热带医学杂志 统计源期刊

全血染色法和分离外周血单个核细胞染色的五聚体技术检测抗原特异性CTL的比较

作者：邓洪; 韩晓燕; 陈幼明; 张富程; 高志良; 姚集鲁 刊期：2006年第05期

目的 分别采用分离外周血单个核细胞（PBMC）法和全血直接染色法的组织相容性抗原-肽五聚体（MHC pentamers）流式细胞技术定量分析慢性乙型肝炎（下称慢性乙肝）患者体内乙型肝炎病毒（nBv）特异性的细胞毒性T淋巴细胞（CTL），并对两种方法进行比较。方法 从慢性乙肝患者外周血中分离PBMC，用HLA-A2^＊HBcAg抗原表位肽-MHC Pentamers及CD8单克...

胞嘧啶脱氨酶和胸苷激酶融合双自杀基因系统对膀胱癌细胞体外杀伤作用

作者：谭万龙; 谢毅; 郑少斌; 吴元东; 朱文辉 刊期：2006年第05期

目的 探讨胞嘧啶脱氨酶（CD）和胸苷激酶（TK）融合双自杀基因系统对膀胱癌细胞的杀伤作用。方法 利用含有CD—TK双自杀融合基因及绿色荧光蛋白（GFP）基因的复制缺陷腺病毒感染膀胱癌细胞株Mb49细胞，RT—PER检测CD及TK表达，MTY法测定感染病毒Mb49细胞对GCV和／或5-FC敏感性及旁观者效应。结果 RT—PCR可检测到腺病毒感染的Mb49细胞中GD及TK表...

网上投稿注意事项

刊期：2006年第05期

不同佐剂的弓形虫复合黏膜疫苗鼻内免疫小鼠诱导的黏膜免疫应答

作者：刘成芳; 殷国荣; 刘娟娟; 管志玉; 石蓉; 张宇斌 刊期：2006年第05期

目的 比较IFN-γ、蜂胶佐剂以及两种佐剂混合鼻内免疫辅助可溶性速殖子抗原（STAg）增强机体黏膜免疫应答的水平。探讨两种佐剂联合应用的免疫效果。方法 将5-6周龄雌性BALB／c小鼠60只随机分为4组（各15只）：20μg STAg，20μg STAg＋40μg蜂胶，20μg　STAg＋1000U　IFN-γ或20μg STAg＋40μg蜂胶＋1000U IFN-γ，均溶于总体积为20μl的PBS中，滴鼻免...

猪蛔虫不同发育期幼虫的收集方法研究

作者：黄翠琴; 陈宁; 邹丰才; 林瑞庆; 朱兴全 刊期：2006年第05期

目的 研究猪蛔虫不同发育期幼虫的收集方法。方法 采用7．5％次氯酸钠氧化感染期蛔虫卵，37℃过夜后，用灭菌生理盐水离心数次，充分洗去次氯酸钠，将沉淀用玻璃珠在振荡器上振荡至全部卵壳破裂，幼虫孵出。用淋巴细胞分离液通过密度梯度离心法将幼虫与卵壳分离，最后收集底层的脱鞘第三期（L3）幼虫。在贝尔曼原理的基础上，在漏斗中加入低浓度...

小鼠肝癌微波消融对宿主Th2／Th1免疫应答的影响

作者：刘大全; 冯炼强; 吕明德; 谭进富; 王竹; 周忠信 刊期：2006年第05期

目的 探讨小鼠肝癌微波消融（microwave ablation，MA）对宿主Th2／Th1免疫应答的影响。方法 建立C57BL／6J小鼠Hepal-6细胞移植肝癌模型，对肿瘤微波消融或手术切除，取正常、荷瘤、手术后及MA后四组小鼠，每组6只，用ELISA法检测各组周围血血浆Th1（IL-12、IFN-γ）和Th2（IL-4、IL-10）细胞因子水平（pg／ml）。结果 荷瘤组比正常组，细胞因子...

卵巢癌肿瘤标记物HE4基因的分子克隆与蛋白表达

作者：陈洁晶; 吴英松; 宁云山; 董文其; 李明 刊期：2006年第05期

目的 构建HE4基因及蛋白表达系统，用于卵巢癌的早期诊断。方法 提取卵巢癌细胞H08910的总RNA，利用RT—PCR技术扩增HE4基因，然后将该片段进行T—A克隆并测序鉴定，纯化回收后亚克隆于原核表达载体PGEX-4T-1中，然后提取质粒，酶切鉴定，最后经IPTG诱导，原核表达重组子在TOPl0宿主菌进行表达，并进行SDS—PAGE、Western Blot分析与鉴定。结果 ...

家蚕蚕蛹变应原的鉴定、分离与纯化

作者：张杰; 刘志刚; 林格; 叶湘锋; 刘瑞涛 刊期：2006年第05期

目的 鉴定、分离和纯化大造（Dazao）品系家蚕（Bombyx mori）的蚕蛹粗提液中的变应原蛋白质组分，为家蚕变应原的蛋白质组学和功能基因组学深入研究奠定基础。方法 采用十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS—PAGE）和Western—blotting，鉴定了家蚕蚕蛹粗浸液中变应原蛋白质分子。并通过阴离子交换和凝胶过滤层析分别对家蚕蚕蛹变应原蛋白...

