首页 期刊 临床和实验医学 环介导等温扩增技术快速检测HPV18方法的建立 【正文】

环介导等温扩增技术快速检测HPV18方法的建立

作者:苏华; 陈琛; 马先; 许玉环 河北北方学院附属第一医院检验科; 河北张家口075000; 河北北方学院附属第一医院ICU; 河北张家口075000
人乳头瘤病毒18   环介导等温扩增法   羟基萘酚蓝  

摘要:目的应用环介导等温扩增技术(LAMP)对人乳头瘤病毒18(HPV18)进行基因检测,建立一种快速、可视的HPV18核酸检测方法。方法针对HPV18病毒特异性E6区设计LAMP检测引物,通过调整反应物浓度建立LAMP反应体系,用羟基萘酚蓝(HNB)染料对产物进行可视化判定。通过检测其他不同基因型别的病毒评估引物特异性,检测倍比稀释的临床标本确定其灵敏度,通过LAMP法检测临床标本验证其与PCR法的一致性。结果利用LAMP方法检测到HPV18病毒E6引物的特异性好,恒温65℃条件下反应60 min即可较好完成检测。LAMP特异性好,灵敏度高,灵敏度为2.5×10~3拷贝/ml。LAMP可视化结果判定与PCR凝胶电泳结果相当,二者有较好的一致性(P〉0.05)。结论建立了HPV18病毒的LAMP快速、可视化检测方法,该法操作简便快捷,具有很好的开发应用前景。

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