了快速稳定的无核白葡萄悬浮培养体系,选择细胞活力最强且细胞快速增值的对数期7-9d的细胞进行葡萄悬浮细胞遗传转化,效率较高。

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