分子信标PCR检测志贺菌ipaH基因

作者：赵丽华; 周勇; 万成松 刊期：2006年第05期

目的 用分子信标探针PCR快速检测志贺菌属（Shigella）。方法 根据GenBank上公布的福氏志贺菌M32063株ipaH基因序列，设计引物和分子信标探针，以4种细菌进行对照，进行特异性和灵敏度分析，建立Shigella的实时PCR技术快速检测，应用于食物中毒和食品检测。结果 检测20个样本，Shigella呈阳性，其它呈阴性。时间约2h。结论 Shigella分子信标探针...

以痘苗病毒为辅助病毒生产慢病毒载体的探究

作者：马强; 李明; 吴英松 刊期：2006年第05期

目的 建立新型、高产量的慢病毒衍生载体的生产体系。方法 构建主框架质粒pVECRNA、包装质粒pGAGPOL及包膜质粒pVSVG。通过脂质体将这三个质粒共转染至BHK2t细胞，再用含有T,RNA聚合酶基因的重组痘苗病毒vTF-3感染细胞，培养4d后，收集培养上清，0．22μm滤膜过滤。结果 将培养上清进行RT—PCR反应，结果能扩增出96bp长度的目的条带，将培养上清...

HBsAg阴性preS1Ag阳性的HBV携带者血清学标志物及其HBV DNA动态观察

作者：朱平安; 祝玲玲; 申群喜; 谭德明; 朱红秋; 谭萍; 陈素文 刊期：2006年第05期

目的 探讨HBsAS（-）／HBeAg（＋）／HBcAb（＋）／PreS1Ag（＋）少见血清学模式形成的原因，了解该少见模式乙肝病毒携带者体内血清学标志物及其HBVDNA变化情况。方法 采用ELISA、电化学发光免疫分析法（ECLIA）、巢式PCR和实时荧光定量PCR，对该少见模式乙肝病毒携带者HBV血清学标志物和HBVDNA进行检测，每隔3个月复查一次，持续15个月。结果 ...

ABCA1基因R219K多态性与炎性因子IL-1β、ICAM-1的关系

作者：查政; 吴芬芳; 王琦光; 郭志刚 刊期：2006年第05期

目的 检测ABCA1基因第7号外显子中R219K SNP的发生率，并探讨不同基因型与炎性因子IL-1β、ICAM-1水平的关系。方法 冠心病患者112例及正常人108例，分别进行PCR反应及限制性酶切，确定不同的基因型，并检测每例血浆中炎性因子IL-1β、ICAM-1的水平。结果 RR、RK、KK基因型之间进行多重比较。冠心病组IL-1β水平差异显著（P〈0．01），对照组中IL-1...

HCV亚基因复制子支持细胞的筛选

作者：邬刚; 吴英松; 董文其; 陈白虹; 李明 刊期：2006年第05期

目的 寻找新的支持HCV亚基因复制子复制的支持细胞。为研究HCV复制机制、HCV与宿主间的关系，及建立HCV缺陷病毒培养体系提供材料储备。方法 质粒pNNeo3-5B含HCV-N亚基因复制子cDNA，该复制子RNA能在Huh7细胞中有效复制。缺失其中的BsaB Ⅰ-HpaⅠ片段（含NS5B的GDD基序），生成缺陷型复制子质粒pNNeo3-5B（△）。将以上两个质粒线性化后体外转录...

赖型钩端螺旋体601株OmpL1蛋白的表达、纯化及功能分析

作者：林琳; 赵卫; 罗军; 龙敏; 张文炳; 杨军; 曹虹 刊期：2006年第05期

目的 对钩端螺旋体黄疸出血群赖株ompL1基因进行克隆、表达及产物的纯化。方法 从我国钩端螺旋体黄疸出血群赖株基因组中扩增全长ompL1基因片段，克隆至pGEM—T载体，回收经EcoR Ⅰ＋Hind Ⅲ双酶切产物，将其与表达载体pET32a连接，通过酶切图谱和序列分析法筛选出重组质粒。将含重组质粒的宿主菌诱导表达后，提取全菌总蛋白进行SDS—PAGE电泳分...

胡椒碱对SF-21细胞株的杀伤作用及对其形态影响的研究

作者：王佳; 诸葛洪祥; 朱江; 周洪福; 陈明中 刊期：2006年第05期

目的 检测胡椒碱对草地贪夜蛾SF-21细胞的毒性作用和生长抑制作用，以便进一步研究其对昆虫细胞离子通道的影响。方法 胡椒碱处理SF-21细胞后，用MTT微量酶反应比色法、改良微波Giemsa染色法检测细胞死亡率及形态学改变，用冲击式测试法检测细胞生长率及受损细胞的恢复。结果 胡椒碱处理24h后，对SF-21细胞的半数毒性浓度（IC50）为95．37μg／ml...