首页 期刊 上海医学 颗粒溶素融合蛋白的克隆表达和免疫学鉴定 【正文】

颗粒溶素融合蛋白的克隆表达和免疫学鉴定

作者:陈燕; 周晔; 钱琤; 蒋廷旺; 吴传勇; 陈孙孝; 邓安梅; 仲人前 第二军医大学附属长征医院实验诊断科; 全军临床免疫中心; 上海200003
颗粒溶素   重组融合蛋白   免疫印迹  

摘要:目的 采用基因工程方法重组并表达颗粒溶素融合蛋白.方法 采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)克隆颗粒溶素多肽分子的cDNA,经测序证实后定向插入表达载体pET28a(+),并经双酶切电泳鉴定.进而导入大肠杆菌BL21(DE3)plyS中,经异丙基硫代-β-D半乳糖苷(IPTG)诱导后表达重组融合蛋白.结果 经聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)、Western印迹法鉴定,在相对分子质量为9 000处有明显的条带.结论 经重组表达获得颗粒溶素融合蛋白,有助于进一步探讨颗粒溶素与临床疾病的相关性.

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